血清APN、NSE、IL-6、CD62P與急性腦梗死病情變化的關系

李恒

(滑縣人民醫院神經內二科，河南 滑縣 456400)

急性腦梗死的病情進展速度較快，短期內可導致患者惡性心腦血管疾病的發生，增加患者的病死可能[1，2]?，F階段臨床上缺乏對于急性腦梗死的病情評估性指標，而血清學指標的檢測，能夠為腦梗死患者的診療過程中發揮重要的作用。白細胞介素－6（IL－6）的表達上升能夠通過提高炎癥性因子的激活程度，促進不同炎癥性效應因子對于腦組織的浸潤，進而加劇病情的進展[3]；脂聯素（APN）的上升能夠通過影響到氧化應激性反應的激活，保護神經元細胞免收氧化自由基的損傷[4]；神經元特異性烯醇化酶（NSE）是反應神經元細胞損傷的相關蛋白，腦組織缺氧缺血性損傷的患者中，NSE 的表達可明顯上升[5]；P 選擇素（CD62P）主要表達于血小板膜表面，其能夠通過促進繼發性血栓形成，促進腦栓塞的發生，進而促進腦梗死的病情進展[6]。為了揭示 APN、NSE、IL－6、CD62P 的表達與急性腦梗死的病情關系，從而為臨床上急性腦梗死的病情評估提供參考，本次研究選取2017年1月至2018年1月我院收治的100例急性腦梗死患者， 探討了 APN、NSE、IL－6、CD62P 的表達及其與腦梗死的腦功能評分關系，報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年1月至2018年1月我院收治的100例急性腦梗死患者 （病例組）、同期健康體檢對象100例作為對照組。

病例組，年齡 55～79 歲，平均 66.1±8.4 歲，男 59例、女 41 例，體質量指數（BMI）22.3±2.5kg/m2。 對照組，年齡 53～79 歲，平均 65.2±8.6 歲，男 55 例、女 45例，BMI 22.1±2.3kg/m2。 兩組研究對象的年齡、性別、BMI比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

納入標準：⑴急性腦梗死患者的診斷標準參考1996年全國第四屆腦血管病學術會議制定的相關標準；⑵入院后經頭部CT、MRI檢查確診患者病情；⑶患者年齡范圍≤79歲；⑷對照組為健康體檢志愿者；⑸本研究獲得醫學倫理委員會的批準。

排除標準：⑴惡性腫瘤；⑵腦血管動脈瘤；⑶腦出血；⑷短暫性腦缺血發作；⑸近6個月內具有急性心肌梗死病史、介入手術治療病史；⑹強直性脊柱炎、類風濕性疾病等。

1.2 指標檢測方法 采集患者入院后24h內或者治療后6～8h內的肘部靜脈血4ml，1500r/min離心15min，收集上清液，在每個聚苯乙烯板中加入上述液體0.1ml，4℃過夜孵育，加入磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌3次，每次3min，在每個聚苯乙烯板孔中加入 APN、NSE、IL－6、CD62P 抗體 （1：800 購自南京伯斯金生物公司），37℃孵育30min，加入磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌3次，每次3min，每孔中加入TMB溶液底物 0.1ml，37℃ 20min，加入 2M 硫酸0.05ml終止反應，采用DG5033A酶標儀（南京華東電子科技公司）進行OD值檢測，每個樣本重復2次；采用全自動生化法檢測TG，TC等血脂指標，配套試劑購自南京碧云天公司。

1.3 NIHSS評分分組標準 依據美國國立研究院卒中量表（NIHSS）評分[2]將腦梗死患者分為輕度組（1～4 分）28 例、中度組（5～15 分）48 例、重度組（≥16分）24例。

1.4 統計學方法 計量數據表述采用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗、單因素方差分析法；計數資料組間比較采用χ2檢驗；多元性分析采用多元線性回歸分析法；P值<0.05說明差異有統計學意義，統計軟件采用SPSS 16.0版本。

2 結果

2.1 兩組研究對象的一般資料及實驗室指標比較病例組的 SBP、DBP、TG、TC、LDL-C、 血清 APN、NSE、IL-6、CD62P水平與對照組比較，差異具有統計學意義（P<0.05）；見表 1。

表1 兩組研究對象的一般資料及實驗室指標比較（x±s）

2.2 不同NIHSS評分患者實驗室指標比較 輕度組、中度組及重度組的血清APN、NSE、IL-6、CD62P水平在三組間比較，差異均具有統計學意義 （P<0.05），APN在三組間呈逐漸降低的趨勢、NSE、IL-6、CD62P在三組間呈逐漸升高的趨勢；見表2。

表2 不同NIHSS評分患者實驗室指標比較（x±s）

2.3 多元線性回歸分析 以病例組的NIHSS評分作為因變量、血清APN、NSE、IL-6、CD62P作為自變量，采用多元線性回歸方法分析顯示，APN水平與急性腦梗死患者神經功能受損呈負相關 （β=-0.628，P<0.05），NSE、IL-6、CD62P 水平升高與急性腦梗死患者神經功能受損呈正相關 （β值分別為0.591、0.470、0.511，P<0.05）；見表 3。

表3 相關性分析結果

3 討論

基礎性高血壓或者高血脂癥的發生，均能促進急性腦梗死的發生風險的上升，而臨床上急性腦梗死的發生，能夠導致患者致殘率和多器官功能率的上升[7]。急性腦梗死導致的患者遠期腦功能的障礙或者中樞神經系統功能障礙的發生，能夠顯著影響到患者的生活質量[8，9]。而對于急性腦梗死患者腦功能的預后評估，能夠在指導腦梗死的治療或者臨床預后方面發揮一定的作用、雖然磁共振檢測能夠評估急性腦梗死的病情，但磁共振檢查的費用較高，檢查耗時較長，短期內難以反復動態檢測觀察。而本次研究對于急性腦梗死患者血清中 APN、NSE、IL-6、CD62P的表達分析研究，能夠揭示腦梗死患者病情進展機制。

APN是脂褐素代謝相關因子，其表達濃度的上升能夠保護氧化應激性反應，降低氧化自由基對于神經元細胞的損傷?；A方面的研究認為，APN的上升能夠提高還原性復合物的濃度，中和過度的自由基的激活，減輕腦組織神經元細胞的破壞[10]；NSE主要表達于神經元細胞膜或者線粒體等細胞器中，在神經內分泌腫瘤或者神經元細胞中存在明顯NSE的表達。而腦組織中神經元細胞的損傷能夠促進NSE的釋放，并通過血腦屏障進而進入外周血中[11]；IL-6是炎癥性相關指標，其能夠促進多種炎癥性因子如腫瘤壞死因子等釋放，進而促進腦組織的炎癥性損害[12]；CD62P是P選擇素，其能夠招募炎癥富集，促進炎癥性信號通路的激活，從而影響到腦組織的損害。

本次研究發現，在腦梗死患者中，APN、NSE、IL-6、CD62P的表達濃度存在明顯的差異，其中APN的表達明顯下降，而NSE、IL-6、CD62P的表達明顯上升，提示了不同指標的改變均可能影響到了腦梗死的病情進展過程。分析其基礎方面的原因，比較不同的文獻，主要考慮與 APN、NSE、IL-6、CD62P的下列幾個方面的病理性作用有關[13]：⑴APN的表達下降失去了其對于線粒體自由基的損傷保護作用，導致一氧化氮或者氧自由基的釋放增多；⑵IL-6的上升能夠上調下游腫瘤壞死因子a的激活程度，促進神經元鞘膜完整性的破壞；⑶CD62P的上升能夠導致組胺受體的激活，提高了血管內皮細胞的過敏性損傷，促進了腦血管的痙攣和腦血流灌注的異常。王秀菊等[14]研究者發現了與本次研究較為一致的結論，本研究發現在腦血管疾病患者中，APN的表達濃度可平均上升40%以上。美國國立研究院卒中量表（NIHSS）是評估患者病情程度的指標，本次研究中發現，隨著患者病情的加重，APN的表達明顯下降，而NSE、IL-6、CD62P的表達明顯上升，提示了相關細胞因子的表達與腦梗死患者的病情密切相關。分析其原因，考慮由于NSE、IL-6、CD62P的表達上升，能夠導致神經元細胞突觸傳遞穩定性的改變，導致神經電生理的異常，進而促進了腦梗死病情的進展。最后，危險因素分析可見，APN、NSE、IL-6、CD62P 的表達與神經功能損傷具有密切的相關關系，進一步提示了相關指標的表達與腦梗死患者腦功能的聯系。

綜上所述，在急性腦梗死患者中，APN的表達明顯下降，而NSE、IL-6、CD62P的表達明顯上升，同時相關指標的表達與腦梗死患者的腦功能密切相關。后續相關研究可以探討APN、NSE、IL-6、CD62P的表達與腦梗死患者臨床預后的關系。