野生鹿科動(dòng)物染色體研究進(jìn)展報(bào)告

●孫麗敏 邢秀梅（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所 吉林 長(zhǎng)春 130112）

1 野生梅花鹿染色體研究進(jìn)展

梅花鹿東北亞種（拉丁學(xué)名為Cervus nippon dybowskii，下文均以CND予以表述）是國(guó)內(nèi)鹿科動(dòng)物中最廣為人知的一個(gè)品種，目前，對(duì)CND細(xì)胞核組成部分的研究遠(yuǎn)多于其他鹿科動(dòng)物。經(jīng)研究顯示，目前CND種群數(shù)量約為900 只，我國(guó)在1978年將CND列為一級(jí)保護(hù)動(dòng)物，所以對(duì)CND資源的保護(hù)迫在眉睫。通過(guò)大量的實(shí)踐研究，我國(guó)目前已培育出了新的梅花鹿品種，不過(guò)因?yàn)楹芏囵B(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)梅花鹿的育種與選種存在一定的片面性，所以在繁育新品時(shí)存在一定的盲目性，引入了很多品種之外的基因，進(jìn)而影響了品系的純度，且影響了整個(gè)鹿群的質(zhì)量[1]。

20 世紀(jì)70年代初期，我國(guó)就開(kāi)始著手梅花鹿細(xì)胞核組成部分的研究。近年我們研究了野生梅花鹿細(xì)胞核組成部分的G、C染帶，經(jīng)對(duì)9 只CND482個(gè)細(xì)胞的分析，確認(rèn)CND細(xì)胞核組成部分?jǐn)?shù)量為2n=66；在此基礎(chǔ)上經(jīng)C染帶對(duì)細(xì)胞核組成部分異染色質(zhì)的分布進(jìn)行了研究。經(jīng)對(duì)9 只CND的186 個(gè)帶有銀染核仁組成區(qū)進(jìn)行Ag-NORS染色法分析，結(jié)果表明，有95%的細(xì)胞有4 條細(xì)胞核組成部分出現(xiàn)Ag-NORS[2]。通過(guò)此次研究可認(rèn)為，東北野生馬鹿與CND是鹿屬中兩個(gè)不同的物種，因?yàn)闁|北野生馬鹿細(xì)胞核組成部分?jǐn)?shù)目通常為68 條，而CND細(xì)胞核組成部分?jǐn)?shù)目通常為66 條。而東北野生馬鹿和CND雜交，結(jié)果顯示，不論正交亦或反交，F(xiàn)1 代都具有較強(qiáng)的可育性，這和驢馬雜交造成子代無(wú)繁育力的情況為負(fù)相關(guān)性。不過(guò)經(jīng)對(duì)CND與東北馬鹿種間雜交F1代能育性的細(xì)胞核組成部分細(xì)胞遺傳學(xué)基礎(chǔ)的研究顯示，東北野生馬鹿與CND的細(xì)胞核組成部分具有一定的同源性，差異僅涉及一個(gè)羅伯遜易位，睪丸組織切片顯示F1 代生殖腺生長(zhǎng)發(fā)育無(wú)異常，由此可證，東北野生馬鹿與CND間隔離機(jī)制不完善，進(jìn)而東北野生馬鹿與CND均屬一個(gè)孟德?tīng)柸后w[3]。

通過(guò)限制酶Hae3 與Hind3 對(duì)CND中期細(xì)胞核組成部分予以顯帶研究，結(jié)果顯示二者可使CND中期細(xì)胞核組成部分顯示出G樣帶與C樣帶，由此可證，CND12 對(duì)細(xì)胞核組成部分與兩條性細(xì)胞核組成部分結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)在上述酶處理過(guò)程中具有顯著的異質(zhì)性[4]。在此基礎(chǔ)上對(duì)CND的C帶與高分辨G帶予以分析，可繪制出CND高分辨G帶模式圖，結(jié)果表明，在亞種水平上，CND具有C帶多態(tài)性。近年來(lái)我們對(duì)CND的R帶予以綜合性研究，得到了CND的R分帶帶型，CND單套細(xì)胞核組成部分共顯帶400條；而一些學(xué)者對(duì)CND的N帶進(jìn)行了分析，細(xì)胞核組成部分主要在著絲點(diǎn)區(qū)域顯帶，5、13、16、26、32 號(hào)常細(xì)胞核組成部分的著絲粒區(qū)域出現(xiàn)Ag-NORS、陽(yáng)性帶，X細(xì)胞核組成部分臂出現(xiàn)深染區(qū)，Y細(xì)胞核組成部分整體深染，證明CND具有N帶多態(tài)性。

2 其他鹿科動(dòng)物的細(xì)胞核組成部分研究

我們對(duì)鹿科各種核型及C、G帶帶型，對(duì)鹿科各屬、種的核型以及帶型予以對(duì)比分析，對(duì)其細(xì)胞核組成部分進(jìn)化有了一定的認(rèn)知。在研究中對(duì)4 只雄性中亞馬鹿實(shí)施了細(xì)胞核組成部分組型分析及C、G帶研究，結(jié)果表明，細(xì)胞核組成部分?jǐn)?shù)目有多態(tài)現(xiàn)象(2n=66,67)[5]。

經(jīng)對(duì)毛冠鹿的細(xì)胞核組成部分組型進(jìn)行研究，結(jié)果顯示毛冠鹿中存在細(xì)胞核組成部分?jǐn)?shù)的多態(tài)現(xiàn)象，因?yàn)槠浼?xì)胞核組成部分總臂數(shù)均為52 定值，所以由此推算，其多態(tài)性是因?yàn)榱_伯遜易位所致。經(jīng)大量鹿科動(dòng)物細(xì)胞核組成部分的研究，我們發(fā)現(xiàn)，鹿科動(dòng)物細(xì)胞核組成部分進(jìn)化2n數(shù)均呈現(xiàn)出從少至多的規(guī)律，亞科間細(xì)胞核組成部分差異主要體現(xiàn)于X細(xì)胞核組成部分，鹿亞科的細(xì)胞核組成部分差異除了空齒鹿亞科外主要由羅伯遜斷裂所造成。

近年來(lái)我國(guó)其他學(xué)者對(duì)梅花鹿、水鹿與其雜交F1 代細(xì)胞核組成部分組型進(jìn)行對(duì)比，在雄性F1 代核型中發(fā)現(xiàn)了不配對(duì)的細(xì)胞核組成部分；中科院動(dòng)物研究所的相關(guān)學(xué)者們研究了赤麂云南亞種的細(xì)胞核組成部分核型，進(jìn)一步明確了其細(xì)胞核組成部分?jǐn)?shù)目為2n=32[6]。

3 總結(jié)

綜上所述，梅花鹿東北亞種是國(guó)內(nèi)鹿科動(dòng)物中最廣為人知的一個(gè)品種，目前，對(duì)CND細(xì)胞核組成部分的研究遠(yuǎn)多于其他鹿科動(dòng)物。經(jīng)研究顯示，目前CND種群數(shù)量急劇減少，所以對(duì)CND資源的保護(hù)迫在眉睫。我們對(duì)鹿科各種的核型及C、G帶帶型，對(duì)鹿科各屬、種的核型以及帶型予以對(duì)比分析，對(duì)其細(xì)胞核組成部分進(jìn)化有了一定的認(rèn)知。CND12 對(duì)細(xì)胞核組成部分與兩條性細(xì)胞核組成部分結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)在上述酶處理過(guò)程中具有顯著的異質(zhì)性。在此基礎(chǔ)上對(duì)CND的C帶與高分辨G帶予以分析，可繪制出CND高分辨G帶模式圖，結(jié)果表明，在亞種水平上，CND具有C帶多態(tài)性。近年來(lái)我們對(duì)CND的R帶予以綜合性研究，得到了CND的R分帶帶型，CND單套細(xì)胞核組成部分共顯帶400 條。東北野生馬鹿和CND雜交，結(jié)果顯示，不論正交亦或反交，F(xiàn)1 代都具有較強(qiáng)的可育性，且東北野生馬鹿與CND間隔離機(jī)制不完善，進(jìn)而東北野生馬鹿與CND同屬一個(gè)孟德?tīng)柸后w。細(xì)胞核組成部分由脫氧核糖核酸及蛋白質(zhì)構(gòu)成，熒光原位雜交技術(shù)的發(fā)展使得細(xì)胞遺傳學(xué)與分子遺傳學(xué)有機(jī)的結(jié)合在一起，進(jìn)而使細(xì)胞核組成部分研究在基因定位、細(xì)胞遺傳學(xué)圖構(gòu)建等領(lǐng)域起到積極的作用，同時(shí)對(duì)野生鹿科動(dòng)物染色體的研究具有現(xiàn)實(shí)意義。