泌尿生殖道支原體培養(yǎng)與藥敏結果分析

劉力娟 王厚芳 孫芾

[摘要]目的 了解泌尿生殖道感染患者泌尿生殖道解脲脲原體（Uu）和人型支原體（Mh）感染和藥敏分析情況，向臨床推薦治療泌尿生殖道支原體感染的經(jīng)驗性治療藥物。方法? 收集我院2011年1月～2017年12月共計1639例泌尿生殖道感染患者的送檢標本，采用Biomerieux Mycoplasma IST 2支原體培養(yǎng)、鑒定、計數(shù)及藥敏試驗試劑盒進行檢測。結果 所有患者泌尿生殖道支原體陽性率為39.5%（648/1639），其中Uu感染608例（37.0%），單純Mh感染11例（0.7%），Uu和Mh（Uu+Mh）混合感染29例（1.8%）。藥敏結果顯示，Uu對原始霉素的敏感率（99.2%）最高，其次為多西環(huán)素（98.8%）;耐藥性最強的是環(huán)丙沙星（耐藥率為77.8%）。Mh對多西環(huán)素、原始霉素、交沙霉素的敏感率最高，為100.0%;耐藥性最強的是紅霉素（耐藥率為90.9%）。Uu+Mh對多西環(huán)素和四環(huán)素的敏感率最高，為100.0%;耐藥性最強的是紅霉素和環(huán)丙沙星（耐藥率為82.8%）。結論 泌尿生殖道支原體感染以Uu為主，多西環(huán)素宜可以作為泌尿生殖道支原體感染的首選抗生素。

[關鍵詞]泌尿生殖道支原體;解脲脲原體;人型支原體;藥敏分析

[中圖分類號] R691.9? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-4721（2019）1（c）-0146-04

支原體是一類缺乏細胞壁、能通過細菌濾器，在人工培養(yǎng)基上能生長繁殖的最小的原核細胞微生物。其中解脲脲原體（Ureaplasma urealyticum，Uu）和人型支原體（Mycoplasma hominis，Mh）在人體泌尿生殖道中較常見，可能誘發(fā)非淋球菌性尿道炎、輸卵管炎、前列腺炎、腎盂腎炎等疾病。Uu是導致女性生殖道疾病的主要病原體之一，可引起非淋球菌性尿道炎、宮頸炎、盆腔炎，也可誘發(fā)早產(chǎn)、自然流產(chǎn)、死胎及不孕不育等[1-2]。有統(tǒng)計學數(shù)據(jù)表明，近年來支原體感染呈上升趨勢，抗菌藥物的不合理使用導致支原體耐藥率不斷上升，選擇敏感藥物成為臨床治療的關鍵。本研究對來我院就診的1639例泌尿生殖道感染患者的支原體培養(yǎng)、鑒定和藥敏結果進行回顧性分析，以期了解泌尿生殖道支原體感染情況及耐藥性，指導臨床合理使用抗生素。

1資料與方法

1.1一般資料

通過我院實驗室管理系統(tǒng)（Labtrak）回顧2011年1月～2017年12月在我院婦產(chǎn)科、泌尿外科、皮膚科就診的非重復泌尿生殖道感染患者共1639例， 分析泌尿生殖道支原體培養(yǎng)的結果。1639份病例標本包括尿道拭子446例、精液7例、宮頸口拭子1186例。其中男453例，女1186例，外籍患者樣本614例，中國國籍樣本1025例，年齡（34.2±8.2）歲。納入標準：患者均系初診，樣本采集前1周內(nèi)未全身及局部使用抗菌藥物。排除標準：復診患者，樣本采集前1周內(nèi)全身及局部使用抗菌藥物。該研究參與研究者已簽署知情同意書。本研究已經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2 標本采集

由于支原體對黏膜細胞有高親和力，因此有必要全面徹底地刮取黏膜，以采集細胞。女性患者常規(guī)進行外陰清潔，拭去宮頸表面黏液，使用無菌棉拭子插入宮頸1～2 cm深處旋轉(zhuǎn)1周，停留15 s，取出生殖道拭子后立即密封保存送檢。男性患者常規(guī)尿道口清潔，使用男性無菌棉拭子在尿道1～2 cm處，取尿道分泌物立即送檢。男性患者精液采用手淫法采集置于無菌瓶立即送檢。

1.3試劑

所有標本采用Biomerieux? Mycoplasma IST 2支原體培養(yǎng)、鑒定、計數(shù)及藥敏試驗試劑盒（比色法）進行檢測。藥敏試驗選用試劑盒提供的9種抗生素分別為四環(huán)素（Tetracycline）、紅霉素（Erythromycine）、環(huán)丙沙星（Ciprofloxacine）、氧氟沙星（Ofloxacine）、多西環(huán)素（Doxycycline）、交沙霉素（Josamycine）、原始霉素（Pristinamycine）、阿奇霉素（Azithromycine）、克拉霉素（Clarythromycine）。每種抗菌藥物設高、低兩個藥物濃度。

1.4 方法

從冰箱取出試劑放置至室溫，嚴格按照試劑盒說明書執(zhí)行操作，接種后放入（36±2） ℃培養(yǎng)箱孵育，于24、48 h觀察并記錄結果。

1.5觀察指標及評價標準

指示空培養(yǎng)基顏色由黃色變?yōu)榧t色判斷為有解Uu或Mh生長。藥敏結果判斷：當指示孔判定有Uu或Mh生長時，高、低兩個藥物濃度孔均未變紅，判斷為敏感（S）;當?shù)蜐舛瓤鬃兗t，高濃度孔不變紅，判斷為中介（I）;當高低兩個藥物濃度孔均變紅，判斷為耐藥（R）。

1.6統(tǒng)計學方法

用描述性統(tǒng)計方法進行統(tǒng)計分析。采用Excel軟件計算相應百分率。

2結果

2.1支原體陽性檢出率及性別構成

從1639例泌尿生殖道感染患者送檢樣本中檢出支原體648例，陽性率為39.5%。Uu陽性率為37.0%，Mh陽性率為0.7%，Uu和Mh（Uu+Mh）混合感染陽性率為1.8%。453例男性樣本中有82例陽性，陽性率為18.1%，且均為Uu。1186例女性樣本中566例陽性，陽性率為47.7%，其中Uu陽性率為44.4%，Mh陽性率為0.9%，Uu+Mh混合感染陽性率為2.4%（表1）。

2.2支原體在不同國籍間的分布情況

1639例樣本中有外籍患者樣本614例，中國籍樣本1025例。外籍患者支原體陽性率為27.0%，其中Uu陽性率為25.7%、Mh陽性率為0.3%、Uu+Mh混合感染陽性率為1.0%。中國籍患者支原體陽性率為47.0%，其中Uu陽性率為43.9%，Mh陽性率為0.9%，Uu+Mh混合感染陽性率為2.2%（表2）。

2.3抗菌藥物的敏感性

藥敏結果顯示，Uu對原始霉素、多西環(huán)素、交沙霉素的敏感性較高，敏感率>90%，而對環(huán)丙沙星、氧氟沙星敏感性較差，敏感率<10%。Mh對原始霉素、多西環(huán)素、交沙霉素、四環(huán)素的敏感性較高，敏感率為100%，而對克拉霉素、阿奇霉素、紅霉素的敏感性較差，敏感率<10%。Uu+Mh對多西環(huán)素、四環(huán)素、原始霉素敏感性較高，敏感率>90%，而對紅霉素、氧氟沙星、環(huán)丙沙星敏感性較差，敏感率<10%（表3）。

3討論

支原體是1898年由Nocard等發(fā)現(xiàn)的一種類似細菌但不具有細胞壁的原核微生物，能在無生命的人工培養(yǎng)基上生長繁殖，直徑50～300 nm，能通過細菌濾器。生殖道支原體的首次報道是在1981年，從兩例診斷為非淋球菌性尿道炎的男性患者尿道樣本中分離出[3]。泌尿生殖道支原體是引起男性非淋球菌尿道炎的常見病原菌[4]，也可引起女性宮頸炎和盆腔炎等，Uu的特殊頂端結構能牢固地黏附于靶細胞表面，女性特殊的生理結構和生理周期使其容易被感染[5]。與泌尿生殖道感染有關的主要是Uu和Mh兩種。De Francesco等[6]報道的9956例泌尿生殖道培養(yǎng)結果，有1856例支原體陽性，陽性率為18.6%;王莉等[7]報道1438例泌尿生殖道培養(yǎng)結果，有713例支原體陽性，陽性率為49.6%。

我院1639例樣本中檢出支原體648例，陽性率為39.5%，主要病原體為Uu，其次為Uu+Mh混合感染，Mh感染陽性率最低，這與國內(nèi)外大部分資料的研究結果一致[8]。男性樣本陽性率為18.1%，病原體均為Uu。女性樣本陽性率高于男性，陽性率為47.7%，主要病原體為Uu，可見女性Uu感染率高于男性，與國內(nèi)報道[9-11]一致。614例外籍患者支原體陽性樣本中Uu感染158例，陽性率25.7%。1025例中國籍患者支原體陽性樣本中Uu感染450例，陽性率為43.9%，可見不同國籍的泌尿生殖道支原體均以Uu為主。本研究中，中國籍患者樣本中泌尿道支原體陽性率為47.0%，而外籍患者樣本中泌尿道支原體陽性率為27%，造成不同國籍患者感染泌尿生殖道支原體陽性率的差異原因目前不清。

支原體屬不具有細胞壁，因此針對細胞壁合成的抗生素對其無效，如青霉素和其他β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物。Uu及Mh通常對四環(huán)素類（如多西環(huán)素）藥物敏感[12]。我院608株Uu的藥敏結果顯示，原始霉素、多西環(huán)素的敏感性較高，敏感率>90%，與文獻報道[13-14]一致。而氧氟沙星、環(huán)丙沙星敏感性較低，敏感率<10%，藥敏結果提示多西環(huán)素可作為泌尿道支原體感染首選藥。Uu感染的成人建議臨床選用多西環(huán)素[15]。11株Mh的藥敏結果顯示，多西環(huán)素、交沙霉素、原始霉素的敏感性比較高均為100%，與文獻報道[16]一致，而阿奇霉素、克拉霉素、紅霉素、氧氟沙星、環(huán)丙沙星敏感率較低，敏感率均<20%。29株Uu+Mh對多西環(huán)素、四環(huán)素、原始霉素敏感性較高，敏感率>90%，而對克拉霉素、阿奇霉素、紅霉素、氧氟沙星、環(huán)丙沙星敏感性較差，敏感率<20%，因此對于Mh及Mh+Uu混合感染，抗生素治療更易出現(xiàn)耐藥情況，與文獻報道[17]一致。Mh通常對大環(huán)內(nèi)酯類藥物（紅霉素、阿奇霉素、克拉霉素）耐藥[18]， Mh耐藥菌株的分子基礎還不是很清楚，有研究表明耐藥性與特定的核糖體突變有關[19]。由于臨床盲目用藥，出現(xiàn)了支原體的多重耐藥現(xiàn)象。張冉等[20]的研究發(fā)現(xiàn)，氧氟沙星可誘導Mh多重耐藥性的產(chǎn)生，gyrA、parE基因中的點突變可能導致耐藥。

本研究發(fā)現(xiàn)泌尿生殖道支原體感染以Uu為主，女性Uu感染率高于男性。外籍患者泌尿生殖道支原體感染也是以Uu為主。通過藥物敏感試驗發(fā)現(xiàn)Uu、Mh、Mh+Uu均多西環(huán)素敏感。鑒于泌尿生殖道支原體感染難以獲得診斷，臨床醫(yī)生通常對患者經(jīng)驗用藥，用藥選擇基于病原菌的體外藥敏結果。因此及時進行藥敏試驗，選擇高效藥物，實施足劑量、足療程用藥，以降低耐藥株的產(chǎn)生。

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（收稿日期：2018-05-28? 本文編輯：張晨暉）