聚苯乙烯磺酸鑭Beagle犬體內藥動學研究

鄭曉霞，程艷玲，何小華，劉 純

（山東省藥學科學院，山東 濟南 250101）

慢性腎功能衰竭（chronic renal failure，CRF）時，機體磷代謝發生紊亂，伴隨血磷升高出現繼發性甲狀旁腺機能亢進，維生素D代謝障礙，腎性骨病及心血管系統鈣化等并發癥，嚴重影響患者的生活質量。高血磷作為一種獨立的危險因素對機體的損害越來越受到人們的重視[1]。聚苯乙烯磺酸鑭是一種新型非鈣磷酸鹽結合劑，可用于控制慢性腎衰竭患者的高磷血癥[2]。目前國內對其臨床前藥動學方面的研究甚少，本實驗采用電感耦合等離子質譜儀（ICP-MS）測定犬血漿中鑭的含量，研究犬口服聚苯乙烯磺酸鑭后體內的藥動學特征，為臨床合理應用提供依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

XSERIES2型等離子體質譜儀（Thermo公司）；TDL-5臺式低速大容量離心機（江蘇金壇市醫療儀器廠）；YB502型電子天平（上海海康電子儀器廠）。

1.2 試藥

聚苯乙烯磺酸鑭（微黃色粉末，批號：20080304，由遼寧諾康生物制藥有限責任公司提供，貯藏：密閉保存）；聚苯乙烯磺酸鑭原料（含量：本品按干燥品計算含La為17.7%，批號：20080215，由遼寧諾康生物制藥有限責任公司提供，貯藏：密閉保存）；銠（由國家鋼鐵材料測試中心鋼鐵研究總院提供，編號：GSB-G-620379-90，濃度1 mg/ml）；硝酸（分析純，蘇州晶瑞，批號：8032090）；鹽酸（分析純，蘇州晶瑞，批號：8031455）；高氯酸（分析純，上海金鹿，批號：20071206）。

2 方法與結果

2.1 試驗方法

18只Beagle犬隨機分為高、中、低劑量組，每組6只，雌雄各半。于早晨分別口服給予聚苯乙烯磺酸鑭1.5，0.75，0.375 g/kg，各組動物于藥前及給藥后0.5，1，1.5，2，3，4，6，8，10，12，24 h自犬后肢靜脈取血約3.0 ml，置肝素化離心管中，3500 r/min離心10 min，分離血漿，于-20 ℃冷凍貯存待測。

2.2 檢測條件

采用電感耦合等離子體質譜儀進行檢測。ICP功率1250 W，反射功率2 W，取樣錐孔徑1.0 mm，截取錐孔徑0.7 mm，模擬電壓1800 V，計算機電壓3000 V，冷卻氣13.0 L/min，輔助氣0.7 L/min，霧化氣0.93 L/min，采樣深度141，水平78，垂直443，內標元素銠（濃度5 μg/L）。

2.3 血漿樣品處理

在干凈坩堝中準確加入待測血漿0.5 ml，加硝酸8 ml，在電熱板上120 ℃加熱2 h，放置過夜，加高氯酸2 ml，電熱板160 ℃加熱4 h，溫度升至260 ℃，加熱至白煙冒盡，加1+1王水4 ml，溶解殘渣，冷卻后加蒸餾水定容至25 ml，搖勻，進樣測試。

2.4 標準曲線及定量下限

取空白犬血漿，分別加入聚苯乙烯磺酸鑭標準液配制濃度為5，10，50，100，250，500 μg/L的血漿樣品，按2.3項方法操作，以待測物電感耦合等離子體質譜強度值（ICPS）為縱坐標Y，待測物濃度為橫坐標X，求得聚苯乙烯磺酸鑭中鑭元素的線性回歸方程為Y=22 656.699X-10 882.973，r=0.999 93，線性范圍為5～500 μg/L。定量下限RSD為5.86%。

2.5 精密度與準確度

取空白犬血漿，配制低、中、高3個濃度（血漿濃度分別為10，250，500 μg/L）的聚苯乙烯磺酸鑭樣品，按2.3項方法操作，每一濃度進行5樣本分析，連續配制測定3天，采用當日所建立的標準曲線計算鑭濃度，根據結果計算分析方法的精密度與準確度。結果日內精密度RSD分別為2.34%，0.52%，0.65%；日間精密度RSD分別為2.01%，0.34%，0.02%。3個血漿藥物濃度的準確度分別為95.78%，100.00%，97.66%。結果符合生物樣本分析方法要求。

2.6 血漿樣品穩定性試驗

分別考察了低、中、高3個濃度（血漿濃度分別為10，250，500 μg/L）的聚苯乙烯磺酸鑭樣本預處理后室溫放置24 h、反復凍融2次及長期冷凍條件下放置30 d的穩定性。結果表明，樣本處理后室溫放置24 h后，含量測定結果的準確度為99.6%～111.35%；反復凍融2次的結果準確度為99.78%～108.80%；長期冷凍條件下放置30 d的結果準確度為100.05%～109.50%，具體結果見表1。以上結果符合生物樣本分析方法指導原則的有關規定，可用于藥動學研究。

表1 不同處理方式下血漿樣品濃度/μg·L-1

2.7 提取回收率考察

取空白血漿，按2.3項方法操作，殘渣加入聚苯乙烯磺酸鑭標準液配成濃度分別為10，250，500μg/L的應用液，直接進樣，得應用液ICPS值A0。取空白血漿，加入聚苯乙烯磺酸鑭標準液配制低、中、高3個濃度（聚苯乙烯磺酸鑭鑭濃度分別為10，250，500 μg/L）的樣品，按2.3項方法操作，每一濃度進行5樣本分析，得提取后ICPS值At。以At/A0×100計算提取回收率。3個血漿藥物濃度的回收率分別為102.59%，99.62%，97.59%。

2.8 藥動學研究結果

Beagle犬灌胃給予聚苯乙烯磺酸鑭高、中、低劑量組的平均血漿藥物濃度-時間曲線見圖1，主要藥動學參數見表2。

圖1 平均血漿藥物濃度-時間曲線

表2 聚苯乙烯磺酸鑭的主要藥動學參數

Beagle犬分別灌胃給予聚苯乙烯磺酸鑭低、中、高3個劑量后，結果顯示鑭的Beagle犬體內過程符合線性動力學特征，AUC、Cmax均呈劑量相關性。劑量相關性評價數據見表3。

表3 主要藥動學參數劑量相關性評價數據

3 討論

80%的腎透析患者患有高磷血癥[3]，因此嚴格控制飲食中的磷及調節合理的血磷濃度是減少心血管并發癥、提高患者生活質量、降低病殘率和死亡率的關鍵。鑭系自然界的稀有元素之一，現代藥理學研究表明其三價陽離子化合物與磷有很強的親和力[4]。

聚苯乙烯磺酸鑭口服后通過與胃腸道內的鉀離子發生離子交換反應而結合鉀離子，釋放鑭離子，然后鑭離子與胃腸道內的磷結合，形成水溶性小、不易通過生物膜的磷酸鑭分子，隨糞便排出體外，從而達到降低血磷、有效控制高磷酸鹽血癥的目的[5]。研究聚苯乙烯磺酸鑭在動物體內的藥動學特征，可了解鑭離子在生物體內的過程及動態變化規律，為藥物的給藥劑量與間隔時間提供依據，還可為臨床藥動學提供參考，通過分析測定藥物在血液中的濃度來評價療效和確定給藥方案，使給藥方案個體化，以提高藥物治療水平，達到臨床安全、有效、合理用藥的目的。

本試驗建立了ICP-MS測定犬血漿中鑭濃度的方法，以銠為內標，硝酸硝化后，加入高氯酸，高溫加熱處理后，加王水溶解殘渣，加蒸餾水定容后進行檢測，分析方法符合生物樣品測定的有關規定。本檢測方法特異性強、靈敏度高、重復性好、操作快速簡便，已成功應用于聚苯乙烯磺酸鑭散藥動學研究。