觀賞海棠中McmiR160a的克隆及調控紅葉著色的功能分析

羅容麗，李雨欣，張 潔，張 杰，姚允聰

(農業應用新技術北京市重點實驗室/植物生產國家級實驗教學示范中心/北京農學院植物科學技術學院，北京 102206)

觀賞海棠常色紅葉品種‘王族’是常見的園林綠化樹種，色彩艷麗，樹型優美，廣受眾人喜愛。其葉片的紅色是由于花色素苷的積累導致，花色素苷是植物色澤形成過程中最重要的組分之一[1]，花色素苷屬酚類化合物中的類黃酮類，是一種水溶性色素，廣泛存在于植物花瓣、果實的組織中及莖葉的表面細胞與下表皮層。

miRNAs(microRNAs)長度約21～23 nt，是一類單鏈小分子RNA。這類小RNA分子由長度約64～303 nt的前體(pre-miRNA)加工而成，而pre-miRNA則由更長的pri-RNA加工生成。miRNA是一類非常重要的轉錄后調控因子，在很多生物過程中起重要的調控作用。隨著miRNA在不同生物中的大量發現，對其功能的研究已引起人們的極大興趣[2]。

已有文獻報道有些miRNA與植物體發育有關[3]，例如：pri-miR160響應SA下調，但由于赤霉酸，乙烯和茉莉酸甲酯正調控，從而影響龍眼的胚乳發育，表明pri-miR160與激素轉導有關[4]。在擬南芥中，miR167及靶基因ARF4和ARF8受藍光調控降低蓮座葉數和葉面積，減少干物質生成，影響植株的生長發育[5]。miR393影響外源2,4-D對初級根的生長，同時miR393的過表達抵消鋁誘導的根伸長抑制和減輕活性氧(ROS)誘導的細胞死亡[6]。近年來發現一些miRNA能夠參與花色素苷代謝。據報道，蘋果、番茄、葡萄、丹參中miR159，miR319和miR828家族也可以調控MYB轉錄因子[7]。擬南芥miR156和miR529通過5′RACE試驗驗證其與靶基因SPL9和SPL15的剪切方式，通過抑制靶基因SPL9和SPL15的表達，參與花色素苷代謝的調控[8]。……