細(xì)胞黏附分子1基因啟動(dòng)子甲基化和宮頸癌關(guān)系的Meta分析

曹怡

[摘要]目的 探討細(xì)胞黏附分子1（CADM1）基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化與宮頸癌的關(guān)系。方法 計(jì)算機(jī)檢索PubMed、Medline、Embase、Cochrane、中國知網(wǎng)、萬方、維普數(shù)據(jù)庫，按照擬定的納入排除標(biāo)準(zhǔn)篩選文獻(xiàn)，檢索年限為建庫至2019年2月28日。采用Review Manager 5.3和Meta-DiSc 1.4軟件進(jìn)行Meta分析，計(jì)算合并的診斷比值比（DOR）、敏感度、特異度，并繪制集成受試者工作特征曲線（SROC）。結(jié)果 共納入14篇文獻(xiàn)，包括宮頸癌患者587例、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）患者472例、對(duì)照506例。CADM1甲基化診斷宮頸癌的合并DOR為20.97，敏感度為0.68，特異度為0.91，曲線下面積（AUC）為0.88;CADM1甲基化診斷HSIL的合并DOR為6.31，敏感度為0.55，特異度為0.81，AUC為0.77。結(jié)論 CADM1基因高甲基化和宮頸癌、HSIL的發(fā)生存在相關(guān)性，CADM1基因甲基化作為生物標(biāo)志物可能有助于宮頸癌篩查。

[關(guān)鍵詞]細(xì)胞黏附分子1;DNA甲基化;宮頸癌;Meta分析

[中圖分類號(hào)] R737.33? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-4721（2019）11（a）-0012-05

Meta-analysis of the relationship between methylation of cell adhesion molecule 1 gene promoter and cervical cancer

CAO Yi

School of Biological Science & Medical Engineering， Southeast University， Jiangsu Province， Nanjing? ?210018， China

[Abstract] Objective To investigate the relationship between methylation of cell adhesion molecule 1 （CADM1） gene promoter and cervical cancer. Methods Published studies were searched from PubMed， Medline， Embase， Cochrane， China National Knowledge Infrastructure， WANFANG and CQVIP database， the retrieval period was to build the database untill February 28， 2019. The pooled diagnostic odds ratio （DOR）， sensitivity， specificity were calculated and the summary receiver operating characteristic curve （SROC） was plotted using Revman 5.3 and Meta-DiSc 1.4 software. Results A total of 14 studies， comprising 587 tumor samples， 472 high-grade squamous intraepithelial lesion （HSIL） samples and 506 normal samples， were analyzed in this Meta-analysis. Methylated CADM1 in cervical cancer achieved the pooled DOR， sensitivity， specificity were 20.97， 0.68， and 0.91， and the area under the curve （AUC） was 0.88. Meanwhile， CADM1 methylation in HSIL achieved the pooled DOR， sensitivity， specificity were 6.31， 0.55， and 0.81， and the AUC was 0.77. Conclusion CADM1 promoter hypermethylation is significantly associated with HSIL and cervical cancer， it could be an auxiliary biomarker for cervical cancer screening.

[Key words] Cell adhesion molecule 1; DNA methylation; Cervical cancer; Meta-analysis

宮頸癌是最常見的婦科癌癥之一，目前主流的宮頸癌篩查方案是通過細(xì)胞學(xué)檢查和人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）檢測進(jìn)行。然而，細(xì)胞學(xué)篩查準(zhǔn)確性低，可重復(fù)性差[1]，HPV檢測敏感性高，但高達(dá)90%的一過性感染率限制了其特異性[2]。因此，需要開發(fā)新的高敏感性和特異性的生物標(biāo)記物應(yīng)用于宮頸癌篩查。

細(xì)胞黏附分子1（cell adhesion molecule 1，CADM1），又稱為肺癌抑制基因1（tumor suppressor in lung cancer 1，TSLC1），是一種腫瘤抑制基因，主要介導(dǎo)細(xì)胞間黏附的穩(wěn)定[3]。在宮頸癌中，有大量研究評(píng)估了CADM1甲基化與宮頸癌發(fā)展的關(guān)聯(lián)。本研究將這些數(shù)據(jù)結(jié)合起來進(jìn)行Meta分析，評(píng)估CADM1甲基化在宮頸癌及癌前高度鱗狀上皮內(nèi)病變（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）的診斷性能，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn)：①病例對(duì)照研究;②評(píng)估CADM1甲基化在宮頸癌中的診斷性能;③檢測人CADM1基因;④對(duì)照使用正常或良性疾病樣本;⑤研究有可提取四格表的數(shù)據(jù)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①綜述、摘要和病例報(bào)告;②體外研究;③沒有完整數(shù)據(jù)的研究。對(duì)于重復(fù)數(shù)據(jù)，僅選擇最新或詳細(xì)的數(shù)據(jù)集。

1.2檢索策略

檢索的外文數(shù)據(jù)庫為：PubMed，Cochrane，Med-line和Embase，檢索式為：（“CADM1” or “TSLC1”） and （“methylation” or “methylated”） and （“cervical”）;檢索的中文數(shù)據(jù)庫為：中國學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫、萬方數(shù)據(jù)庫和維普中文科技期刊數(shù)據(jù)庫，檢索式為：（“CADM1”或“TSLC1”）和（“甲基化”和“宮頸”）。檢索年限為建庫至2019年2月28日。

1.3文獻(xiàn)篩選、資料提取、質(zhì)量評(píng)價(jià)

檢索得到的文獻(xiàn)去除重復(fù)后閱讀標(biāo)題和摘要進(jìn)行初步篩選，再閱讀全文根據(jù)納入及排除標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)一步篩選。對(duì)選定的研究提取以下信息：出版年份、第一作者姓名、國家、樣本類型、疾病及對(duì)照的樣本量、甲基化檢測方法。使用診斷性試驗(yàn)準(zhǔn)確性質(zhì)量評(píng)價(jià)工具[4]（quality assessment of diagnostic accuracy studies 2，QUADAS2）對(duì)研究質(zhì)量進(jìn)行評(píng)分。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)分析使用軟件Review Manager 5.3和Meta-DiSc 1.4進(jìn)行，合并診斷比值比（diagnostic odds ratio，DOR）、敏感度、特異度及其相應(yīng)的95%置信區(qū)間（Confidence interval，CI）并繪制集成受試者工作特征曲線（summary receiver operating characteristic curve，SROC）以評(píng)估CADM1甲基化狀態(tài)與HSIL、宮頸癌的關(guān)聯(lián)。納入研究的異質(zhì)性通過Q檢驗(yàn)和I2檢驗(yàn)來評(píng)估。當(dāng)發(fā)現(xiàn)顯著的異質(zhì)性（I2≥50%或PQ-檢驗(yàn)≤0.1）時(shí)，使用隨機(jī)效應(yīng)模型匯總結(jié)果;否則應(yīng)用固定效應(yīng)模型。通過回歸分析探索異質(zhì)性的來源，通過漏斗圖評(píng)估發(fā)表偏倚。

2結(jié)果

2.1文獻(xiàn)檢索結(jié)果

使用檢索策略共檢索出177篇潛在相關(guān)研究，排除86篇重復(fù)后通過閱讀標(biāo)題和摘要排除53篇研究。閱讀全文后排除22篇無可納入數(shù)據(jù)的研究，2篇非病例對(duì)照研究。最終納入了14篇文章，其中1篇文章包含2項(xiàng)獨(dú)立研究的數(shù)據(jù)，共15項(xiàng)研究。

2.2納入研究的基本特征與質(zhì)量評(píng)價(jià)

納入文獻(xiàn)的基本特征見表1，所有研究的診斷金標(biāo)準(zhǔn)均為組織病理學(xué)。

采用QUADAS2的條目評(píng)估了每篇文獻(xiàn)的研究質(zhì)量，結(jié)果見圖1。

2.3 Meta分析結(jié)果

2.3.1 CADM1甲基化與宮頸癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)? 共11項(xiàng)研究[5，8-13，15-18]（n=472）報(bào)道了CADM1甲基化與宮頸癌發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，各研究間無統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性（I2=7.1%，P=0.38），固定效應(yīng)模型Meta分析結(jié)果顯示，合并敏感度為0.68（95%CI：0.63～0.72），特異度為0.91（95%CI：0.87～0.94），DOR為20.97（95%CI：12.76～34.44），SROC的曲線下面積（area under the curve，AUC）為0.88（圖2）。

2.3.2 CADM1甲基化與HSIL發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)? 共15項(xiàng)研究[5-18]（n=587）報(bào)道了CADM1甲基化與HSIL發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，各研究間有統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性（I2=60%，P=0.002），隨機(jī)效應(yīng)模型Meta分析結(jié)果顯示，合并敏感度為0.55（95%CI：0.51～0.59），特異度為0.81（95%CI：0.78～0.85），DOR為6.31（95%CI：3.41～11.69），SROC的AUC為0.77（圖3 ）。

為了研究HSIL的分析中觀察到的顯著異質(zhì)性，本研究進(jìn)行了回歸分析，使用基于國家、檢測方法、樣本類型三個(gè)變量的回歸模型，結(jié)果表明，異質(zhì)性主要來源于樣本類型（表2）。

2.4發(fā)表偏倚評(píng)估

發(fā)表偏倚的漏斗圖未表現(xiàn)出明顯的不對(duì)稱性，表明本研究中發(fā)表偏倚較小（圖4）。

3討論

DNA甲基化是癌癥檢測的有力工具，目前已發(fā)表了大量致力于尋找與宮頸癌的檢測、進(jìn)展或預(yù)后相關(guān)的甲基化生物標(biāo)志物的研究[19]。不少研究顯示CADM1啟動(dòng)子高甲基化與宮頸癌有關(guān)，本研究通過診斷性Meta分析評(píng)估了CADM1在宮頸癌中的診斷性能。

本研究Meta分析結(jié)果提示，在宮頸癌中，CADM1甲基化的匯總的DOR為20.97，SROC的AUC為0.88。HSIL中，匯總的DOR為6.31，SROC的AUC為0.77。SROC是評(píng)估診斷準(zhǔn)確性的指標(biāo)，AUC>0.7被認(rèn)為是良好的風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測因子。DOR也是評(píng)估診斷準(zhǔn)確性的指標(biāo)[20]，DOR<1.0表明診斷的鑒別值較低，高的DOR值代表更好的診斷準(zhǔn)確性。本研究的AUC和DOR結(jié)果提示，CADM1甲基化用于宮頸癌/HSIL檢測具有良好的性能。本研究在CADM1高甲基化與HSIL風(fēng)險(xiǎn)之間關(guān)聯(lián)的分析中發(fā)現(xiàn)了顯著的異質(zhì)性。本研究的回歸分析結(jié)果提示，樣本類型的差異是異質(zhì)性存在的主要原因。各研究中使用的樣本為組織和宮頸脫落細(xì)胞，宮頸脫落細(xì)胞樣本受病變位置、采集方法等影響，腫瘤細(xì)胞的含量可能差別巨大，因而導(dǎo)致異質(zhì)性的結(jié)果。

本研究有一些局限性，首先，大多數(shù)納入研究使用MSP進(jìn)行檢測，研究使用的引物不同會(huì)導(dǎo)致潛在的發(fā)表偏倚;其次，納入的研究均采用病例對(duì)照設(shè)計(jì)可能導(dǎo)致選擇偏倚;再次，未發(fā)表的研究及其他語言的研究未包括在本研究中。

綜上所述，本Meta分析表明，CADM1甲基化在宮頸癌檢測中具有良好的診斷性能，可能被視為宮頸癌檢測的輔助生物標(biāo)志物，未來仍需前瞻性大樣本的臨床對(duì)照研究進(jìn)一步加以評(píng)估。

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（收稿日期：2019-03-15? 本文編輯：孟慶卿）