王侃
紹興市人民醫院設備處 (浙江紹興 312000)
早期的免疫組化通過手工操作完成,由于整個制片過程復雜,耗時較長,技術人員在手工操作中對標本前處理的試劑孵育溫度和時間難以準確把握,導致染色效果和重復性都較差[1-2]。近期醫院引進1臺Bond-Max全自動免疫組化染色機,免疫組化的所有步驟(烤片、脫蠟、抗原修復、阻斷、標記一抗、二抗、顯色直到復染)都可以自動完成,真正實現全自動操作,不僅節省人力,也確保免疫組化染色質量恒定。現分享我們對全自動免疫組化染色機在使用和維護中的體會和認識。
免疫組化是利用抗體和抗原特異性結合的原理,通過化學反應使標記顯色劑的抗體來標定細胞內抗原的成分,并對抗原進行分析與研究。免疫組化技術是一項綜合定性、定量、定位分析,結合形態、功能、代謝為一體的檢測技術[3]。在原位檢測出病原的同時,還能觀察到組織病變與該病原的關系,確認受染細胞類型,從而有助于了解疾病的發病機制和病理過程,已廣泛應用于臨床檢驗與病理分析。
(1)Bond-Max全自動免疫組化染色機有3個樣品架,每個樣品架上最多可容納30張玻片,且每個樣品架可獨立執行不同程序,具有玻片的連續上載功能。技術員只需根據實際工作流程選擇整批上載或小批次連續上載,后者的優點可減少等待時間,提高實驗室效率。(2)Bond-Max所有操作均由電腦設定的程序控制儀器執行,計算機連接玻片標簽打印機,同時與醫院信息系統相聯,實現病例和患者之間信息的雙向傳輸和索引追蹤。(3)Bond-Max利用其專利技術,在標本的玻片表面增加一個塑料罩,防止試劑揮發,為抗體與抗原免孵育時的免疫反應提供一個獨立、封閉環境,這樣既確保樣品的安全,也節省試劑的成本。在滴加試劑時,加樣針將液滴鋪散到玻片的反應區域上,試劑用量由注射模塊精確控制,確保試劑完全均勻覆蓋組織,染色結果可靠。(4)Bond-Max的排廢采用真空抽吸法排放,所有漂洗液、緩沖液、染色液等廢液由真空泵的直接抽吸,避免試劑的相互污染,降低試劑的使用量,但大吸力排廢也存在損壞標本的風險。(5)Bond-Max針對一抗完全開放,用戶可以根據開展的項目使用任何品牌的一抗。二抗需使用封閉試劑,檢測系統包含Compact Polymer專利技術,相比傳統方法而言,信號放大作用強,組織穿透性強,敏感性高,定位準確,背景更清晰,提高診斷質量。一般的全自動免疫組化染色機均采用儀器的專用試劑,試劑成本與所做項目密切相關,醫院如需考核設備的消耗,應對各項成本做嚴格測算。
全自動免疫組化染色機雖然可部分替代煩瑣的人工操作,但日常的維護保養必不可少,只有按照操作規程做好保養才能確保設備始終有一個良好的運行狀態。
確保系統(液流系統)已灌注;檢查連接到抽吸探針的管路是否有堵塞或氣泡;檢查Covertile固定夾是否處在固定位置;檢查大容器和有害廢液容器是否有足夠的空間,必要時清空;檢查大試劑容器是否有足夠的試劑用于日常操作;必要時重新灌滿。
清洗抽吸探針;檢查管路是否堵塞或有氣泡;清潔標本架及染色裝置。
清洗防護帶和儀器蓋;清潔下層托盤;加滿緩沖液、乙醇和去離子水;清潔機械臂上的ID掃描儀;清潔玻片標簽儀;檢查注射器緊密度。
更換混合站,以每天60個玻片的使用率為標準,每月更換1次;清潔所有大容器,特別是廢液瓶。
更換抽吸探針和針管;更換注射器和針頭;檢查加熱模塊。
全自動免疫組化染色機可以有效避免人工操作的錯誤和誤差,染色片的標準化強、重復性好。同時,機器制作統一規格的玻片便于歸檔,安全環保,實驗結果更加客觀、更加科學,因此,全自動免疫組化染色機在病理檢測等領域的應用越來越廣泛。