末梢血量子點降鈣素原檢測在新生兒感染中的臨床價值分析

張 盼,疏 恒,張燕雨,王曉蕾

(無錫市兒童醫院新生兒科，江蘇無錫 214000)

由于新生兒自身特殊的生理、病理特點，感染性疾病發病率高，臨床癥狀不典型，病情進展快，容易引起不良結局，甚至危及生命，尤其是極低和超低出生體質量兒。因此，早期識別、快速診斷并合理應用抗生素極其重要。目前降鈣素原(procalcitonin，PCT)已廣泛應用于感染性疾病的診斷和鑒別診斷，其升高對細菌感染所致的膿毒癥特異性高，可作為診斷膿毒癥和鑒別嚴重細菌感染較好的標志物[1-2]。臨床上常用的PCT檢測方法有定性檢測的免疫層析法、半定量的膠體金比色法及電化學發光法和酶聯免疫熒光法等。這些方法均采用靜脈血血清樣本進行 PCT 定量檢測，存在檢測時間較長，對設備要求高、采血量大、結果回報時間長等不足之處。新生兒尤其是早產兒血管纖細，血容量少，靜脈采血難度大，反復靜脈采血會增加醫源性失血、貧血風險。因此，對于新生兒感染，選擇一種快速、準確、采血量少、適合床邊操作的PCT檢測方法就顯得尤為重要。基于量子點標記技術開發的PCT 全定量快速檢測具有靈敏度、特異度高，適合床旁檢測等優點[3]。本研究旨在通過比較量子點末梢血PCT檢測和傳統靜脈血免疫熒光法PCT檢測結果的一致性，為量子點末梢血PCT檢測應用于新生兒感染臨床快速診斷及指導抗生素合理使用提供理論依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2018年2-3月無錫市兒童醫院收治的40例日齡為3～28 d的新生兒感染患兒作為研究對象，所有研究對象在抽取血液標本前均未使用抗生素。所有研究對象的家屬均簽署知情同意書，本研究由本院倫理委員會批準通過。患兒中男22例，女18例，日齡3～28 d，平均(15.65±6.95) d。

1.2方法

1.2.1靜脈血血清標本PCT檢測 采用瑞萊生物科技江蘇有限公司PCT檢測試劑盒(免疫熒光法)及TZ-310型干式熒光免疫分析儀。在抗生素使用前采集研究對象靜脈血2 mL，3 000 r/min離心5～10 min分離血清，取血清進行PCT檢測。

1.2.2末梢血全血標本PCT檢測 采用深圳金準生物醫學工程有限公司PCT定量測定試劑盒及單通道干式熒光免疫分析儀。在抗生素使用前采集研究對象末梢血30 μL，與樣板稀釋液充分混合，移液槍取100 μL混合液垂直加入檢測卡的加樣孔中，將檢測卡插入分析儀卡槽，點擊“測試” 菜單，儀器15 min自動完成檢測。

2 結 果

2.1兩種方法PCT檢測結果的比較 40例感染患兒，靜脈血血清PCT檢測結果為(1.40±0.21)ng/mL，末梢血全血PCT檢測結果為(1.50±0.20)ng/mL，兩種檢測方法PCT檢測結果差異無統計學意義(t=1.078,P=0.288>0.05)，結果見圖1。

圖1 兩種方法PCT檢測結果的比較

2.2兩種方法PCT檢測結果的回歸分析及相關性分析 以末梢血PCT檢測結果為X軸，靜脈血PCT檢測結果為Y軸，二者之間回歸方程為Y=0.866X+0.292，相關系數r=0.886(P<0.05)，見圖2。

圖2 兩種方法PCT檢測結果的回歸分析及相關性分析

2.3醫學決定水平處兩種檢測方法PCT檢測結果的比較 在0.5 ng/mL和2.0 ng/mL兩個醫學決定水平處，末梢血、靜脈血兩種類型樣本PCT檢測結果符合率分別為100.0%和97.5%，結果見表1、2。

表1 PCT在0.5 ng/mL醫學決定水平處兩種方法的符合率對比(n)

表2 PCT在2 ng/mL醫學決定水平處兩種方法的符合率對比(n)

3 討 論

PCT是無激素活性的降鈣素前肽物質，是由116個氨基酸組成的糖蛋白[4]。PCT的半衰期為25～30 h，在體內外穩定性良好。在生理情況下，PCT表達主要局限于甲狀腺和肺的神經內分泌細胞，但是當機體在出現細菌或真菌感染時，PCT含量快速升高，并且隨著感染進展或控制而持續增高或者下降[5-6]。新生兒感染中主要致病菌為細菌，病情進展快，常常缺乏典型臨床癥狀，容易被漏診或忽略，因此實驗室指標在診斷和鑒別診斷中有著重要意義。研究表明，C反應蛋白、PCT、血常規是極低和超低出生體質量兒醫院感染敗血癥較敏感的早期實驗室診斷指標，PCT特異性最高[7]。李紹錦等[8]研究表明PCT能夠更早期、更準確、更靈敏地診斷新生兒早期感染性疾病。任艷麗等[9]報道PCT在診斷新生兒敗血癥上的靈敏度明顯優于血常規及血培養，且與敗血癥嚴重程度呈正相關，其變化趨勢與感染控制情況基本同步。因此，PCT是早期診斷、鑒別新生兒感染及判斷治療效果非常理想的實驗室指標。

但是，目前PCT檢測主要采用靜脈血血清樣本進行檢測，耗時較長，新生兒尤其是極低和超低出生體質量兒靜脈采血難度較大，反復靜脈采血會增加醫源性失血、貧血風險。張知洪等[10]研究疑似感染者末梢血全血和靜脈血血清樣本PCT檢測結果的一致性，結果表明，末梢血全血、靜脈血血清PCT檢測結果具有較高的一致性。該檢測方法中所需末梢血200～300 μL，PCT檢測方法采用免疫熒光層析法。近年來,利用量子點具有受激發光照射發出熒光,發射光穩定性好等的特性，可以實現高靈敏度的快速定量檢測。何國煒等[3]收集靜脈血離心后血清PCT標本150例，分別用量子點免疫熒光層析法和羅氏電化學發光法進行PCT檢測，發現兩種方法之間一致性和相關性均良好。但迄今為止，末梢血新型量子點PCT檢測在感染性疾病中的臨床應用報道較少。

新生兒出生后血漿PCT存在生理性升高，3 d后可降至健康成人水平[11]，故本試驗針對40例出生后3～28 d的感染患兒進行PCT檢測研究。本研究結果顯示兩種檢測方法PCT結果差異無統計學意義(P>0.05)，具有良好的一致性；相關性分析顯示兩種檢測方法相關系數(r)=0.886(P<0.05)，說明兩種PCT 檢測方法有良好的直線相關關系，在其線性檢測范圍內具有高度一致性。此外，在0.5 ng/mL和2.0 ng/mL兩個醫學決定水平，兩種方法PCT 檢測結果符合率分別為 100.0%和 97.5%，這進一步說明兩種PCT檢測方法具有高度的一致性。并且末梢血量子點PCT檢測采血量僅30 μL，為張知洪等[10]所用免疫熒光法末梢血PCT檢測所需血量的近1/10，更適合于血容量較少的新生兒尤其是早產兒，可減少醫源性失血性貧血的發生。同傳統靜脈血血清樣本PCT檢測相比，末梢血量子點PCT檢測操作簡單，不需離心，檢測時間大大縮短，僅需15 min，且由于儀器小，適合床旁檢測，更有利于癥狀不典型的新生兒感染性疾病的早期診斷及及時干預。

綜上所述，在新生兒感染性疾病診斷過程中，可以使用床旁微量血PCT檢測，替代傳統靜脈血血清PCT檢測，應用于新生兒感染性疾病快速診斷及鑒別診斷。該方法突出優勢在于取血量較少、操作簡單快捷、具有較高的靈敏性和特異性，適合床旁動態監測，對判斷病情、預后、指導抗生素的合理使用等有重要意義，值得在臨床上進一步推廣使用。