磁微粒化學發光法在乙型肝炎病毒感染血清學標志物檢測中的應用觀察

張昌森 嚴子泳

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒感染引發的傳染性疾病［1］。乙型肝炎病毒是廣泛存在于肝臟各個部位的嗜肝病毒,會損傷肝臟,引發肝細胞炎癥和壞死,嚴重者還會出現癌癥,威脅患者的生命健康［2］。采取快速、準確的方法檢測乙型肝炎病毒感染有利于限制病毒的傳播和臨床治療。乙型肝炎病毒感染患者血清學標志物檢測是診斷乙型肝炎常用的指標［3］。因此,本研究探討磁微粒化學發光法在乙型肝炎病毒感染血清學標志物檢測中的應用價值,現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月～2019年12月于本院收治的200例乙型肝炎病毒感染患者作為研究對象,其中男114例,女86例；年齡21～68 歲,平均年齡(45.63±9.29)歲。納入標準：①符合乙型肝炎病毒感染診斷標準［4］；②認知、語言及精神功能正常；③患者知情并簽署同意書；④臨床資料完整。排除標準：①合并惡性腫瘤、造血功能障礙者；②合并腎、腦、心、肝等器官嚴重損傷者；③妊娠或哺乳期婦女。

1.2 方法 所有患者均使用磁微粒化學發光法和酶聯免疫吸附法檢測血清學標志物。于清晨空腹抽取患者靜脈血4 ml,離心后取上清液于冰箱冷藏,冷藏溫度-20℃。酶聯免疫吸附法檢測：使用酶標分析儀(深圳雷杜生命科學股份有限公司,型號RT-600),嚴格按照試劑和儀器進行操作,對乙型肝炎病毒感染血清學標志物進行檢測,檢測內容包括HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb。磁微粒化學發光法：使用全自動化學發光測定儀(鄭州安圖生物工程股份有限公司,型號AutoLumo A2000 plus)檢測HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb。

1.3 觀察指標及判定標準

1.3.1 比較兩種檢測方法血清學標志物陽性率。酶聯免疫吸附法陽性判定標準：以OD 值/臨界OD 值作為參考,OD 值/臨界OD 值≥1.00,HBsAb、HBsAg、HBeAg為陽性；OD 值/臨界OD 值＜1.00,HBeAb、HBcAb 為陽性。磁磁微粒化學發光法陽性判定標準：HBsAb≥10 IU/ ml 為陽性；HBsAg≥0.05 IU/ ml 為陽性；相對光單位(RLU)/臨界RLU≥0.01 時HBeAg、HBcAb 為陽性；RLU/臨界RLU＜1.00 時HBeAb 為陽性。

1.3.2 比較兩種檢測方法的診斷準確率。

1.4 統計學方法 采用SPSS22.0 統計學軟件進行數據統計分析。計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種檢測方法血清學標志物陽性率比較 磁微粒化學發光法檢測HBsAb、HBcAb 陽性率分別為50.50%、38.00%,均高于酶聯免疫吸附法的36.50%、26.00%,差異有統計學意義(P＜0.05)；兩種檢測方法的HBsAg、HBeAg、HBeAb 陽性率比較,差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 兩種檢測方法血清學標志物陽性率比較［n(%),n=200］

2.2 兩種檢測方法診斷準確率比較 磁微粒化學發光法診斷準確率96.50%高于酶聯免疫吸附法的84.00%,差異有統計學意義(P＜0.05)。見表2。

表2 兩種檢測方法診斷準確率比較［n(%),n=200］

3 討論

乙型肝炎病毒具有耐紫外線、耐低溫、耐熱等特點,乙型肝炎病毒感染是具有高發病率的傳染性疾病［5］。乙型肝炎病毒感染患者救治不及時,病毒會在肝細胞進行復制及繁殖,損傷肝臟,導致肝硬化、乙型肝炎［6］。任何年齡段群體都可能出現乙型肝炎病毒感染,現階段診斷及治療乙型肝炎病毒感染仍是臨床研究的熱點問題。臨床常使用血清標志物反映患者的免疫功能損傷程度,HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb 等血清標志物能體現患者體內乙型肝炎病毒水平,是臨床檢測乙型肝炎病毒感染的參考指標［7］。血清標志物能夠幫助診斷乙型肝炎病毒感染,有利于給予針對性治療,改善患者生存情況。

酶聯免疫吸附法是臨床檢測乙型肝炎病毒感染的常用方法,具有檢測花費低、操作簡單等優點［8］。酶聯免疫吸附法能連接酶與待檢測物引發特異性反應,進行檢測。但酶聯免疫吸附法在試劑的制作工藝、保存方法等因素影響下穩定性相對較差,發生誤診的可能性升高。磁微粒化學發光法是免疫發光檢測的一種方法,利用免疫測定技術和化學發光技術對抗原/抗體水平進行定量或半定量檢測具有重復性高、檢測范圍廣、操作簡單等優點［9］。

本研究結果顯示,磁微粒化學發光法檢測HBsAb、HBcAb 陽性率分別為50.50%、38.00%,均高于酶聯免疫吸附法的36.50%、26.00%,差異有統計學意義(P＜0.05)；由此提示磁微粒化學發光法對乙型肝炎病毒感染患者血清學標志物檢測的結果準確率較高。磁微粒化學發光法將堿性磷酸酶標記的抗體、待測抗原、異硫氰酸熒光素標記抗體形成復合物,利用抗熒光素抗體的磁性微粒將復合物和未結合的物質進行分離,對沉淀復合物進行清洗后加入酶促化學發光底物,在酶的作用下底物裂解成激發態中間體,在回到基態的過程中出現發光反應,利用發光儀對發光強度進行檢測。此外,酶聯免疫吸附法受孵育時間、溫度等因素的干擾,加上人工進樣,檢測過程可能出現非特異性反應,嚴重影響診斷的準確率［10］。磁微粒化學發光法的檢測試劑全為原裝配套,且采取自動進樣,能夠有效避免人為因素造成的誤差,提升了診斷的準確率,具有良好的重復性。

綜上所述,磁微粒化學發光法、酶聯免疫吸附法在乙型肝炎病毒感染血清學標志物檢測中具有良好的應用價值,但磁微粒化學發光法能夠提升檢測的準確率,為臨床診療提供依據。