王麗英 袁瑞敏
(承德市農產品質量監督檢測中心,河北 承德 067000)
承德作為習近平總書記定位的京津冀水源涵養功能區,水源充沛、氣候適宜、生態優良、土壤條件較好,發展現代農業基礎和條件得天獨厚。近年來,我市構建起“一環六帶” 生態特色農業產業布局和產業體系,特別是蔬菜產業呈現出強勁的發展勢頭,確保食品安全重要手段的安全快速度檢測技術,也起到越來越重要的作用。由于許多食品原材料大量使用農藥、激素、抗生素等有害物質使食品中毒現象時有發生,且突發性強,蔓延迅速。常規的農藥殘留分析方法利用氣相色譜儀、液相色譜儀、質譜儀或各種光譜儀等大型精密儀器來進行農藥殘留,基于色譜和質譜的分析方法檢測精度高、重復性好,是農藥殘留定量檢測分析的主要方式。但這些方法不僅需要大型的儀器設備,而且需要比較復雜的前處理過程、儀器設備昂貴、檢測時間較長、要求熟練的技術人員才能完成等問題,既無法適應大批量快速檢測的需要也不能滿足樣品現場快速檢測的要求,迫使人們運用新的原理和方法去開發特異性強、靈敏度高、方便快捷、準確安全的快速檢測新技術。
從對我各市縣(區)調查結果來看我市各縣、區檢測中心及鄉鎮檢測站主要采取的農產品快速檢測方法主要為酶抑制法、酶聯免疫法。
(一)酶抑制技術 酶抑制技術是研究比較成熟、在國內應用最廣泛的速測技術之一,是利用有機磷和氨基甲酸酯類農藥抑制膽堿酯酶(ChE)的特異性生化反應。膽堿酯酶主要分為乙酰膽堿酯酶(ACHE)和丁酰膽堿酯酶(BcllE),農藥對其抑制由于來源不同而有差異,對農殘的檢測精度也因不同品種的農藥產品而不同。目前,依據酶抑制法原理設計并廣泛使用的農藥殘留檢測方法主要有速測卡法(紙片法)、比色法(分光光度法)。
1.比色法(分光光度法)。《GB/T 18630—2002 蔬菜中有機磷及氨基甲酸酯農藥殘留量的簡易檢驗方法酶抑制法》和《NY/T 448—2001蔬菜上有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留毒快速檢測方法》均為比色法(分光光度法)。乙酰膽堿酯酶水解后,水解產物可與顯色劑反應產生顏色。有機磷和氨基甲酸酯類農藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農藥的濃度呈正相關。正常情況下,酶催化神經傳導代謝產物(乙酰膽堿)水解,其水解產物與顯色劑反應,產生黃色物質,用分光光度計在412nm處測定吸光度隨時間的變化 值,計算出抑制率,通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑 量有機磷或氨基甲酸酯類農藥的存在。但是酶抑制法只能檢測有機磷和氨基甲酸酯兩類農藥,且對同類、不同種農藥的抑制率差別很大。它具有短時間能夠檢測大量蔬菜樣本,檢測成本低對于檢測人員技術水平要求低,易于在基層推廣等特點,是目前我國控制高毒農藥殘留的一種有效方法,也是目前國內和我市應用最為廣泛的農藥殘留快速檢測方法。
2.農藥殘留速測卡農藥殘留速測卡法(紙片法)。農藥殘留速測卡又名農藥殘留快速檢測卡、農藥殘留檢測卡、農殘速測卡。是以國家2003年公布的農藥殘留快速檢測的標準方(《GB/T 5009.199—2003蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測》)為原理,利用對有機磷和氨基甲酸脂類農藥高敏感的膽堿酯酶和顯色劑做成的試紙,利用迅速產生明顯顏色的化學反應檢測待測物質,通過與標準比色卡進行目視定性或半定量分析。速測卡法與一般的儀器分析方法相比,具有價格便宜,操作相對簡便,結果顯示直觀,一次性使用,不需檢修維護,具有一定的靈敏度和專一性等一系列優點,非常適于食品安全的現場檢測。
酶抑制法的優缺點:
(1)該方法具有快速方便、前處理簡單、成本較低等優點,適用于現場定性測定,特別適合在蔬菜生產基地、批發市場及農產品檢測部門開展快速檢測工作。
(2)該方法可對有農藥殘留的蔬菜進行粗篩,將一部分農藥殘留含量較高的蔬菜控制在市場之外,避免因農藥殘留發生中毒事件
(3)酶試劑易失活,導致反應不穩定,檢測結果誤差較大,重復性不好,實際應用中的確認率大約為 60%~70%左右。
(4)存在檢測盲區,只能檢測有機磷和氨基甲酸酯兩類農藥,不能檢測有機氯類、菊酯和其它類別的劇毒農藥。
(5)不適合檢測蔥蒜類、香菜、韭菜、番茄、胡蘿卜、茭白、蘑菇、花椒等 14 種容易出現假陽性的農產品。
另外該方法僅適用于基層初檢。在發現超標現象時,必須用標準方法進行復測確證,這在《農產品質量安全法》第36條第二款中有明確的規定,對于陰性結果,也應按比例進行抽樣,采用可靠的方法進行復測和確證。
各縣市目前使用的檢測標準主要有《GB/T 18630—2002 蔬菜中有機磷及氨基甲酸酯農藥殘留量的簡易檢驗方法酶抑制法》、《GB/T 5009.199—2003蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測》和《NY/T 448—2001蔬菜上有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留毒快速檢測方法》
中國現行的3個蔬菜中有機磷及氨基甲酸酯農藥殘留量快速檢測標準發布實施均達10年或10年以上。而近10年來,中國多次修訂了有關農藥殘留限量標準,最新版本為《GB 2763—2016食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量》已于2017年6月18日起實施;最近幾年,速測產品及其配套試劑都得到了快速發展,并且在實際應用中積累了大量實踐經驗,為下一步修訂和更新蔬菜中有機磷及氨基甲酸酯農藥殘留量快速檢測標準打下了堅實基礎。
(一)存在問題。一是目前的快速檢測儀器只能夠對特定類別的農藥進行定性檢測(有機磷和氨基甲酸酯類),不能檢測有機氯、菊酯和其他類農藥;二是酶試劑容易失活,反應不穩定,檢測結果誤差較大,重復性不好;三是快速檢測設備靈敏度低,檢測數據結果穩定性差,個別檢驗方法繁瑣,假陽性率偏高等。四是某些蔬菜在檢測過程中容易出現假陽性,影響判斷。
(二)建議。一是引進新型的速測儀器,能夠對其他類農藥進行檢測,改進檢測方法,提高速測結果的穩定性和可重復性。二是應增加對有機氯、擬除蟲菊酯類農藥的快速檢測方法。三是提高試劑盒廠家準入門檻,從而提高試劑盒的質量和穩定性。