AFP-L3與凝血四項對早期診斷肝癌特異性、敏感性及其意義分析

賀淑巍 ，王旭 ，張晶晶 ，周帆 ，韓星敏

(1.鄭州大學第一附屬醫院核醫學科，河南 鄭州450052；2.河南省分子影像醫學重點實驗室，河南 鄭州 450052)

原發性肝癌（primary liver cancer，PHC）是臨床常見的惡性腫瘤之一，早期無明顯癥狀，臨床上的就診患者大多數已至晚期，預后較差[1，2]。早期發現、早期治療是延長患者生存時間、改善預后的關鍵，AFP是目前臨床診斷PHC常用的腫瘤標志物，但其靈敏度和特異性均較差，相當一部分肝癌早期階段患者的血清AFP未見明顯升高[3，4]。

臨床上一直致力于尋找靈敏度高、特異性好的血清腫瘤標志物，有研究發現，多個血清腫瘤標志物聯合檢測往往具有更好的診斷效果[5]。本研究探討了甲胎蛋白異質體 （alpha fetoprotein heterogeneity，AFP-L3）、 凝 血 酶 原 時 間 （prothrombin time，PT）、活化部分凝血酶時間 （activated partial thromboplastin time，APTT）、 凝血酶時間（thrombin time，TT）、纖維蛋白原（fibrinogen，Fg）對于早期診斷PHC的臨床價值，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取經病理學檢查確診PHC患者100例（PHC組）、肝硬化患者100例（肝硬化組）、健康體檢對象100例（健康組），收集時間2016年1月－2017年9月。

PHC組，男57例、女43例，年齡44～76歲，平均 63.2±10.4 歲，血清白蛋白（ALB）33.2±3.9g/L，總膽紅素 （TBIL）21.9±8.4μmol/L。 肝硬化組， 男 60例、女 40 例，年齡 46～79 歲，平均 64.4±12.2 歲，血清 ALB 34.0±3.5g/L， 血清 TBIL 23.3±10.0μmol/L。健康組，男 55例、女 45例，年齡 42～79歲，平均62.9±13.0 歲， 血清 ALB 34.7±3.3g/L， 血清 TBIL 14.2±5.0μmol/L。 三組研究對象的年齡、性別比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 納入排除標準

1.2.1 納入標準 ⑴PHC患者均經過病理學檢查證實；⑵肝硬化患者經過CT、超聲、MRI檢查證實；⑶健康組來源于本院體檢中心，體檢結果健康的自愿者；⑷PHC患者既往無放化療、免疫治療病史；⑸本研究獲得研究對象的知情同意。

1.2.2 排除標準 ⑴合并其他部位惡性腫瘤；⑵血液系統疾病；⑶轉移性肝癌；⑷因其他疾病接受免疫治療、長期服用抗凝藥物等；⑸嚴重的營養不良、貧血患者。

1.3 指標檢測方法 抽取研究對象清晨空腹肘靜脈血，4000r/min離心15min分離血清，－80℃冰箱保存待測。采用微量離心柱法分離血清AFP－L3，采用羅氏電化學發光法測定洗脫液中AFP－L3水平，檢測儀器為貝克曼庫爾特UniCel DxI800免疫分析儀，嚴格按照試劑盒說明書操作。另取一份血標本，采用磁珠凝固法檢測 PT、APTT、TT、Fg 等指標，檢測儀器為法國STA－R全自動血凝儀。

1.4 統計學方法 采用SPSS 16.0進行數據分析，計量資料采用（x±s）表述，多組間比較采用單因素方差分析法，組間兩兩比較采用LSD－t檢驗；繪制ROC曲線并求取最佳診斷界值對應的靈敏度、特異度、漏診率、誤診率；P值＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 三組研究對象的 AFP－L3、PT、APTT、TT、Fg 檢測值比較 PHC 組的 AFP－L3、PT、APTT、TT 檢測值顯著的高于對照組 （P＜0.05）；PHC 組的 Fg檢測值顯著的低于對照組 （P＜0.05）；PHC 組 AFP－L3、Fg 顯著的高于肝硬化組（P＜0.05）；肝硬化組的 PT、APTT、TT 顯著的高于對照組（P＜0.05），肝硬化組的 Fg 低于 PHC 組（P＜0.05）；見表 1。

2.2 AFP－L3、PT、APTT、TT、Fg 診斷 PHC 的價值血清 AFP－L3、PT、APTT、TT、Fg 單獨應用診斷 PHC的診斷學指標見表2、ROC曲線見圖1；血清AFPL3、PT、APTT、TT、Fg 聯合應用診斷 PHC 的靈敏度為 94.19%、特異度為 90.73%、漏診率為5.18%、誤診率為 9.27%、AUC 值為 0.918；見表 2、圖 1。

圖1 AFP-L3、PT、APTT、TT和Fg診斷PHC的ROC曲線分析

表 1 三組研究對象的 AFP-L3、PT、APTT、TT、Fg 檢測值比較（x±s）

表 2 AFP-L3、PT、APTT、TT、Fg 診斷 PHC 的價值

3 討論

肝癌是一種發病率、死亡率均較高的惡性腫瘤，其病因和發病機制尚未完全確定，目前認為與肝硬化、病毒性肝炎以及黃曲霉素等化學致癌物質和環境因素有關[6-8]。由于早期缺乏特異性癥狀，大多數肝癌患者就診時已是晚期，其5年生存率處于較低水平。早期發現、早期治療是提高患者生存率的關鍵[9，10]。目前臨床常采用AFP作為肝癌的診斷指標之一，AFP是由胚胎肝細胞合成的一種球蛋白，在肝癌患者中表達增加。但是其漏診率、假陽性率較高，在部分肝臟良性疾病患者體內也會升高，無法單純通過血清AFP檢查結果來鑒別肝臟良、惡性病變。

近年來臨床上一直致力于尋找靈敏度高、特異性好的肝癌診斷指標。有研究表明，AFP的一種異質體AFP-L3在肝癌患者體內的表達增高，AFP-L3是由肝癌細胞產生的蛋白類物質，比AFP定量具有更高的特異性，在肝癌病變早期，肝細胞發生血管浸潤和轉移傾向時即可高表達，是鑒別良、惡性肝病的一項新指標[11，12]。本研究中肝癌患者的AFP-L3水平顯著的高于健康人群和肝硬化患者。這一結果提示，AFP-L3水平在鑒別診斷肝臟良、惡性病變中具有一定的價值。

肝臟是蛋白質的的合成場所，而凝血因子大多是蛋白質，一旦肝臟發生病變，將會影響凝血因子的合成[13]。因此是否能夠通過凝血指標的檢測來反映肝臟功能值得臨床探究。APTT可反映內源性凝血系統狀況，其水平增高見于血漿因子Ⅷ、因子Ⅸ和因子XI水平減低；PT可反映外源性凝血系統狀況，其水平增高見于凝血因子Ⅱ、因子Ⅴ、因子Ⅶ、因子Ⅹ缺乏及纖維蛋白原缺乏、維生素K缺乏、嚴重肝臟疾病、纖溶亢進、彌漫性血管內凝血等；TT可反映纖維蛋白原轉為纖維蛋白的時間，其水平增高見于DIC纖溶亢進期、低纖維蛋白原血癥；Fg可反映纖維蛋白原的含量，其水平降低見于DIC消耗性低凝溶解期、原發性纖溶癥、重癥肝炎、肝硬化等疾病[14]。

本研究對肝癌、肝硬化、健康人群的凝血功能進行檢測，發現肝癌患者的PT、APTT、TT檢測值顯著的高于健康人群；Fg檢測值顯著的低于健康人群。肝硬化組的PT、APTT、TT顯著的高于健康人群，肝硬化患者的Fg低于健康人群；肝癌患者的Fg顯著的高于肝硬化患者；肝硬化患者的PT、APTT、TT顯著的高于健康人群，肝硬化患者的Fg低于肝癌患者。人體多種凝血因子在肝臟合成，一旦發生肝臟功能損傷，可引起機體凝血因子合成減少、凝血因子大量消耗后導致凝血功能障礙。尤其是肝硬化可導致肝細胞壞死，使肝臟合成凝血因子的功能變差，肝硬化患者的門靜脈高壓可導致血小板減少，使血小板喪失應有的凝血作用[15]。肝癌患者的肝硬化、門靜脈高壓程度往往更加嚴重，脾臟充血、腫大、功能亢進，使血小板的完整性遭到更加嚴重的破壞，不僅使血小板數量上大大減少，凝血作用降低。因此凝血指標可在一定程度上反映肝臟功能的損傷程度[15]。但凝血功能指標與多系統的病理改變有關，單獨使用凝血功能指標對肝臟功能損傷的診斷特異性較差。

本研究將血清 AFP-L3、PT、APTT、TT、Fg 聯合應用診斷肝癌，發現其靈敏度為94.19%、特異度為90.73%、漏診率為5.18%、誤診率為9.27%、AUC值為 0.918。 這一結果提示，血清 AFP-L3、PT、APTT、TT、Fg聯合應用對于早期診斷肝癌的靈敏度和特異度好，漏診率、誤診率低，可將其作為早期診斷肝癌的指標。

綜上所述， 血清 AFP-L3、PT、APTT、TT、Fg 聯合應用對于早期診斷肝癌具有一定的臨床價值。