蘭州地區(qū)獻血者HBV DNA檢出率及相關(guān)因素分析

潘 登，吳康樂，張支鳳，秦龑麗

（甘肅省血液中心，甘肅 蘭州 730046）

為保證輸血安全，減少經(jīng)血傳染病的傳播，本中心自2011年開展核酸檢測工作，并于2015年逐步實現(xiàn)核酸檢測全覆蓋，建立相關(guān)檢測程序，提出管理要求。核酸檢測作為保障血液安全的重要措施，可持續(xù)降低血液風(fēng)險，保證血液篩查的質(zhì)量。本文從HBV DNA陽性檢出率分析與之相關(guān)的影響因素，旨在討論無償獻血人群中可能影響乙型肝炎病毒感染的因素，做好“獻血者血管到用血者血管”的全過程質(zhì)量管理。

1 資料與方法

1.1 資料

以2015—2017年來本中心無償獻血者的血檢標(biāo)本為資料，所有獻血者經(jīng)詢問病史且體檢合格，符合無償獻血條件。

1.2 試劑及儀器

HBsAg ELISA試劑購于北京萬泰和廈門新創(chuàng)公司，HBV/HCV/HIV-1核酸檢測試劑盒購于上海科華公司，HBsAg及HBV DNA質(zhì)控品購自北京康徹斯坦生物技術(shù)有限公司（以上試劑均為批批檢合格，且在有效期內(nèi)使用）。采用STAR全自動加樣系統(tǒng)（奧斯邦HAMILTON）、FAME24/20全自動酶免系統(tǒng)（奧斯邦HAMILTON）、核酸匯集及提取系統(tǒng)（瑞士HAMILTON IVD）、擴增系統(tǒng)（ABI 7500）進行檢測。

1.3 實驗方法

采用血清學(xué)和病毒核酸檢測對所有樣本進行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的檢測，同時使用上海科華公司的全自動血液核酸檢測方法進行HBV/HCV/HIV-1混樣后的分項目檢測，檢測結(jié)果為檢出的樣本需要再次進行拆分鑒別試驗，鑒別結(jié)果檢出后方可確認為檢出率。所有獻血者標(biāo)本都先經(jīng)兩遍HBsAg ELISA試劑檢測為陰性后再進行HBV DNA檢測。

1.4 結(jié)果判斷

采用實驗室信息管理系統(tǒng)LIS（海深威公司）對檢測結(jié)果進行讀取、保存、匯總，并判斷標(biāo)本是否合格。相關(guān)參數(shù)設(shè)置嚴(yán)格按照試劑盒操作說明書進行。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析

使用SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，不同來源和不同年份獻血者HBV DNA檢出率的比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2015—2017年不同獻血方式獻血者HBV DNA檢出率結(jié)果比較（見表1）

表1 2015—2017年不同獻血方式獻血者HBV DNA檢出率結(jié)果比較[n（?）]

2015—2017 年共計檢測168 559人份，HBV DNA的檢出率為3.4?，整體呈逐年下降的趨勢。自愿獻血人群、團體獻血人群、互助獻血人群和應(yīng)急獻血人群占有率分別為43.23%、37.07%、9.96%、9.74%，而HBV DNA檢出率由高到低分別為應(yīng)急獻血人群、自愿獻血人群、互助獻血人群、團體獻血人群。團體獻血人群檢測數(shù)是自愿獻血人群檢測數(shù)的85.75%，而HBV DNA的檢出率是自愿獻血人群的22.92%，兩者之間有差異（χ2=14.71，P＜0.05）。

2.2 2015—2017年不同性別、不同民族獻血者HBV DNA檢出率結(jié)果比較（見表2～3）

表2 2015—2017年不同性別獻血者HBV DNA檢出率結(jié)果比較[n（%）]

表3 2015—2017年不同民族獻血者HBV DNA檢出率結(jié)果比較[n（%）]

表2表明，獻血人數(shù)呈逐年上升趨勢，男性獻血者多于女性，男性感染者是女性的6倍，男女性HBV DNA檢出率比較，有顯著性差異（χ2=10.77，P＜0.05）。表 3顯示，漢族是蘭州地區(qū)的獻血主力軍，HBV DNA感染者是其余各民族之和的 10倍，其余各民族之間比較，無顯著性差異（χ2=0.009，P＞0.05）。

2.3 2015—2017年不同年齡獻血者HBV DNA檢出率結(jié)果比較（見表 4）

表4 2015—2017年不同年齡獻血者HBV DNA檢出率結(jié)果比較[n（%）]

由表4看出，獻血人群集中在18～30歲，HBV DNA檢出率以40歲作為分界線，18～40歲與41歲及以上比較，有顯著性差異（χ2=40.70，P＜0.05），18～30 歲與 41～50 歲比較，有顯著性差異（χ2=26.16，P＜0.05），18～30歲與 50歲以上比較，有顯著性差異（χ2=37.75，P＜0.05）。

2.4 2015—2017年不同戶籍獻血者HBV DNA檢出率結(jié)果比較（見表 5）

表5 2015—2017年不同戶籍獻血者HBV DNA檢出率結(jié)果比較[n（%）]

甘肅省是一個狹長地帶，我們將甘肅省分為東（平?jīng)鲆詵|）、中（其余城市）、西（武威以西）三部分。表5顯示，戶籍所在地為中部的HBV DNA感染者最多，所占比例為79.3%。

3 討論

自1998年10月1日《獻血法》正式實施以來，以法律形式確立了無償獻血制度，這是無償獻血制度富有時代意義的標(biāo)志性變化，2018年是我國《獻血法》頒布實施20周年，但是據(jù)世界衛(wèi)生組織發(fā)布的《2017年全球肝炎報告》顯示，全球約有3.25億人感染慢性乙肝病毒或丙肝病毒，其中2.57億人患有乙肝，7 100萬人患有丙肝，僅在2015年全球就有134萬人因病毒性肝炎而死亡，絕大多數(shù)人無法獲得有效的檢測和治療。我國是乙肝多發(fā)國，目前我國HBV感染者約有1億人，其中約3 000萬人為慢性乙型肝炎患者[1]。因此，HBV感染對我國精準(zhǔn)輸血仍是威脅因素。多年來，我國采供血機構(gòu)采用ELISA法篩查HB－sAg，已經(jīng)大大降低了經(jīng)血液傳播HBV的風(fēng)險，但也可能是病毒變異、感染窗口期、隱匿性感染等免疫狀態(tài)的存在，導(dǎo)致部分獻血者體內(nèi)低載量HBV病毒復(fù)制而漏檢的情況[2]，而增加HBV DNA檢測可以有效降低HBV感染的殘余風(fēng)險。

（1）數(shù)據(jù)分析表明，HBV DNA核酸陽性檢出率仍然存在一定的差異，HBV DNA陽性檢出率呈現(xiàn)出地域性差異，本中心3年檢出58份HBV DNA陽性標(biāo)本，檢出率為3.4?，低于福建（0.62%）[3]、資陽（0.061%）[4]、嘉興地區(qū)（0.089%）[5]、佛山市順德區(qū)（0.12%）[6]、蘇州地區(qū)（0.058%）[7]、大連地區(qū)（0.14%）[8]、江蘇地區(qū)（0.6%）[9]、廣州地區(qū)（0.97%）[10]、烏魯木齊地區(qū)（0.22%）[11]、南寧地區(qū)（0.12%）[12]、上海地區(qū)（0.069%）[13]，高于安徽（0.017%）[14]、青島（0.007 1%）[15]。同時，國外也有獻血者HBV感染報道，如美國檢出率為（1/410 540）[16]。表5數(shù)據(jù)表明，甘肅省地貌呈狹長狀，人口分布不均勻，甘肅東部和中部人口密集，甘肅西部人口稀少，HBV DNA反應(yīng)性人群集中在人口相對密集的中部。

（2）文獻報道，美國HBV感染情況與性別和種族有關(guān)，其中女性感染率為1/14 911，男性感染率為1/9 050，白種人感染率為1/41 648，黃種人感染率 1/60，黑種人感染率為1/2 288[17]。本中心3年HBV DNA陽性檢測結(jié)果中女性為0.01%，男性為0.05%，遠遠高于美國。而各少數(shù)民族之間比較，無顯著性差異（P＞0.05）。

（3）按照獻血形式分為自愿獻血、團體獻血、互助獻血、應(yīng)急獻血4種，表1數(shù)據(jù)顯示，3年HBV DNA平均陽性檢出率：應(yīng)急獻血＞自愿獻血＞互助獻血＞團體獻血。根據(jù)各年數(shù)據(jù)具體分析發(fā)現(xiàn)，團體獻血HBV DNA檢出率較低，可能與團體獻血人群在獻血前已經(jīng)在團體內(nèi)部進行過身體素質(zhì)篩選有關(guān)，同時獻血者會考慮獻血結(jié)果對自己在團體中的影響。表1數(shù)據(jù)表明，互助獻血HBV DNA陽性檢出率較高，2016年達到了7.2?，超過3年平均檢出率一倍以上。而應(yīng)急獻血者HBV DNA檢出率為 4.9?，與團體獻血相比，差異顯著（χ2=9.632，P＜0.05）。

（4）另外，Gao等通過Meta分析發(fā)現(xiàn)，中國大陸人群的HBVDNA檢出率為0.11%，開展核酸檢測可以降低經(jīng)血液傳播HBV的風(fēng)險，提高輸血安全性，便于追蹤HBV DNA反應(yīng)性獻血者，觀察有無轉(zhuǎn)陽的情況[18]。

NAT檢測的靈敏度為1/1 000～1/50 000，這種差異來源于樣本的復(fù)雜性、試劑的靈敏度和地區(qū)之間的流行病學(xué)[19]。實時熒光PCR能有效降低輸血殘余風(fēng)險，但針對檢出限附近低病毒載量標(biāo)本有部分漏檢情況，血站在條件具備時可使用更高靈敏度的新試劑[20]。結(jié)合某一地區(qū)流行病學(xué)情況，選取靈敏度高、特異性強的核酸試劑作為血液篩查的首選試劑，核酸檢測為篩查HBsAg陰性的血液降低殘余風(fēng)險，提高血液的安全性。

綜上所述，HBV DNA陽性檢出率影響因素較多，其中性別之間的差異明顯，男性明顯高于女性（P＜0.05）；而漢族作為獻血主要群體，HBV DNA陽性檢出率最高，其他民族之間比較，無顯著性差異（P＞0.05）。人口密集區(qū)域HBV DNA陽性檢出率較高。同時，不同獻血方式對HBV DNA陽性檢出率有影響，其中互助獻血HBV DNA檢出率較高，因此逐步降低互助獻血率直至取消，有利于降低經(jīng)血傳播疾病的風(fēng)險。有數(shù)據(jù)表明，因突發(fā)事件導(dǎo)致血液庫存下降而啟動應(yīng)急獻血，該人群HBV DNA檢出率保持較高比例。因此應(yīng)擴大自愿獻血和團體獻血人群，減少應(yīng)急獻血，取消互助獻血，加大自愿獻血篩查力度，更好地保證血液的質(zhì)量。同時，因本中心檢測數(shù)據(jù)量有限，HBV DNA檢出率的影響因素還需繼續(xù)深入研究。