漳州市部分種豬場偽狂犬病gE抗體血清學(xué)調(diào)查

王藝娟

（福建省漳州市動物疫病預(yù)防控制中心，福建 漳州 363000）

豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的豬急性高度接觸性傳染病。豬是偽狂犬病病毒的貯存宿主，病豬、帶毒豬以及帶毒鼠類為本病重要傳染源。該病呈暴發(fā)性流行，可引起妊娠母豬流產(chǎn)、死胎；公豬不育，表現(xiàn)出睪丸腫脹、萎縮，喪失種用能力；肥育豬呼吸困難、生長緩慢；新生仔豬出現(xiàn)拉稀、神經(jīng)癥狀和大量死亡等，這是危害全球養(yǎng)豬業(yè)的重大傳染病之一[1]。偽狂犬病病毒主要經(jīng)口鼻接觸、空氣飛沫、精液等途徑傳播，豬既是感染宿主，又是病毒的長期貯存和排出者[2]。近幾年筆者發(fā)現(xiàn)豬場多發(fā)偽狂犬病，出現(xiàn)死胎或仔豬突然體溫升高，不食，間或有嘔吐或腹瀉，精神高度沉郁；部分病豬張口伸舌，運動失調(diào)，兩前肢張開或倒地抽搐；母豬配不上種，返情率高，甚至有反復(fù)配種數(shù)次都屢配不上的情況。目前最常用的檢測方法是運用ELISA檢測gE抗體區(qū)分野毒和疫苗毒，這給豬場偽狂犬病的控制與凈化帶來便利條件[3]。另外PCR方法也是一種敏感快速的實驗室檢測方法。本次血清學(xué)調(diào)查主要是通過對2017年漳州市部分種豬場采用偽狂犬病gE-ELISA抗體檢測，了解我市部分種豬場偽狂犬病帶毒情況，調(diào)查結(jié)果表明，我市部分種豬場仍存在偽狂犬病病毒感染。偽狂犬病gE抗體血清學(xué)調(diào)查，是為今后制定科學(xué)的偽狂犬病免疫程序和凈化方案作參考。1 材料與方法

1.1 被檢血清

2017年開始對漳州市11個縣（市、區(qū)）種豬場進(jìn)行摸底調(diào)查，分階段采血檢測，首先隨機(jī)采血26個種豬場種豬，每場抽樣數(shù)為30～70份不等，共抽檢806份。

1.2 檢測試劑盒

豬偽狂犬病gE抗體ELISA檢測試劑盒購自IDEXX公司。

1.3 檢測方法

試驗操作及結(jié)果判定，參照試劑盒說明書操作進(jìn)行。具體方法如下：用樣品稀釋液將被檢樣品稀釋2倍，按要求加入陰陽性對照后，在其余的孔內(nèi)分別加入100 μL已稀釋好的被檢樣品→室溫下孵育1 h或2～7℃孵育過夜→用300 μL洗滌液洗滌板孔，重復(fù)3～5次→每孔加入100 μL辣根過氧化物酶標(biāo)記抗PRV gpI抗體→室溫下孵育20 min。用300 μL洗滌液洗滌板孔，重復(fù)3～5次→每孔加入100 μL TMB底物液→室溫下孵育15 min→每孔加入50 μL終止液→酶標(biāo)儀讀數(shù)OD650nm→結(jié)果判定S/N值≤0.60，樣品應(yīng)判定為PRV gE抗體陽性。

2 結(jié)果

根據(jù)gE-ELISA檢測結(jié)果顯示，被檢豬血清806份，gE陽性抗體127份，陽性率為15.76%，陽性樣品主要集中在4家種豬場，其余22家種豬場未檢出陽性抗體。

表1 種豬場的豬偽狂犬病檢測結(jié)果

3 分析與討論

（1）通過本次部分種豬場偽狂犬病gE抗體抽樣檢測情況調(diào)查，偽狂犬病野毒感染平均陽性率為15.76%，陽性場主要集中在龍海市和云霄縣，特別是龍海市種豬場感染率較高，說明我市部分種豬場仍存在豬場偽狂犬病病毒感染的情況，不同種豬場存在不同感染率，這可能與豬場的飼養(yǎng)環(huán)境、管理水平、免疫情況、豬群個體差異等因素相關(guān)，對于高感染率的豬場，及時分析原因，制定科學(xué)的免疫程序和定期監(jiān)測，不斷清除野毒感染豬，逐步凈化豬群。這給我市疫病凈化項目開展和推進(jìn)提供了參考。

（2）本次調(diào)查種豬場豬偽狂犬病病毒的平均感染率為15.76%，比陳如敬等報道2009年福建部分地區(qū)規(guī)模化豬場的野毒抗體陽性率23.56%低[4]，比程晶等調(diào)查2006—2008年規(guī)模化豬場陽性率分別為39.64%、19.12%、17.93%低[5]。但比國內(nèi)其他省份報道[6-9]，江西部分種豬場陽性率為13.1%、山西省部分種豬場陽性率為9.12%、廣西部分種豬場檢測的陽性率為2.7%等均高，這表明我市豬偽狂犬病部分豬場的感染情況仍不容樂觀。要引起高度重視，消除隱患，減少豬場因感染偽狂犬病引起母豬流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎以及仔豬大量發(fā)病死亡造成經(jīng)濟(jì)損失。因此對陽性豬場應(yīng)全面的定期監(jiān)測并及時清除野毒感染豬，使豬群逐步得到凈化。

（3）本次調(diào)查種豬場豬偽狂犬病病毒的感染情況反映的是部分種豬場部分種豬的感染，具體豬場的免疫程序和凈化方案應(yīng)視豬場全場的感染情況而定。龍海市和云霄縣偽狂犬病感染率較高，這可能與該地區(qū)生豬飼養(yǎng)密度大，豬場防控措施和免疫水平較薄弱有關(guān)。有部分種豬場抽檢的結(jié)果陽性數(shù)為零，這與豬場生產(chǎn)水平提高，免疫程序優(yōu)化和平時淘汰健康狀況差的母豬有關(guān)；但也可能與采血數(shù)量相關(guān)，種豬的采血數(shù)為30～70份不等，沒有種豬采血全覆蓋。有研究和實踐表明，種豬群的更新淘汰和gE缺失苗的使用能有效降低豬群中g(shù)E抗體的陽性率[3]。因此可采取制定相應(yīng)的免疫和一系列生物安全措施控制和凈化豬偽狂犬病，達(dá)到疫病凈化的有效目的。