B7-H3和癌胚抗原在惡性胸腔積液中的檢測(cè)及臨床意義*

胡瓊英，羅建蓉，艾承錦，陳高莉，張朝明，熊大遷△

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川成都 610072；2.四川省邛崍市醫(yī)療中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川邛崍 611530)

惡性胸腔積液(MPE)是腫瘤終末期常遇到的合并癥，其嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量和預(yù)后，是臨床治療中較為棘手的難題。目前治療大多以減輕患者痛苦為目的，采用保守姑息治療，療效一般。如何切實(shí)有效地提高M(jìn)PE的診斷，盡早干預(yù)，進(jìn)行治療，具有很大的現(xiàn)實(shí)意義，能夠造福于患者。本文分別對(duì)B7-H3和癌胚抗原(CEA)在MPE和良性胸腔積液(BPE)中的表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)，并就二者對(duì)MPE的診斷價(jià)值進(jìn)行了探討。

1 資料與方法

1.1一般資料 共收集2016年6月至2018年6月成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院MPE標(biāo)本40份，BPE標(biāo)本22份，并總結(jié)其臨床資料。MPE病例中，男16例，女24例，年齡39～72歲，平均(56.6±7.2)歲，非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)26例，小細(xì)胞肺癌4例，乳腺癌5例，腸癌3例，肝癌2例，所有病例經(jīng)胸膜病理活檢或胸水沉淀查到腫瘤細(xì)胞進(jìn)行確診。BPE病例中，男8例，女14例，年齡24～76歲，平均(54.2±9.1)歲，炎性胸水11例，結(jié)核性胸水11例。兩組在性別、年齡方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2試劑和方法 采用胸腔穿刺液約10 mL，4 ℃勻速離心10 min，留取約5 mL上清裝入EP管內(nèi)，余者-80℃保存檢測(cè)。B7-H3、CEA ELISA檢測(cè)試劑盒分別購(gòu)于上海江萊生物科技有限公司和Sigma-Aldrich公司(美國(guó))，采用ELx800酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀(美國(guó)biotek)進(jìn)行檢測(cè)，具體操作遵循廠(chǎng)家說(shuō)明。

2 結(jié) 果

2.1B7-H3、CEA在MPE和BPE中的表達(dá) B7-H3在MPE和BPE中的表達(dá)分別為(153.5±42.1)ng/mL、(108.0±36.2)ng/mL，CEA在MPE和BPE中的表達(dá)為(94.5±36.5)ng/mL、(48.1±29.5)ng/mL，組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

圖1 B7-H3和CEA檢測(cè)對(duì)惡性胸腔積液診斷意義的ROC曲線(xiàn)

2.2B7-H3、CEA檢測(cè)對(duì)惡性胸腔積液的診斷價(jià)值 繪制B7-H3、CEA表達(dá)量ROC曲線(xiàn)。結(jié)果顯示，B7-H3的最佳診斷界值為138.5ng/mL，相應(yīng)靈敏度、特異度為62.5%、81.0%，AUC為0.777(95%CI：0.662～0.892，P<0.001)；CEA的最佳診斷界值為76.05 ng/mL，相應(yīng)靈敏度、特異度為72.5%、81.0%，AUC為0.850(95%CI：0.753～0.947，P<0.001)。B7-H3與CEA聯(lián)合診斷惡性胸腔積液的靈敏度、特異度為70.0%、98.2%，AUC為0.910(95%CI：0.839～0.980，P<0.001)，優(yōu)于B7-H3、CEA單獨(dú)檢測(cè)見(jiàn)圖1。

3 討 論

MPE是晚期惡性腫瘤的常見(jiàn)并發(fā)癥，年發(fā)生超過(guò)15萬(wàn)人，主要原發(fā)腫瘤包括肺癌、乳腺癌、淋巴瘤、卵巢癌和胃癌，占所有MPE的80%，而約有10%病例原發(fā)腫瘤難以查明[1-3]。MPE預(yù)后極差，據(jù)報(bào)道，中位生存期僅有3～12個(gè)月，由腫瘤的細(xì)胞類(lèi)型、生物學(xué)特點(diǎn)以及病變范圍等綜合因素而定[2,4-5]。MPE的診斷一直是困擾臨床的難題之一，病理活檢往往需要全麻，創(chuàng)傷較大；細(xì)胞學(xué)診斷雖是診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”，但目前報(bào)道中的靈敏度并不令人滿(mǎn)意[6-7]。因此，探索、尋找簡(jiǎn)單有效的MPE標(biāo)志物將變得非常有意義。

B7超家族在T淋巴細(xì)胞的免疫活化和抑制過(guò)程中發(fā)揮重要作用。B7-H3(CD276)在2001年由CHAPOVAL首次發(fā)現(xiàn)，屬于Ⅰ型跨膜蛋白，是B7超家族中起負(fù)性調(diào)控作用的典型代表[8-10]。研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3在腫瘤進(jìn)展中發(fā)揮重要作用，參與腫瘤細(xì)胞免疫逃避，促進(jìn)腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移和血管生成，通過(guò)表觀遺傳修飾進(jìn)行基因調(diào)控[11-14]。在NSCLC中，人們發(fā)現(xiàn)NSCLC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期晚與B7-H3高水平表達(dá)密切相關(guān)[11,15-17]。此外，在乳腺癌、腎細(xì)胞癌、前列腺癌以及腦部腫瘤多項(xiàng)研究中也有類(lèi)似發(fā)現(xiàn)[18-21]。目前為止，B7-H3水平與MPE相關(guān)性鮮有報(bào)道，本研究發(fā)現(xiàn)，與BPE相比，MPE中B7-H3水平明顯增加，單獨(dú)應(yīng)用B7-H3診斷MPE的靈敏度、特異度達(dá)到62.5%、81.0%，是一種潛在MPE診斷標(biāo)記物。

CEA作為肺癌的腫瘤標(biāo)志物之一，已廣泛應(yīng)用于臨床，研究顯示其在MPE的診斷方面具有較高的應(yīng)用價(jià)值[7,22-23]。本研究中CEA診斷MPE的靈敏度、特異度與既往文獻(xiàn)基本一致，而深入研究發(fā)現(xiàn)B7-H3和CEA聯(lián)合檢測(cè)優(yōu)于B7-H3或CEA單獨(dú)檢測(cè)，診斷MPE的靈敏度、特異度為70.0%、98.2%。

4 結(jié) 論

筆者對(duì)B7-H3和CEA單獨(dú)檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)在MPE診斷價(jià)值和意義進(jìn)行了初步探討，發(fā)現(xiàn)二者在MPE診斷中具有較好的靈敏度、特異度，二者聯(lián)合診斷價(jià)值更高，具有更好的臨床應(yīng)用價(jià)值。