丙氨酸氨基轉移酶試劑盒在不同檢測系統下的可比性

彭琳，顏敏，黃海萍，劉園園，羅潔

湖南省醫療器械檢驗檢測所 （湖南長沙 410014）

丙氨酸氨基轉移酶（alanine aminotransferase，ALT）是 一種參與人體蛋白質新陳代謝的酶，可加快蛋白質和氨基酸在體內的轉化，廣泛存在于人體各組織、器官、肌肉和骨骼中，以肝細胞細胞質中最多。當人體內各組織器官損傷或病變時，ALT被釋放到血液中，使血液中ALT水平增加。僅少量的肝細胞損傷，即可使ALT水平增高，因此，ALT被世界衛生組織（World Health Organization，WHO）推薦為肝功能損傷最敏感的檢測指標之一。

通過查詢國家食品藥品監督管理總局數據庫獲悉，ALT檢測試劑盒的有證生產企業有446家，但各企業生產規模、技術水平和產品質量參差不齊。經調研發現，部分生產企業將未取得醫療器械注冊證的質控品、校準品，以診斷試劑盒打包贈送的形式，贈送給醫院，用于醫院診斷試劑質控和診斷設備校準。為了了解市場上ALT試劑盒的質量情況，探討不同企業ALT試劑盒測得結果之間的可比性，為檢測結果的互認提供數據支持，并初步探討校準與溯源在臨床生化檢驗質量中的重要作用，我們在東芝TBA-120FR全自動生化分析儀上，利用國家及國際標準物質對不同檢測系統試劑盒測定結果的準確度進行驗證，并對不同檢測系統結果的溯源性和可比性進行分析，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器

采用東芝TBA-120FR全自動生化分析儀。

1.1.2 檢測系統組成

目標檢測系統采用北京、廣州、湖南、四川等省市的12家企業生產的ALT試劑盒及其配套校準品，將12家企業試劑盒分別用A～L表示，將各試劑盒提供的校準品相應用a～l表示，從而組成相應的檢測系統Aa～Ll。自建檢測系統[1]是將以上12家企業生產的ALT試劑盒分別采用國際標準物質[定值結果：103.8 IU/L（1 ml/支）；來源：ERM]校準組成相應檢測系統，國際標準物質校準時統一用j表示，組成相應的檢測系統 Aj～Lj。

1.1.3 國家標準物質

采用人血清基質ALT活性濃度標準物質[證書編號：GBW（E）090352；定值日期：2017年12月；定值結果：52.3 IU/L（1 ml/支）；生產單位：嘉興博泰生物科技發展有限公司]。

1.2 方法

1.2.1 目標檢測系統準確度評價

將12家企業的試劑盒均按其說明書設定分析參數，并用各自配套的校準品進行校準，分別檢測國家及國際標準物質，批內連續測定10次，計算批內變異系數（coefficient of variation，CV）及相對偏差（relative deviation，RD）。

1.2.2 自建檢測系統準確度評價

將12家企業的試劑盒均按其說明書設定分析參數，并用國際標準物質進行校準，分別檢測國家標準物質，批內連續測定10次，計算批內CV及RD。

1.3 統計學處理

準確度：取已知濃度的標準物質，按試劑盒說明書的規定進行測定，重復10次。計算樣本測定結果均值（X），用RD表示測定結果的準確度（見公式1）。重復性：取標準物質進行檢測，用同一試劑盒重復測定10次，計算測定值的CV，CV表示測定結果的重復性。見公式2。

（公式1，T為參考值，X為Xi的平均值）

（公式2，Xi為10次測定結果， X為Xi的平均值）

2 結果與分析

2.1 目標檢測系統測定結果

對12家企業的ALT試劑盒采用配套校準品進行校準后，分別測定國際標準物質及國家標準物質，結果顯示：12家企業試劑盒的CV介于0.35%～2.74%，其中國家標準物質的CV介于0.61%～2.74%，國際標準物質的CV介于0.35%～2.22%。RD介于1.30%～8.96%，其中國家標準物質的RD介于1.30%～8.35%，國際標準物質的RD介于1.32%～8.96%。見表1。

表1 目標檢測系統CV及RD統計結果（%）

2.2 自建檢測系統測定結果

對12家企業的ALT試劑盒采用國際校準品進行校準后，分別測定國家標準物質，結果顯示：12種試劑盒的CV介于0.49%～4.32%，RD介于8.93%～20.07%，見表2。

表2 自建檢測系統CV及RD統計結果（%）

2.3 統計結果分析

目標檢測系統檢測樣本的重復性（＜5%）及準確度（＜10%）均較小，用國際校準物質校準后自建檢測系統檢測樣本的重復性仍較小（＜5%），但準確度（8.93%～20.07%）明顯增高，其中約83%的試劑盒準確度偏差＞10%。

3 討論

檢測系統是指完成一個檢測項目涉及的儀器、試劑、校準品、操作程序等的組合[2-3]。標準化、系統化及溯源規范性對加強實驗室質量管理及提高臨床檢驗質量具有重要意義[4-5]。在目前國內檢測系統質量參差不齊的情況下，應對自建系統進行評估，以保障臨床檢驗結果的準確度及各實驗室結果的可比性。

本研究結果顯示，自建檢測系統準確度偏差較目標檢測系統明顯增高，原因可能是一方面試劑盒配套校準品與國際標準物質的基質不同而產生基質效應，另一方面兩者溯源鏈不統一而導致的產品差異。校準品、質控品和參考物質均為處理過的樣本，但由于其來源、生產工藝的不同，檢測中產生的基質效應也不同。為避免校準過程中引入系統偏倚，在進行任何一種項目檢測前均需進行比較，按要求配套使用儀器、試劑、校準品。目前我國各企業校準品溯源不統一，各試劑企業校準品可比性不強，還未能實現通用或互換使用，在血清ALT檢測時仍需要使用各自配套的校準品。

市場上存在未經注冊的校準品、質控品，不確定其量值是否能溯源，賦值是否準確，其測定結果準確度可能存在問題，給臨床使用帶來風險。因此建議監管部門嚴格要求校準品和質控品的注冊審批，并嚴格監管生產和經營。國家應加快參考物質的研制，以便企業在研制和生產產品過程中規范產品溯源，并引導不同企業產品溯源統一，為實現試劑盒結果互通互換奠定基礎。