利用熒光定量技術檢測生鮮乳中黃曲霉毒素M1

鄭君杰，方芳，孫志偉，賈濤，李征，何月新

（北京市飼料監察所，北京 100107）

黃曲霉毒素（aflatoxin，AF）是多種霉菌（如黃曲霉和寄生曲霉）產生的有毒代謝物，是人類癌癥的一個重要致癌原。至今已分離出的黃曲霉毒素及其衍生物有20多種，自然界中主要包含四種亞型（黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2）。動物進食發霉飼料后，黃曲霉毒素一部分蓄積在動物體內，另一部分則會轉化到乳汁和尿液中，轉化率一般為3.45%～11.39%，排出AFM1的量為AFB1攝入量的1%～3%[1]。黃曲霉毒素B1可通過羥基化轉化為黃曲霉毒素M1，因此牛奶中就會含有黃曲霉毒素M1，目前各毒素亞型已知毒性大小順序為AFB1＞AFM1＞AFG1＞AFB2＞AFG2[2]。黃曲霉毒素M1相對穩定，常規處理方法如巴氏殺菌不會對其產生影響，因此如果生鮮乳中存在黃曲霉毒素M1，其終端產品中也將存在，所以很多國家對乳及乳制品中黃曲霉毒素M1含量進行了限制。

本試驗使用熒光定量檢測卡及高通量實時熒光定量檢測儀測定生鮮乳中黃曲霉毒素M1含量，檢測原理是以熒光素作為發光物質來標記抗體，檢測樣本中相應的目標物。熒光定量檢測技術檢測速度快、操作簡單、成本低廉，已經在臨床診斷、環境監測等領域得到廣泛應用[3]。通過計算機輔助半抗原合理設計，采用雜交瘤、熒光標記等技術，獲得了熒光定量快速檢測卡，檢測卡中的硝酸纖維素膜（NC）含有固定于測試區（T）的包被抗原、控制區（C）的多克隆抗體和固定于結合釋放墊上的熒光素標記抗體。當將待測樣品滴加在加樣區時，樣品中的目標物在毛細滲移過程中與熒光素標記的特異性單克隆抗體結合，抑制了抗體和T區包被抗原的結合，使T區熒光減弱；……