姚少玲 南安市動物疫病預防控制中心 福建南安 362300
豬瘟是嚴重危害全球養豬業的重要傳染病之一,給養豬業帶來了巨大的經濟損失。目前,雖然很多豬場已經認識到了CSF的危害,而且很多豬場也免疫了豬瘟疫苗,但是據豬場人員反映還是會有豬瘟的發生。從豬場中了解到大部分豬場對于豬瘟的免疫都是照搬資料上的或者是憑自己感覺來制定免疫程序,這就可能存在豬瘟免疫的漏洞,因此,科學的免疫程序對于防御豬瘟的發生具有重要的作用。目前,常見的豬瘟診斷方法包括臨床診斷和實驗室診斷。實驗室診斷又包括病毒分離和血清學方法診斷。本試驗則采用的是酶聯免疫吸附試驗(ELISA)方法來檢測某規模化豬場的豬瘟抗體水平。
1.1 血清樣品 由福建省某規模化豬場提供;采集60頭仔豬血液樣品(20日齡仔豬血液樣品30份,50日齡仔豬血液樣品30份);15頭母豬血液樣品。
1.2 試劑盒 IDEXX豬瘟Ab抗體檢測試劑盒,購自北京愛德士元亨生物科技有限公司。
1.3 儀器 離心機、移液槍、一次性移液器吸頭、500 mL量筒(配制洗滌液用)、96孔板酶標儀。
2.1 血清制備 采集豬場60頭仔豬、15頭母豬的血液樣品,其中20日齡仔豬血液樣品30份、50日齡仔豬血液樣品30份。3 000 r/min離心5 min,分離血清,置于-20℃保存備用。
2.2 檢測方法 酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。
對樣本的豬瘟抗體進行ELISA檢測,結果見表1、圖1-圖2。20日齡仔豬群豬瘟抗體合格率為20.00%、變異系數52.38%;50日齡仔豬抗體合格率為63.33%、變異系數29.42%;母豬的抗體合格率為80.00%、變異系數19.64%。
從檢測結果可以看出,送檢的20日齡小豬群體豬瘟抗體未能達到合格水平,而且非常不穩定。可能原因有:(1)仔豬沒有吃足初乳;(2)母豬本身的豬瘟抗體水平不高;(3)個別母豬免疫失誤;(4)部分母豬和乳豬有可能感染了免疫抑制病,由此干擾導致豬群免疫反應。建議除了注意以上幾點,找出針對性措施外,還要注意以下幾點:(1)加強母豬的豬瘟疫苗免疫(加強免疫同時特別注意免疫注射操作);(2)檢測陰性仔豬其母豬血液中的豬瘟抗體水平是否合格;(3)必要時在小范圍試驗仔豬的豬瘟疫苗超免。但由于該豬場提供的樣品數目有限,并不能全面反映該豬群小豬的抗體水平。
送檢的50日齡小豬群體豬瘟抗體基本達到合格水平,同時建議仔豬豬瘟二免時間為60日齡左右。最好在仔豬做了豬瘟疫苗二免后的1個月(90日齡左右),再采集15~20頭有代表性的小豬血樣,進行肉豬豬瘟疫苗二免后的免疫效果調查與評價。
送檢的母豬群體豬瘟抗體基本達到合格水平,但有部分豬只的抗體水平不合格,可能的原因有:(1)部分豬免疫失誤(疫苗注射操作失誤、不規范、疫苗失效等存在一些問題);(2)部分豬免疫抑制病(藍耳病、圓環病毒等)的干擾導致豬群免疫抑制;(3)注射疫苗時部分豬正在患病或使用了免疫抑制性藥物,如地塞米松、四環素等;(4)原來母豬群的豬瘟抗體水平太低或有部分豬豬瘟帶毒。從目前檢測的15頭母豬的豬瘟抗體來看,基本已經合格,但檢測數量實在不足,有必要對母豬群的豬瘟抗體做更多更全面的檢測。

表1 送檢樣品ELISA檢測的合格率和變異系數

圖1 豬瘟抗體水平檢測情況

圖2 豬瘟抗體水平合格率和變異系數
通過該次的隨機抗體檢測發現,20日齡仔豬群豬瘟抗體合格率為20.00%、變異系數為52.38%;50日齡仔豬群豬瘟抗體合格率為63.33%、變異系數為29.42%;母豬群豬瘟抗體合格率為80.00%、變異系數為19.64%(一般情況下,變異系數≤45%時豬群較穩定)。說明該豬場仔豬的抗體水平很不穩定,仔豬群體處于豬瘟抗體保護不穩定狀態,建議注意仔豬群的豬瘟免疫。因此,確定具體的免疫程序成了該場防御豬瘟的最主要措施。
通過對試驗數據的分析,鑒于有許多乳豬的豬瘟抗體(母源抗體)不足,必要時要給重胎母 豬加強豬瘟疫苗免疫。待豬場疫情穩定后,改為標準免疫。