乳腺癌超聲彈性成像與組織學特征、分子生物學指標的相關性

沈吉 韓運生 陳文顯

(浙江大學湖州醫院 湖州市中心醫院，浙江 湖州 313000)

乳腺癌是常見的一種女性惡性腫瘤，臨床調查顯示其發病率呈逐年增加趨勢，現居女性惡性腫瘤第一位，使女性健康和生存質量受到嚴重威脅，且其預后越來越受到關注〔1,2〕。超聲彈性成像是近年來廣泛于臨床上開展的超聲顯像新技術，該方法可在清晰顯示二維聲像圖特征的基礎上，疊加組織彈性圖，從而以不同彩色編碼代表不同組織硬度，主要經探測腫塊的硬度鑒別其良惡性〔3,4〕。研究顯示，人表皮生長因子受體(Her)-2、雌激素受體(ER)和孕激素受體(PR)是評價乳腺癌預后及治療的重要分子生物學指標〔5〕。因此，本研究探討乳腺癌超聲彈性成像與組織學特征、分子生物學指標的相關性。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選擇2014年1月至2015年11月期間湖州市中心醫院收治的乳腺癌患者200例，術前均行超聲彈性成像診斷，且經空芯針穿刺活檢或者手術病理檢查證實為乳腺癌；一側乳腺單發病灶；簽訂知情同意書者。納入的200例患者中，均為女性，年齡55～85〔平均(72.31±4.25)〕歲；平均腫瘤大小(1.68±0.42)cm。

1.2方法

1.2.1超聲彈性成像 采用意大利百勝Mylab70超聲診斷儀，高頻線陣探頭LA523，頻率為8～13 MHz，具有實時組織彈性成像技術。選擇乳腺檢查程序，獲取二維超聲圖像特征，灌注病灶邊緣、周界、外形、大小、微鈣化、毛刺征、腋窩淋巴結等；再獲取彩色多普勒血流特征，按照Adler半定量分級法對血供情況進行評估；實時彈性超聲模式獲取病灶硬度特征，再按照Itoh 5分法進行彈性評分。具體評分標準：以患者乳腺病變區以綠色為主為1分，以患者乳腺病區以綠色為主、少許紅色為2分，以患者病變區以紅色為主、少許綠色為3分，以患者乳腺病區以紅色為主為4分，以患者病變區以全紅色為5分。評分3分及以下超聲彈性成像判定為良性病變，評分4分級5分為惡性病變。

1.2.2組織學特征 包括腫瘤大小、腫瘤類型、淋巴結轉移。

1.2.3分子生物學指標檢測 采用免疫組化法測定Her-2、ER和PR表達，術后取患者病理活檢組織，將切片放置于0.01 mmol/L pH值6.0檸檬酸緩沖液中，放置于96℃條件下微波加熱10 min，加入30%過氧化氫甲醇溶液于恒溫條件下培養加熱30 min。加入一抗試劑：二氨基聯苯胺，且于4℃條件下的恒溫箱中孵育24 h。再以pH7.4為0.01 mmol/L磷酸鹽緩沖液作為陰性對照。加入二抗Her-2、ER和PR單克隆抗體，于室溫條件下孵育60 min。再以二氨基聯苯胺(DAB)顯色，以蘇木素復染細胞核，中性樹脂封片。由我院兩名專業病理醫師閱片，結果一致時作為確診結果。其中Her-2、ER和PR均以細胞核內出現黃色顆粒為陽性標準判斷，并且在電鏡中觀察到染色細胞占視野所有細胞比例10%以上為陽性，而10%及以下為陰性。

1.3觀察指標 ①觀察超聲彈性成像評分結果；②觀察組織學特征；③觀察Her-2、ER和PR表達陽性情況；④觀察超聲彈性成像評分與組織學和分子生物學水平的關系。

1.4統計學方法 采用SPSS22.0軟件行χ2檢驗。

2 結 果

2.1超聲彈性成像評分及組織學特征分布 超聲彈性成像評分中，3分9例(4.50%)、4分24例(12.00%)、5分167例(83.50%)。腫瘤大小≥2.0 cm者54例(27.00%)，浸潤型導管癌168例(84.00%)，浸潤型小葉癌26例(13.00%)，其他類型6例(3.00%)，淋巴結轉移者73例(36.50%)。

2.2Her-2、ER和PR表達陽性表達情況 Her-2陽性表達者125例(62.5%)，ER陽性表達者139例(69.5%)，PR陽性表達者145例(72.50%)。

2.3超聲彈性成像與組織學特征和分子生物學相關性 不同腫瘤大小超聲彈性成像評分比較差異無統計學意義(P>0.05)；浸潤型導管癌超聲彈性成像評分5分多于浸潤型小葉癌和其他類型，淋巴結轉移超聲彈性成像評分5分多于無淋巴結轉移，Her-2陽性超聲彈性成像評分5分多于陰性，ER陽性超聲彈性成像評分5分多于陰性，PR陽性超聲彈性成像評分5分多于陰性，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 超聲彈性成像與組織學特征和分子生物學相關性(n)

3 討 論

盡早發現及鑒別乳腺腫瘤良惡性病變對治療效果提高具有重要意義。近年來各種影像學技術的不斷發展提高了淺表淋巴結良惡性腫瘤鑒別準確率〔6〕。超聲彈性成像是近年來新發展的一種技術，該方法主要通過對患者使用超聲彈性成像檢查能夠有效了解病灶惡性程度和性質，且于臨床良惡性腫瘤的診斷和鑒別中逐漸應用〔7，8〕。腫瘤的超聲彈性成像評分差異與其硬度差異即組織病理學成分密切先關，一般認為病變硬度與良惡性具有顯著相關性，故而較多關注于腫瘤細胞本身〔9，10〕。目前，關于良惡性腫瘤間質成分的研究越來越受到學者們的重視。超聲彈性成像的遠離主要是按照不同組織彈性系數不同，在施加外力或者自身運動后期形變也不一樣，故而通過收集被測物體各片段信號且轉化為彩色編碼成像，然后再通過圖像色彩反映組織軟硬程度，故用于判斷組織良惡性病變情況〔11，12〕。浸潤型導管型是最常見的乳腺癌類型，其次為浸潤型小葉癌。分子基因的異常表達可調控腫瘤細胞的發生、發展及轉移生物學行為，從而致使腫瘤組織形態學的改變，在一定程度上通過超聲征象表現，故而認為乳腺癌分子生物學表達與超聲彈性成像存在一定相關性〔13，14〕。Her-2基因主要是與乳腺癌發生關系緊密的一種原癌基因。轉染Her-2基因的乳腺腫瘤細胞侵襲性增強，在裸鼠中的轉移能力及成瘤性增強。ER和PR陽性表達為激素依賴性乳腺癌，主要存在于女性乳腺細胞中，并且參與乳腺細胞生長發育和內分泌調節等生命活動及對內分泌治療敏感〔15〕。Her-2、ER和PR是預測乳腺癌預后及侵襲能力的重要因子，其能夠指導乳腺癌不同亞型的個體化治療，且能夠評估其復發的風險。而臨床上通過實施彈性成像檢查及參考Her-2、ER和PR表達，能夠為臨床診斷以及治療計劃提供參考〔16〕。本研究結果表明，浸潤型導管癌超聲彈性成像評分5分多于浸潤型小葉癌和其他，淋巴結轉移超聲彈性成像評分5分多于無淋巴結轉移，Her-2、ER和PR陽性超聲彈性成像評分5分多于陰性。綜上所述，乳腺癌超聲彈性成像與組織學病理及Her-2、ER和PR陽性表達具有一定相關性，聯合可作為乳腺癌早期診斷及預后評估。