安爾碘皮膚消毒劑在手術(shù)室開(kāi)啟后使用期限的研究

劉青焱，先 會(huì)，楊曉瑩

（西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院手術(shù)室，四川瀘州 646000）

安爾碘皮膚消毒劑是一種含3 000 mg/L有效碘及乙醇的中效皮膚消毒劑，臨床使用具有皮膚刺激小、作用迅速、著色淺、無(wú)需脫碘、操作方便等特點(diǎn)，因此，被廣泛應(yīng)用于各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)中。但由于各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)規(guī)模不同，臨床科室使用環(huán)境、使用頻次不同，安爾碘皮膚消毒劑（60 mL 最小包裝單元）開(kāi)啟后消毒液的有效期限，使用中污染問(wèn)題一直困擾著使用者。目前研究主要集中在病房環(huán)境下安爾碘皮膚消毒液安全使用的期限研究，一般為3～7 d[1]，主要與使用頻次和污染有關(guān)，使用頻次＞19次/d，合格率僅為35.7%，而使用頻次＜11 次/d 的合格率為91.67%[2]。但在手術(shù)室恒溫、恒濕，空氣潔凈度控制下安爾碘使用頻次與使用期限的研究還沒(méi)有開(kāi)展。因此，本院于2017年3～5月以安爾碘皮膚消毒劑最小包裝瓶（60 mL）為研究對(duì)象，研究其在手術(shù)室開(kāi)啟后不同使用頻次下消毒液的安全有效性，以探討其在手術(shù)室的使用期限，為手術(shù)室制定皮膚消毒劑開(kāi)啟后合理的有效期限提供循證依據(jù)。

1 材 料

試驗(yàn)材料與菌株：由上海利康消毒高科技有限公司生產(chǎn)瓶裝安爾碘皮膚消毒劑，含碘濃度0.2%，規(guī)格為60 mL，生產(chǎn)批號(hào)：20170224。血培養(yǎng)基，TSA，TSB 培養(yǎng)基為環(huán)凱生物產(chǎn)品。中和劑組成為5 g/L的硫代硫酸鈉、10 g/L的吐溫-80、5 g/L 的卵磷脂的磷酸鹽緩沖液(PBS)（AXYGEN），試驗(yàn)菌為大腸桿菌ATCC25922，由西南醫(yī)科大學(xué)病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室保存提供。

2 方 法

2.1 試驗(yàn)用無(wú)菌棉簽抽樣檢測(cè)

手術(shù)室為萬(wàn)級(jí)手術(shù)間，保持環(huán)境溫度21℃～25℃，濕度40%～70%，手術(shù)間啟用前1 h 開(kāi)啟層流，進(jìn)行地表和物表的清潔消毒，空氣微生物監(jiān)測(cè)為150 cfu/m3；物表監(jiān)測(cè)為＜5 cfu/m3的環(huán)境下，采用無(wú)菌剪刀剪開(kāi)、撕開(kāi)、頂開(kāi)的方法取用無(wú)菌棉簽，取用后豎放于操作臺(tái)，4 h內(nèi)采樣，細(xì)菌培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)果顯示3組棉簽在不同開(kāi)啟方法后的4 h內(nèi)取用棉簽均無(wú)污染。

2.2 安爾碘皮膚消毒液開(kāi)啟后使用期限試驗(yàn)

2.2.1 試驗(yàn)環(huán)境

選擇萬(wàn)級(jí)手術(shù)間，室溫21℃～25℃，濕度40%～70%，手術(shù)間啟用前1 h 開(kāi)啟層流，進(jìn)行地表和物表的清潔消毒，空氣微生物監(jiān)測(cè)為150 cfu/m3；物表監(jiān)測(cè)為＜5 cfu/m3的環(huán)境下進(jìn)行,試驗(yàn)期間拒絕參觀,減少非手術(shù)人員走動(dòng)。

2.2.2 分組與干預(yù)方法

將32 瓶安爾碘瓶裝皮膚消毒劑隨機(jī)分為A、B、C三組，每組10瓶，空白對(duì)照組2瓶。A組：手術(shù)室環(huán)境下24 h 內(nèi)使用頻次為11 次；B 組：手術(shù)室環(huán)境下24 h內(nèi)使用頻次為19次，C組：手術(shù)室環(huán)境下24 h使用頻次為27 次。三組安爾碘消毒液使用方法是每次棉簽蘸取后直接廢棄。

2.2.3 采樣方法

本試驗(yàn)按照WS/T367-2012《醫(yī)療機(jī)構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范》使用中消毒液和物表染菌采樣方法。A、B、C 組和空白對(duì)照組安爾碘皮膚消毒劑開(kāi)啟后第3 d對(duì)消毒液、消毒液容器瓶口、瓶蓋內(nèi)面進(jìn)行采樣，每間隔1 d再次采樣，直到消毒液使用完畢。A組采樣到15 d，樣本量為210例；B組采樣到13 d，樣本量為180 例；C 組采樣到11 d，樣本量為150 例，空白對(duì)照組為42例，共計(jì)582例。

2.2.4 檢測(cè)指標(biāo)

2.2.4.1 細(xì)菌定量與定性檢測(cè)

按照WS/T367-2012《醫(yī)療機(jī)構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范》要求進(jìn)行。使用中安爾碘消毒液染菌量檢測(cè)：用無(wú)菌吸管按無(wú)菌操作方法取1.0 mL 被檢消毒液，加入9 mL中和劑混均，用無(wú)菌吸管吸取一定稀釋比例的中和后混合液1.0 mL接種瓊脂培養(yǎng)基平皿，37 ℃溫箱培養(yǎng)72 h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。安爾碘消毒液容器瓶口和瓶蓋內(nèi)表面染菌量檢測(cè)：用浸有無(wú)菌生理鹽水的棉簽在被檢部位涂抹采樣，去除手接觸部分棉簽進(jìn)行洗脫，取洗脫液1.0 mL接種瓊脂培養(yǎng)基平皿，37℃溫箱培養(yǎng)48 h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。

細(xì)菌計(jì)數(shù)按照消毒液染菌量（CFU/cm2）=平均每皿菌落數(shù)×10×稀釋倍數(shù)。

使用中消毒液和消毒液容器瓶口與瓶蓋內(nèi)表面衛(wèi)生學(xué)合格判定標(biāo)準(zhǔn)參照WS/T367-2012《醫(yī)療機(jī)構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范》要求進(jìn)行，即使用中皮膚黏膜消毒液染菌量≤10 cfu/mL、不得檢測(cè)出致病菌為合格。

2.2.4.2 最低抑菌濃度（MIC）及最小殺菌濃度（MBC）測(cè)定

將大腸桿菌ATCC25922 接種TSA 瓊脂培養(yǎng)基過(guò)夜培養(yǎng)，挑取單菌落接種TSB 肉湯培養(yǎng)基至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，去菌液稀釋到0.5麥?zhǔn)蠞舛葌溆谩o(wú)菌取所稀釋的菌液100 μL接種于96孔板，取消毒劑100 μL加于96孔板第1列，混勻后取100 μL與第2列，依次至第12列后，吸取100 μL棄掉，使得96孔板每列的濃度分別為2-1，2-2至2-12。并設(shè)定PBS組為對(duì)照組，培養(yǎng)20 h觀察結(jié)果，以肉眼觀察，藥物最低濃度管無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)者，即為受試菌液的MIC值。取96孔板中菌液100 μL均勻涂布于TSA瓊脂平板，如果上一濃度有菌生長(zhǎng)，而本濃度若無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，確定為MBC值。

3 結(jié)果

3.1 使用中安爾碘消毒液、消毒瓶口及瓶蓋內(nèi)表面染菌檢測(cè)結(jié)果

對(duì)使用中的不同期限及不同使用頻率的安爾碘皮膚消毒液、瓶口、瓶蓋內(nèi)面污染狀況進(jìn)行細(xì)菌檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果：A 組15 d 消毒液使用完畢，B 組13 d消毒液使用完畢，C 組11 d 消毒液使用完畢，3 組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)消毒液、消毒容器瓶口和瓶蓋內(nèi)表面染菌檢測(cè)結(jié)果均為陰性。空白對(duì)照組15 d內(nèi)細(xì)菌采樣檢測(cè)結(jié)果為陰性。

3.2 MIC和MBC

安爾碘皮膚消毒劑對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸桿菌ATCC25922 的抑菌殺菌效果，隨著使用期限的延長(zhǎng)和使用頻次的增加，A 組MIC 值由1×2-12 到第15 d 1.6×2-12，MBC 值由1.4×2-6 到第15 d 2×2-6，B 組MIC值由1×2-12到第13 d 2×2-12，MBC值由2-6到第13 d 2.4×2-6，C 組MIC 值由1×2-12 到第11 d 2×2-12，MBC值由1.4×2-6到第11 d 2.4×2-6。見(jiàn)表1、圖1和圖2。

表1 A，B，C 3組取樣MIC與MBC值

圖1 開(kāi)啟3-15 d A，B，C 3組消毒液對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸桿菌的MIC變化趨勢(shì)圖

圖2 開(kāi)啟3-15 d A，B，C 3 組消毒液對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸桿菌的MBC變化趨勢(shì)圖

4 討論

有效的皮膚消毒劑的選擇和管理對(duì)確保消毒劑的安全使用和醫(yī)院感染預(yù)防與控制具有十分重要的意義。隨著消毒滅菌技術(shù)的發(fā)展，消毒產(chǎn)品也在不斷更新，各種消毒劑廣泛應(yīng)用于臨床，由于不同級(jí)別醫(yī)院病區(qū)、手術(shù)室規(guī)模和業(yè)務(wù)量不一，皮膚消毒劑品牌、規(guī)格的使用選擇不一，但臨床使用管理共同存在的困惑是皮膚消毒劑開(kāi)啟后使用效期管理沒(méi)有參照?qǐng)?zhí)行的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，因此臨床工作中對(duì)開(kāi)啟后的消毒液使用期限難以把控[3]。存在消毒劑安全使用問(wèn)題與浪費(fèi)現(xiàn)象，還可導(dǎo)致耐藥菌株在醫(yī)院的定植[4-5]。研究報(bào)道指出隨著使用時(shí)間的延長(zhǎng)，消毒液會(huì)發(fā)生細(xì)菌污染，且污染率為2.52%，超標(biāo)率為1.83%[6]；臨床研究發(fā)現(xiàn)皮膚消毒液的安全有效性一般受到環(huán)境溫度、濕度、空氣潔凈度、暴露時(shí)間、人為因素（操作習(xí)慣、無(wú)菌棉簽的使用、反復(fù)取用）等多因素的影響[7]。

本試驗(yàn)在萬(wàn)級(jí)潔凈手術(shù)室環(huán)境下,正確使用無(wú)菌棉簽的情況下檢測(cè)結(jié)果表明，三組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)消毒液、消毒容器瓶口和瓶蓋內(nèi)表面染菌檢測(cè)結(jié)果均為陰性。說(shuō)明使用頻次為11 次的瓶裝消毒液開(kāi)啟后存放時(shí)間至15 d 未檢測(cè)出細(xì)菌污染、使用頻次為19 次的瓶裝消毒液開(kāi)啟后存放時(shí)間至13 d 未檢測(cè)出細(xì)菌污染，使用頻次為27次的瓶裝消毒液開(kāi)啟后存放時(shí)間至11天未檢測(cè)出細(xì)菌污染。

安爾碘皮膚消毒液開(kāi)啟后抑菌殺菌效果的穩(wěn)定性是影響消毒液安全使用的重要因素，也是臨床消毒液開(kāi)啟后明確使使用效期管理的參考依據(jù)之一[9]。本研究中安爾碘皮膚消毒劑對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸桿菌ATCC25922抑菌殺菌效果顯示：隨著使用時(shí)間延長(zhǎng)，三組MIC 與MBC 值逐漸增大，但是增大不明顯，說(shuō)明安爾碘皮膚消毒劑殺菌抑菌效果隨著使用時(shí)間的延長(zhǎng)變化不大；而劉青研究發(fā)現(xiàn)在內(nèi)科病區(qū)、門(mén)診輸液中心、普外科等科室在連續(xù)使用7 d 以上也能夠保持良好的殺菌能力[8],林輝研究顯示安爾碘皮膚消毒液相比其它復(fù)合碘,抑菌效果較理想[9]。因此，本研究結(jié)果提示安爾碘皮膚消毒劑在手術(shù)室恒溫恒濕恒潔凈度的情況下，控制暴露時(shí)間，控制棉簽的無(wú)菌使用，控制人員混雜因素的情況下，安爾碘皮膚消毒液使用頻次在11 次以下，存放到15 d，抑菌殺菌效果變化不明顯；使用頻次在19次以下，存放到13 d，抑菌殺菌效果變化不明顯；使用頻次在27 次以下，存放到11 d，抑菌殺菌效果變化不明顯。