焦作某醫(yī)院中段尿分離糞腸球菌與屎腸球菌耐藥性分析

任艷利 ，張偉 ，侯豫娜 ，薄濤 ，商安全

(1.焦作市第五人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 焦作 454000；2.同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 200065)

腸球菌是人類胃腸道與泌尿道的正常菌群，也是院內(nèi)感染的常見病原菌之一。隨著侵入性體內(nèi)插管、放化療、機(jī)械式通氣呼吸機(jī)、激素類、生物制劑及廣譜抗菌藥物的使用，使得腸球菌尤其是糞腸球菌與屎腸球菌的分離率及耐藥性不斷增加[1]。在細(xì)菌性尿路感染中，糞腸球菌與屎腸球菌的分離率是僅次于大腸埃希菌的致病菌[2]。由于腸球菌細(xì)胞壁厚，耐藥機(jī)制復(fù)雜，且對(duì)克林霉素、頭孢菌素等多種藥物天然耐藥，臨床治療可選擇藥物有限[3]。為了解本院中段尿分離糞腸球菌與屎腸球菌耐藥性，對(duì)2014年1月至2017年12月間中段尿培養(yǎng)分離出的326株糞腸球菌與屎腸球菌耐藥性進(jìn)行回顧性分析，為經(jīng)驗(yàn)治療及感染防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 菌株來源于本院2014年1月至2017年12月門診及住院送檢的中段尿培養(yǎng)分離病原菌，同一患者剔除相同病原菌。

1.2 質(zhì)控菌株 糞腸球菌ATCC29212，屎腸球菌ATCC51299。

1.3 方法 按照 《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第4版）[4]對(duì)中段尿標(biāo)本進(jìn)行接種、培養(yǎng)及分離。標(biāo)本留取嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，經(jīng)中段尿定量培養(yǎng)，革蘭陽性菌大于104CFU/ml作為感染病原菌，分離培養(yǎng)出的糞腸球菌與屎腸球菌納入分析數(shù)據(jù)。采用珠海黑馬微生物鑒定產(chǎn)品進(jìn)行細(xì)菌鑒定及藥敏實(shí)驗(yàn)。藥物敏感性試驗(yàn)依據(jù)美國實(shí)驗(yàn)室臨床標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（CLSI）2015 版文件進(jìn)行判定[5]。

1.4 數(shù)據(jù)分析 應(yīng)用WHONET 5.6軟件對(duì)藥敏數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 糞腸球菌與屎腸球菌的檢出率 2014年1月至2017年12月中段尿培養(yǎng)標(biāo)本共分離出糞腸球菌與屎腸球菌326株，其中糞腸球菌188株，占57.67%；屎腸球菌138株，占42.33%。

2.2 糞腸球菌與屎腸球菌對(duì)常用抗菌藥物的藥敏結(jié)果 見表1。

3 討論

來自中段尿分離培養(yǎng)出的326株糞腸球菌與屎腸球菌，糞腸球菌188株，占57.7%，屎腸球菌138株，占42.3%，糞腸球菌分離率高于屎腸球菌，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=15.337，P<0.05），與文獻(xiàn)報(bào)道一致[6]。

藥敏結(jié)果顯示，糞腸球菌與屎腸球菌耐藥率差別較大，僅有高濃度慶大霉素和利奈唑胺對(duì)兩種腸球菌的耐藥性相近，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05）。糞腸球菌僅對(duì)氯霉素和四環(huán)素耐藥性高于屎腸球菌，而屎腸球菌對(duì)氨芐西林、紅霉素、青霉素、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、呋喃妥因、利福平耐藥性均高于糞腸球菌，與所報(bào)道文獻(xiàn)一致[7]。

表1 糞腸球菌與屎腸球菌對(duì)各抗菌藥物耐藥率

糞腸球菌對(duì)青霉素和氨芐西林的耐藥率分別為4.8%、2.7%，屎腸球菌對(duì)青霉素和氨芐西林的耐藥率分別為 93.5%，92.8%，提示糞腸球菌引起感染時(shí)可使用青霉素、氨芐西林經(jīng)驗(yàn)治療，而屎腸球菌則不適合使用此類藥物，其原因可能由于屎腸球菌青霉素結(jié)合蛋白和青霉素親嗜性減低，對(duì)青霉素和氨芐西林的敏感性降低有關(guān)[8]。糞腸球菌和屎腸球菌對(duì)呋喃妥因敏感性均較高，可作為泌尿系感染經(jīng)驗(yàn)治療的首選藥物，但呋喃妥因?qū)δI臟有一定的毒性，應(yīng)謹(jǐn)慎使用[9]。糞腸球菌與屎腸球菌對(duì)高濃度慶大霉素耐藥率分別為68.6%和76.1%，可能是由于腸球菌產(chǎn)生的氨基糖苷修飾酶導(dǎo)致其耐藥性強(qiáng)[10]，因此在經(jīng)驗(yàn)性用藥時(shí)，不建議使用高濃度慶大霉素與作用于細(xì)胞壁抗生素聯(lián)合使用。

糞腸球菌與屎腸球菌對(duì)環(huán)丙沙星的耐藥率分別為29.8%和88.4%，糞腸球菌與屎腸球菌對(duì)左氧氟沙星的耐藥率分別為23.4%和81.9%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），因此糞腸球菌適宜使用此類抗菌藥物進(jìn)行治療，但因此類藥物可對(duì)兒童骨骼產(chǎn)生不良影響，即便藥敏結(jié)果為敏感，也不應(yīng)選用[11]。糞腸球菌與屎腸球菌對(duì)紅霉素耐藥率分別為81.4%和 93.5%，兩者耐藥率菌均超過 80%，高耐藥率的原因可能是由于腸球菌erm基因編碼紅霉素甲基化酶表達(dá)，導(dǎo)致紅霉素靶點(diǎn)位置發(fā)生改變[12]。糞腸球菌與屎腸球菌對(duì)利奈唑胺的耐藥率分別為1.1%和2.9%，糞腸球菌與屎腸球菌耐藥率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），兩種腸球菌對(duì)利奈唑胺耐藥率較文獻(xiàn)報(bào)道[13，14]數(shù)據(jù)稍高，屎腸球菌對(duì)利奈唑胺耐藥率稍高于2016年中國CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)耐藥率[15]，使用χ2檢驗(yàn)與其報(bào)道耐藥數(shù)據(jù)分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=38.340，P＜0.05）。腸球菌對(duì)利奈唑胺這種新型抗菌藥物耐藥的原因，可能是因?yàn)?3s rRNA突變、氯霉素－氟甲砜霉素耐藥（cfr)基因?qū)е耓16]，也可能與本院高頻率使用利奈唑胺治療腸球菌感染有關(guān)。糞腸球菌與屎腸球菌未檢出對(duì)萬古霉素與替考拉寧耐藥菌株，說明萬古霉素與替考拉寧仍對(duì)糞腸球菌與屎腸球菌有著很好的抗菌活性，但國內(nèi)已有耐藥菌株的報(bào)道[17]，作為腸球菌感染的最后一道防線，臨床醫(yī)生應(yīng)慎重使用此類藥物，以延緩耐藥菌株的出現(xiàn)。由于屎腸球菌與糞腸球菌對(duì)藥物敏感性差異較大，因此要求對(duì)菌種準(zhǔn)確鑒定到種，依據(jù)藥敏結(jié)果使用抗生素。

綜上述所，2014年1月至2017年12月中段尿培養(yǎng)標(biāo)本中，糞腸球菌分離率高于屎腸球菌，糞腸球菌多數(shù)藥物耐藥性要低于屎腸球菌，治療腸球菌引起的尿路感染，要求實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)確鑒定到菌種，并依據(jù)抗菌藥物敏感性試驗(yàn)來作為藥物使用的依據(jù)。檢出的利奈唑胺耐藥糞腸球菌與屎腸球菌，應(yīng)引起臨床醫(yī)生與感控人員的注意，加強(qiáng)細(xì)菌耐藥性檢測(cè)，防止細(xì)菌耐藥性的增加。