食品中大腸埃希氏菌O26血清型檢測方法的建立

丁 琦，林偉新,蔡教英，林國生，王小玉，游淑珠，陳俊言，許喜林

(1.華南理工大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，廣州 510640;2.珠海出入境檢驗檢疫局,珠海 519000)

大腸埃希氏菌(DiarrheagenicEscherichiacoli)是一類能引起人體以腹瀉癥狀為主的細菌，可經(jīng)過污染食物引起人類發(fā)病。常見的致瀉大腸埃希氏菌主要包括腸道致病性大腸埃希氏菌(EPEC)、腸道侵襲性大腸埃希氏菌(EIEC)、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌(ETEC)、產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌(包括腸道出血性大腸埃希氏菌，STEC/EHEC)和腸道集聚性大腸埃希氏菌(EAEC)，雖然類別多樣，但都是能夠通過傳播導(dǎo)致人畜共患病的病原菌[1-2]。據(jù)統(tǒng)計，美國近年來除腸道出血性大腸埃希氏菌O157外引起的食源性疾病致病病例中，有71%是由O26、O45、O103、O111、O121和O145血清型所致[3]，其中O26的報道較多。腸道出血性大腸埃希氏菌 O26現(xiàn)已經(jīng)逐漸成為美國、加拿大、澳大利亞及部分歐盟發(fā)達國家引起人類食源性疾病的主要病原菌[4-8]。因此，快速檢測和鑒別食品中腸道出血性大腸埃希氏菌O26是保障食品質(zhì)量安全和防止食源性疾病暴發(fā)的有效手段。本文主要應(yīng)用PCR方法，通過設(shè)計引物，優(yōu)化反應(yīng)條件，建立食品中大腸埃希氏菌O26血清型的PCR檢測方法，以便對其進行快速、準確的檢測，并有利于克服傳統(tǒng)分離鑒定方法耗時費力、步驟繁瑣等不足之處。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 菌株

目標菌株：大腸埃希氏菌ATCC 12795。非目標菌株：大腸埃希氏菌ATCC BAA-2469、大腸埃希氏菌ATCC 23982、大腸埃希氏菌ATCC 35150、大腸埃希氏菌CCTCC AB 200051、大腸埃希氏菌EHEC Stx1、大腸埃希氏菌EHEC Stx2、大腸埃希氏菌NCTC 12900、大腸埃希氏菌EC O104、大腸埃希氏菌ATCC 43887、大腸埃希氏菌ATCC 29552、大腸埃希氏菌ATCC 33780、大腸埃希氏菌ATCC BAA-2190。……