慢性乙型肝炎患者血清谷氨酸脫氫酶活性、ApoA I、ApoB100含量的動態變化及臨床意義

鄭 奇，楊 麗，曾 霖，桂夢嵐，郭秀梅

(成飛醫院檢驗科，四川 成都 610092)

慢性乙型肝炎(CHB)是臨床常見肝病，隨著病情進展，可演變為肝硬化，甚至發展成為肝癌，嚴重危害人類健康[1，2]。早期發現及監測CHB病情發展并積極干預尤為重要。但目前對于CHB仍缺乏高敏感性且特異性的血清指標來進行病情嚴重程度及治療療效的評價。谷氨酸脫氫酶(GLDH)是一種線粒體酶，與谷氨酸代謝及能量代謝密切相關，近年研究發現，其在慢性肝病患者血清中呈高表達，能夠反映肝細胞損傷程度[3]。肝病患者常伴有脂質代謝異常。載脂蛋白對脂質轉運及結合有重要作用，載脂蛋白A-I(ApoA I)、載脂蛋白B100(ApoB100)是其中兩類主要載脂蛋白，其表達與慢性肝病患者脂質代謝紊亂有緊密聯系[4]。本研究通過觀察CHB患者治療前后血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100含量的動態變化，以期為CHB病情監測及療效評價提供指導。

1 資料與方法

1.1 一般資料2018年1～8月我院收治的CHB患者50例，均符合《慢性乙型肝炎防治指南(2015版)》[5]中CHB診斷標準，無其他系統嚴重疾病。男29例，女21例，年齡26～70歲[(45.23±9.24)歲]；選取同期我院健康體檢者50例為對照組，男26例，女24例，年齡25～68歲[(43.58±8.68)歲]。兩組均排除肝腎疾病、自身免疫性疾病、其他影響脂質代謝的疾病等。兩組性別、年齡比較，差異無統計學意義(P>0.05)。本研究獲得倫理委員會批準，所有研究對象均對研究知情并簽署同意書。

1.2 方法所有患者均予以常規保肝治療，多烯磷脂酰膽堿膠囊(國藥準字H20059010，賽諾菲北京制藥有限公司)，每次口服456 mg，每天3次。必要時予以抗病毒治療，恩替卡韋(國藥準字H20120039，江蘇正大天晴藥業股份有限公司)，每次口服0.5 mg，每天1次。對于丙氨酸轉氨酶(ALT)明顯升高(超過正常上限1倍)者，予以肝細胞保護劑異甘草酸鎂，根據病情可予以營養支持(白蛋白、血漿等)。持續治療28天。

1.3 血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100含量檢測所有患者均于治療前后采集外周靜脈血，對照組于體檢時采集外周靜脈血。采用全自動生化分析儀(BECKMAN AU5800型)，應用α-酮戊二酸底物法檢測血清GLDH活性，試劑盒購于北京九強生物技術股份有限公司；應用免疫比濁法測定血清ApoA I、ApoB100含量，試劑盒購于英國Abacm公司。所有檢測操作步驟嚴格按說明書進行。

1.4 肝功能Child分級評定參照文獻[6]中相關方法進行Child分級評分，內容包括肝性腦病存在情況及程度、腹水情況、血清膽紅素、白蛋白水平和凝血酶原時間(PT)五個指標。評分越高表示肝臟損傷越嚴重。

1.5 統計學方法采用SPSS 20.0統計學軟件分析數據。計量指標以均數±標準差表示，組間比較采用t檢驗；相關性分析采用Pearson相關系數法。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量及Child分級評分比較與對照組相比，CHB組血清GLDH活性及Child分級評分明顯較高(P<0.05)，ApoA I、ApoB100含量明顯較低(P<0.05)。見表1。

表1 兩組血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量及Child分級評分比較

2.2 CHB治療前后血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量及Child分級評分變化治療后，CHB血清GLDH活性及Child分級評分較治療前明顯降低，血清ApoA I、ApoB100含量較治療前明顯升高(P<0.05)。見表2。

表2 CHB治療前后血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量及Child分級評分變化

2.3 CHB患者血清GLDH活性、ApoA I、ApoB100含量與Child分級評分的相關性治療前CHB組血清GLDH活性與Child分級評分呈正相關(r=0.589，P<0.05)，ApoA I、ApoB100含量與Child分級評分呈負相關(r=-0.605、-0.584，P<0.05)；治療后CHB組血清GLDH活性亦與Child分級評分呈正相關(r=0.602，P<0.05)，ApoA I、ApoB100含量與Child分級評分呈負相關(r=-0.613、-0.568，P<0.05)。

2.4 血清GLDH、ApoA I、ApoB100檢測對于CHB的診斷效能血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100水平診斷CHB的曲線下面積分別為0.933、0.863、0.722，截斷值分別為12.86U/L、0.81 g/L、0.64 g/L，靈敏度分別為82.1%、79.6%、63.7%，特異度分別為89.2%、81.4%、77.6%。見圖1。

圖1 血清GLDH、ApoA I、ApoB100水平診斷CHB的ROC曲線

3 討論

慢性肝病因受各種損傷因子持續作用，導致肝臟組織結構遭到慢性破壞，假小葉形成，朝著肝纖維化進展，引起肝功能持續損害[7]。肝穿刺活檢是判斷慢性肝病病情嚴重程度的金標準，但其檢查程序繁瑣、費用昂貴，同時存在明顯創傷，無法用于動態觀察[8]。目前，臨床評價慢性肝病病情嚴重程度多依靠Child分級評分，而該評分系統涉及內容包括肝性腦病存在情況和其嚴重程度、腹水情況、血清膽紅素、白蛋白水平和PT五個指標，評價項目較多、繁瑣，易產生偶然誤差及系統誤差[9]。因此，臨床急需尋找敏感、特異且可方便用于動態評價慢性肝病肝損傷程度的血清學指標。

GLDH是一種含鋅的線粒體酶，在肝臟、腎臟、心臟、腦等多種組織中有著廣泛分布，其中以肝臟中活性最高。GLDH主要存在于肝細胞線粒體中，且在肝小葉不同區域內其表達水平是存在差異的，肝小葉中央靜脈肝細胞中的GLDH活性是周邊肝細胞的1.72倍[10]。正常情況下，血液中GLDH活性極低，當肝細胞出現損傷或壞死時，GLDH隨著線粒體崩解而進入血流，引起血清GLDH活性增高[11]。因此檢測血清GLDH活性有助于了解肝細胞損傷程度。GLDH活性不存在季節波動，個體差異較小，且幾乎不受其他因素影響。研究顯示，肝功能異常者血清GLDH活性明顯升高，可反映肝細胞損傷程度及治療效果[12]。相關研究表明，GLDH對肝實質損傷診斷的特異性相比于ALT、AST要高[13，14]。本研究顯示，與對照組相比，CHB組血清GLDH活性明顯升高，治療后血清GLDH活性降低，且血清GLDH活性與Child分級評分呈正相關，提示血清GLDH活性能夠反映患者肝損傷程度，并可動態反映治療效應。

載脂蛋白是一種多功能蛋白，可參與脂質結合、轉運、利用、分布等多種作用，對于脂質代謝有著重要作用。其具體功能包括：①調節酶活性；②配體作用，能夠與相關受體結合；③脂蛋白的重要組成。ApoA I、ApoB100是其中兩類主要載脂蛋白，前者是高密度脂蛋白(HDL)的主要蛋白成分，具有較強的卵磷脂膽固醇酰基轉移酶(LCAT)激活能力，在膽固醇代謝中扮演著重要角色；后者是低密度脂蛋白(LDL)的重要組成，其生理作用在于可識別LDL受體并與其結合，參與LDL的清除，有助于維持血清LDL、膽固醇水平的穩定。肝臟是ApoA I、ApoB100的主要合成部位，當肝功能出現損傷時，ApoA I、ApoB100合成障礙，血清ApoA I、ApoB100水平降低，并伴隨著血脂紊亂。本研究顯示，CHB組血清ApoA I、ApoB100水平明顯低于對照組，治療后出現升高，且血清ApoA I、ApoB100水平與Child分級評分呈負相關；因此血清ApoA I、ApoB100水平也可作為評估CHB患者肝損傷程度及治療療效的重要指標。本研究還采用ROC曲線分析了血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100水平對CHB的診斷能力，結果顯示，其曲線下面積分別為0.933、0.863、0.722，表明三者均對CHB有重要輔助診斷價值。

綜上所述，CHB患者GLDH活性升高，ApoA I、ApoB100含量降低，經治療后它們的水平得到一定恢復；且血清GLDH活性及ApoA I、ApoB100含量與Child分級評分呈正相關，檢測這三項指標有助于CHB的診斷及療效評估。