結核性胸腔積液患者胸水中白細胞介素-27、γ-干擾素、腺苷脫氨酶水平及臨床意義

唐添祥，龍明偉，李俊華，阿衣石布，趙 嘉，韓朋飛

(1.四川省涼山彝族自治州第二人民醫院呼吸內科，四川 西昌 615000；2.陜西省寶雞市高新人民醫院呼吸與危重癥區學科，陜西 寶雞 721000；3.陜西省寶雞市人民醫院呼吸內科，陜西 寶雞 721000)

胸腔積液是一種病因復雜的臨床常見征象，以胸膜腔內病理性液體積聚為主要特征，可分為滲出液和漏出液，結核和腫瘤是滲出性胸腔積液的兩大主要原因[1]。而結核性胸腔積液和惡性胸腔積液的治療及預后不同，正確鑒別胸腔積液性質尤為重要[2]。細菌學檢查及胸膜活檢是目前鑒別診斷胸腔積液性質的金標準，但結核桿菌培養較為困難，而胸膜活檢創傷大、手術風險高，難以在基層醫院開展，容易導致診斷困難、延誤治療[3]。隨著酶學及免疫學的發展，酶類及免疫相關因子對胸腔積液的診斷價值逐漸受到臨床重視[4]。本研究通過檢測結核性胸腔積液及惡性胸腔積液患者胸水中白細胞介素-27(IL-27)、γ-干擾素(IFN-γ)、腺苷脫氨酶(ADA)水平，進一步證實其對結核性胸腔積液的診斷價值，并探討聯合檢測對胸腔積液患者鑒別診斷的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料2015年9月到2019年1月我院住院治療的胸腔積液患者170例。納入標準：①符合《肺結核診斷和治療指南》中結核性胸腔積液診斷標準[5]；②符合惡性胸腔積液診斷標準[6]；③患者自愿參與，簽署知情同意書。排除標準：①病歷資料不完整者；②懷疑惡性積液但未經組織病理檢查確診者；③正在接受抗腫瘤或抗結核藥物治療或近期正在使用免疫抑制劑治療者；④近期(3個月內)接受過胸腔穿刺術或其他胸腔侵入性檢查者；⑤酗酒吸毒或合并嚴重功能障礙無法配合試驗者。其中結核性胸腔積液92例，男56例，女36例，年齡22～86歲[(48.45±12.50)歲]；惡性胸腔積液78例，男46例，女32例，年齡25～88歲[(52.72±14.28)歲]。兩組性別、年齡等基線資料比較，差異無統計學意義(P> 0.05)。

1.2 方法兩組采樣前均未經任何治療，在住院24 h內采用標準胸腔穿刺術抽取胸水10 ml，3000 r/min離心15 min，取上清液，置-80 ℃冰箱保存。采用酶聯免疫吸附法檢測IL-27、IFN-γ水平，采用酶顯色法檢測ADA水平，檢測試劑盒均由武漢博士德生物工程公司提供，嚴格按照試劑盒說明操作。

1.3 統計學方法應用SPSS 20.0軟件處理數據。計量資料比較采用t檢驗；繪制受試者工作特征(ROC)曲線，獲取各指標診斷結核性胸腔積液的曲線下面積(AUC)、cut-off值、敏感度、特異度，分析診斷效能；相關性分析采用Pearson相關分析。P< 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組胸水中IL-27、IFN-γ、ADA水平比較結核性胸腔積液組胸水中IL-27、IFN-γ、ADA水平均高于惡性胸腔積液組(P< 0.05)，見表1。

表1 兩組胸水中IL-27、IFN-γ、ADA水平比較

2.2 IL-27、IFN-γ、ADA診斷結核性胸腔積液的ROC曲線分析IL-27、IFN-γ、ADA診斷結核性胸腔積液的AUC值分別為0.908、0.899、0.881；IL-27的cut-off值為413.815 ng/L，敏感度、特異度為75.00%、96.20%；IFN-γ的cut-off值為144.255 ng/L，敏感度、特異度為80.40%、96.20%；ADA的cut-off值為32.11 U/L，敏感度、特異度為69.60%、98.70%。見表2、圖1。

表2 IL-27、IFN-γ、ADA診斷結核性胸腔積液的價值

圖1 IL-27、IFN-γ、ADA診斷結核性胸腔積液的ROC曲線

2.3 IL-27與IFN-γ、ADA的相關性分析胸水中IL-27水平與IFN-γ、ADA水平呈正相關(r=0.460，0.548，P< 0.05)。見圖2、圖3。

圖2 IL-27與IFN-γ的相關性

圖3 IL-27與ADA的相關性

3 討論

據文獻報道[6]的胸腔積液發病原因多達百余種，其中以結核性(54.15%)和惡性腫瘤(23.11%)為主，及時準確了解胸腔積液的成因對疾病早期診斷及治療有重要臨床意義。結核性胸腔積液是由多種細胞、細胞因子參與的免疫反應引起的，患者胸水中多含有大量細胞因子、趨化因子等可溶性炎癥介質[7]。隨著近年來免疫學及分子生物學研究的不斷發展，各種生物學指標已先后被用于臨床輔助診斷結核性胸腔積液[8]，希望能尋找到一種敏感性強、特異度高、風險小、操作簡便的檢測指標。

結核性胸腔積液作為一種以細胞免疫為主的Ⅳ型變態反應，T淋巴細胞在結核病的保護性免疫中起著至關重要的作用[9]。ADA廣泛存在于人體各種組織中，尤以T淋巴細胞內含量最高，其活性并不是由淋巴細胞數量決定，而與T淋巴細胞激活和分化相關[10]。機體感染結核桿菌后，機體細胞免疫功能增強，T淋巴細胞大量增殖與分化，ADA活性增強；而惡性胸腔積液時，腫瘤細胞攻擊T淋巴細胞抑制機體免疫應答，故ADA活性一般較低[11]。任兆強等[12]研究已有報道，結核性胸腔積液患者胸水中ADA水平顯著高于惡性胸腔積液患者，或可將其作為診斷結核性胸腔積液的理想指標。本研究亦得出相似結論，ROC曲線分析以32.11 U/L為cut-off值，ADA診斷結核性胸腔積液的AUC值為0.881，敏感度、特異度為69.60%、98.70%，表明ADA診斷結核性胸腔積液的敏感度、特異度均較高，進一步證實了ADA的臨床意義。

結核桿菌侵入機體后，首先發生的是非特異性炎癥反應，吞噬細胞聚集至感染部位吞噬細菌，活化初始T淋巴細胞，產生以T輔助細胞Ⅰ型為主的保護性應答，釋放多種細胞因子，其中以IFN-γ含量最高，使機體抗結核免疫反應放大[13]。陳林[14]研究證實，肺結核患者痰和血漿IFN-γ水平可部分反映Th1細胞免疫反應狀態。而惡性腫瘤的主要效應細胞是Th2細胞，Th1細胞免疫反應較弱，故其引起的胸腔積液中IFN-γ水平較低。本研究結果與此相同，ROC曲線分析以144.255 ng/L為cut-off值，IFN-γ診斷結核性胸腔積液的AUC值為0.899，敏感度、特異度為80.40%、96.20%，診斷效能優于ADA，表明檢測胸水中IFN-γ水平有助于判斷胸腔積液的性質。

IL-27是一種與IFN-γ密切相關的異二聚體細胞因子，并對Th1型免疫應答有雙重調節作用，可根據不同局部微環境發揮不同調節作用而維持機體穩定[15]。孫美玲等[16]研究發現，IL-27參與了結核性胸腔積液的炎性反應，在炎性反應早期IL-27可促進T淋巴細胞活化增生產生IFN-γ等細胞因子，直接參與Th1細胞分化，增強Th1型免疫應答反應。而惡性腫瘤時，IL-27可通過活化CD8+T細胞、NK細胞發揮抗腫瘤活性。隨著研究的深入，IL-27也逐漸成為了結核性胸腔積液診斷研究的新方向。本研究發現結核性胸腔積液組胸水中IL-27水平高于惡性胸腔積液組，ROC曲線分析以413.815 ng/L為cut-off值，IFN-γ診斷結核性胸腔積液的AUC值為0.908，敏感度、特異度為75.00%、96.20%，診斷效能優于ADA和IFN-γ，同時Pearson相關性分析顯示胸水中IL-27水平與IFN-γ、ADA水平呈正相關，表明三者或可相互調節，共同參與機體的免疫應答反應過程。但本研究為單中心研究，樣本量較小，存在一定局限性，不能完全闡明胸水中IL-27、IFN-γ、ADA水平與結核性胸腔積液發病的關系，還需今后開展多中心、大樣本量研究予以證實。

綜上所述，IL-27或可作為診斷結核性胸腔積液的靈敏指標，聯合檢測IFN-γ、ADA能進一步提高診斷效率，利于指導治療，改善患者預后。