老年肌少癥患者外周血白細胞及淋巴細胞亞群的分析

王一棟，陳艷，王雙雙，杜文玲，鄭永克

（1.溫州市中心醫院 老年醫學科，浙江 溫州 325000；2.溫州醫科大學附屬第二醫院 骨科，浙江 溫州325027；3.溫州市中心醫院 婦產科，浙江 溫州 325000）

肌少癥是一種漸進性和全面的骨骼肌丟失及力量減退的綜合征，并可能導致機體殘疾、生活質量下降甚至死亡的不良后果[1-2]。與骨質疏松相比，肌少癥近10年來才逐漸受到重視。2016年，中華醫學會骨質疏松和骨礦鹽疾病分會發表了肌少癥共識，提高了我國醫務工作者對肌少癥的認識，規范了我國肌少癥的臨床診療工作[2]。肌少癥是增齡相關疾病，是環境和遺傳因素共同作用的復雜疾病，多種風險因素和機制參與其發生[2-5]。其機制包括運動減少、神經-肌肉功能減弱、增齡相關激素變化、促炎性反應細胞因子水平增高、肌細胞凋亡、遺傳因素、營養因素等。本研究從外周血淋巴細胞亞群水平來初步探討肌少癥患者的發病機制。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2017年6月至2018年2月溫州市中心醫院老年醫學科就診的老年患者120例，年齡61～86歲，平均（70.2±6.8）歲。排除標準：近期有感染（感染時間＜1個月）、炎癥性疾病、自身免疫疾病、惡性腫瘤、嚴重的營養不良及嚴重的器官功能不全（包括心力衰竭、呼吸衰竭、肝功能不全、腎功能不全等）的患者。本研究經本院倫理委員會批準，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 肌少癥診斷標準：根據2016年中華醫學會骨質疏松和骨礦鹽疾病分會發表的肌少癥共識的標準[2]。采用雙能X線吸收測量儀（dual energy X-ray absorptiometry，DXA）檢測肌量，四肢肌量指數[四肢肌量（kg）/身高2（m2）]：男性＜7.26 kg/m2，女性＜5.45 kg/m2。肌少癥診斷流程見圖1。

1.2.2 分組：依據肌少癥診斷標準，分為肌少癥組和非肌少癥組，其中肌少癥患者48例，非肌少癥患者72例。入組后行血常規、淋巴細胞亞群、血C-反應蛋白（C-reactive protein，CRP）等檢查。

1.2.3 檢測方法：采用免疫熒光雙標記法和流式細胞儀檢測入組患者外周血中T淋巴細胞及其亞群[包括總T淋巴細胞、CD4+T細胞、CD8+T細胞、B細胞、NK細胞（CD3-CD56+）、NK樣細胞（CD3+CD56+）、記憶T細胞（CD4+CD45RO+）、初始T細胞（CD4+CD45RA+）、雙陰T淋巴細胞（CD3+CD4-CD8-）]；采用血液細胞分析儀和全自動生化分析儀分別檢測血常規及CRP。

圖1 肌少癥診斷流程圖

1.3 統計學處理方法 采用SPSS24.0統計軟件進行統計學分析。計量資料用 ±s表示，2組間比較采用兩獨立樣本t檢驗，計數資料以率表示，2組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2組患者臨床基線資料比較 2組患者的年齡、性別、體質量指數、吸煙比例、高血壓比例、糖尿病比例差異均無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

2.2 2組患者血常規及淋巴細胞亞群檢測結果比較 肌少癥組患者外周血白細胞計數、NK細胞（CD3-CD56+）、CRP較非肌少癥組高，差異有統計學意義（P＜0.05）。而2組間總淋巴細胞、CD4+T細胞、CD8+T細胞、B細胞、NK樣細胞（CD3+CD56+）、記憶T細胞（CD4+CD45RO+）、初始T細胞（CD4+CD45RA+）、雙陰T淋巴細胞（CD3+CD4-CD8-）水平的差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表1 2組患者臨床基線資料比較

3 討論

研究顯示，免疫系統在肌少癥的發生、發展中扮演重要的角色，全身炎性反應導致肌肉組織合成代謝失衡，蛋白分解代謝增加[6-8]。而免疫細胞是免疫系統的功能單元，承擔免疫防御、免疫監視和免疫自穩的功能。包括中性粒細胞、淋巴細胞、單核巨噬細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、肥大細胞、樹突狀細胞、NK細胞等，而臨床上應用最多的指標是外周血白細胞。CRP是伴隨組織損傷、局部缺血、急性感染與炎癥反應而升高的一種血漿蛋白質，可以介導炎癥和促進炎癥反應的發生、抑制受損組織和聚集的吞噬細胞釋放血管活性物質和多種蛋白質分解酶的活性、免疫調節、清除炎癥物質和修復損傷的組織等功能[9-10]。本研究結果顯示，肌少癥患者外周血的白細胞計數和CRP均顯著高于非肌少癥組，提示機體存在微炎癥狀態。這與COLLERTON等[11]的研究結果相似，在肌少癥患者中，白細胞計數和中性粒細胞計數較無肌少癥患者高。隨著年齡的增加，中性粒細胞的趨化功能下降，遷移效率減退，導致組織受損和繼發的全身炎癥反應[12-14]。中性粒細胞的趨化功能下降，聯系著肌細胞持續的PI3-K信號的表達，通過PI3-K/Akt/mTOR信號途徑使肌肉分解代謝增加，從而引起肌肉量減少[14-15]。FERNáNDEZ-GARRIDO等[16]發現，中性粒細胞計數越高，患者的身體活動能力越差。在60歲以上的健康老年人中，白細胞計數的高低能預測10年后患者的衰弱程度[17]。

表2 2組患者血常規及淋巴細胞亞群檢測結果比較（ ±s）

淋巴細胞是不均一的細胞群體，包括許多具有不同免疫功能的亞群，CD4+T細胞能促進B細胞、T細胞和其他免疫細胞的增殖與分化，協調免疫細胞間的相互作用；而CD8+T細胞的功能亞群主要包括殺傷性T細胞和抑制性T細胞[18-19]。對于淋巴細胞亞群在肌少癥中的作用，目前鮮有研究報道。本研究中，肌少癥患者的外周血總淋巴細胞、CD4+T細胞、CD8+T細胞、B細胞、NK樣細胞、記憶T細胞、初始T細胞、雙陰T淋巴細胞水平和非肌少癥患者無顯著差異，但NK細胞百分比顯著高于非肌少癥組。NK細胞是淋巴細胞的一個亞群，是固有免疫應答的重要細胞，被譽為固有免疫核心細胞，具有殺傷和免疫調節功能。本研究顯示，NK細胞百分比高可能與肌少癥患者的固有免疫應答過強有關。WILSON等[6]研究顯示，固有免疫系統的細胞可能間接導致肌少癥。

總之，本研究顯示，肌少癥患者的外周血白細胞、NK細胞、CRP較非肌少癥患者顯著升高，可能與機體微炎癥狀態和固有免疫功能過強有關，從而間接引起肌組織的丟失而導致肌少癥。