康痔栓對(duì)大鼠肛周腫脹及小鼠斷尾出血的影響*

竇建衛(wèi)，彭 湃

(1.西安交通大學(xué) 藥學(xué)院，陜西 西安 710061；2.甘肅中醫(yī)藥大學(xué) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，甘肅 蘭州 730000)

痔瘡(Hemorrhoids)是指肛管血管墊的支持結(jié)構(gòu)、靜脈叢、動(dòng)靜脈吻合支發(fā)生病變或下移及齒線遠(yuǎn)側(cè)靜脈叢病理性擴(kuò)張或血栓形成導(dǎo)致的肛腸疾病[1]。根據(jù)其發(fā)生的部位，可分為內(nèi)痔、外痔、混合痔。痔的主要癥狀有肛周出現(xiàn)水腫、疼痛以及瘙癢甚至脫墜，可伴有便血等，常易反復(fù)發(fā)作，給患者的生活帶來諸多不便。隨著對(duì)痔瘡病因、病理及機(jī)制研究的進(jìn)展，已逐步認(rèn)識(shí)到非手術(shù)治療應(yīng)該是治療本病的首選。中藥栓劑在治療痔瘡上，療效顯著[2,3]。康痔栓具有燥濕、止血、鎮(zhèn)痛之功效，臨床主要用于內(nèi)、外痔及混合痔濕熱壅滯證，但其藥效學(xué)機(jī)制還有待研究。為進(jìn)一步驗(yàn)證康痔栓的藥效學(xué)機(jī)制，本研究通過建立大鼠痔瘡腫脹模型及小鼠出血模型，探討康痔栓對(duì)肛周腫脹及出血的影響，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)

SPF級(jí)SD大鼠，體質(zhì)量180 g～220 g，60只；SPF級(jí)昆明小鼠，體質(zhì)量18 g～22 g，50只，購自西安交通大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，生產(chǎn)許可證號(hào)：SYXK(陜)2015-002。動(dòng)物分籠，普通飼料飼養(yǎng)，自由攝食攝水。飼料購買自西安交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。飼養(yǎng)環(huán)境溫度18 ℃～20 ℃，相對(duì)濕度60 %～70 %。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物

康痔栓(本院提供，2.5 g/粒)，用新配制的0.5 % CMC-Na溶液將康痔栓制成16.7、6.7、3.3 mg/mL的混懸液(康痔栓高、中、低劑量濃度)，痔瘡栓(Z 20055324，通藥制藥集團(tuán)股份有限公司，2 g/粒)，用新配制的0.5 % CMC-Na溶液將痔瘡栓制成2.6 mg/mL的混懸液。

1.3 主要試劑

硫化鈉，鄭州易陽化工有限公司；巴豆油，江西吉水三達(dá)天然藥用香料油廠；吡啶，上海化學(xué)試劑總廠；乙醚，常州楊園化工廠等。

1.4 主要儀器

AUY 120電子天平，日本津島；恒溫水浴箱，國華電器等。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法

1.5.1 大鼠肛周腫脹實(shí)驗(yàn)[4]

取雌性大鼠60只，用脫毛劑(10 %硫化鈉)將大鼠肛周毛脫去，脫毛面積約為2.0 cm×1.5 cm，按體質(zhì)量隨機(jī)分為空白對(duì)照組10只和造模組50只。把棉簽放入0.16 mL巴豆油混合液(蒸餾水、吡啶、乙醚和6 %巴豆油按1∶4∶5∶10的比例混合)中浸吸5 min。取浸潤好的棉簽插入到造模組大鼠肛門內(nèi)15 s，隨后觀察腫脹情況。造模成功后，造模組按腫脹大小隨機(jī)分為模型組，康痔栓高、中、低劑量組，痔瘡栓組，每組10只。各給藥組于6、12、24、48、72 h將藥物涂于肛門腫脹處，給藥體積為2.5 mL，空白對(duì)照組和模型組用0.5 % CMC-Na溶液外涂肛門腫脹處。每次給藥后30 min，以圓規(guī)測(cè)定整個(gè)肛門周圍組織腫脹的直徑，取其長(zhǎng)短兩直徑的均值的乘積(腫脹面積)作為測(cè)定腫脹程度的指標(biāo)。最后一次測(cè)量后處死大鼠，取肛周腫脹部位組織，10 %甲醛固定，做病理組織學(xué)檢查。評(píng)分見表1。

表1 肛周病理評(píng)分表

1.5.2 大鼠斷尾止血實(shí)驗(yàn)[4]

取雌性小鼠50只，按體質(zhì)量隨機(jī)分為空白對(duì)照組，康痔栓高、中、低劑量組，痔瘡栓組，每組10只。康痔栓高、中、低劑量組分別給不同劑量康痔栓0.5 % CMC-Na混懸液，痔瘡栓組給痔瘡栓0.5 % CMC-Na混懸液。空白對(duì)照組給等體積0.5 % CMC-Na溶液。30 min后將小鼠置于小鼠固定器中剪尾0.5 cm。斷尾的同時(shí)立即記時(shí)，并每隔30 s用濾紙吸去血液，至不再出血為止。記錄斷尾后出血時(shí)間。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 康痔栓對(duì)大鼠肛周腫脹實(shí)驗(yàn)

與空白對(duì)照組相比，模型組大鼠肛周明顯腫脹，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與模型組相比，康痔栓高、中、低劑量組和痔瘡栓組大鼠肛周腫脹降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與空白對(duì)照組相比，模型組大鼠直腸、肛周組織的炎細(xì)胞浸潤明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與模型組相比，康痔栓高、中、低劑量組和痔瘡栓組均可降低直腸、肛周組織的炎細(xì)胞浸潤，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2、圖1。

表2 康痔栓對(duì)大鼠肛周腫脹的影響

圖1 康痔栓對(duì)大鼠肛周腫脹的病理評(píng)分

注：與模型對(duì)照組相比，1)P<0.05，與痔瘡栓組相比，2)P<0.05。

2.2 康痔栓對(duì)小鼠斷尾出血時(shí)間的影響

與模型組相比，康痔栓高、中、低劑量組和痔瘡栓組均可縮短小鼠斷尾出血時(shí)間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與痔瘡栓相比，康痔栓高劑量組縮短小鼠斷尾出血時(shí)間更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見圖2。

圖2 康痔栓對(duì)小鼠斷尾出血時(shí)間的影響

注：與模型對(duì)照組相比，1)P<0.05，與痔瘡栓組相比，2)P<0.05。

3 討 論

痔瘡多因嗜食辛辣、便秘、久瀉久痢、跋涉遠(yuǎn)行、長(zhǎng)期久坐久站及婦人妊娠等引起，常見便血、肛門墜脹疼痛、痔黏膜及痔核形成等癥狀。其發(fā)生的根本原因在于直腸末端黏膜下及肛管皮膚下靜脈叢屈曲，而導(dǎo)致柔軟靜脈團(tuán)的形成。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，其癥多為肛周氣滯不行，血瘀阻絡(luò)，而致濕熱內(nèi)生而成[5]，治療以清熱燥濕止痛、化瘀消腫止血為主。康痔栓中黃柏、黃芩清熱燥濕；當(dāng)歸、白及等補(bǔ)血活血，祛瘀止血，使新血得生，瘀血得化；冰片清熱消腫。諸藥合用，共奏清熱燥濕止痛、化瘀消腫止血之功效。

痔瘡在藥效學(xué)上沒有固定的動(dòng)物模型，本次實(shí)驗(yàn)選用穩(wěn)定常用實(shí)驗(yàn)造模方法，即巴豆油誘導(dǎo)大鼠肛周腫脹模型及小鼠斷尾出血試驗(yàn)[6]，研究康痔栓的消腫及止血能力。結(jié)果表明，康痔栓可明顯改善大鼠肛周腫脹程度，縮短小鼠斷尾出血時(shí)間。

痔瘡導(dǎo)致的肛周腫脹、潰瘍、疼痛及出血，在臨床上最為常見，而實(shí)驗(yàn)表明，康痔栓具有明顯的消腫、止血的效用，為康痔栓治療痔瘡的臨床應(yīng)用提供了藥效學(xué)基礎(chǔ)。