淺析獸醫實驗室檢測能力比對

鄭教雀

（寧德市動物疫病預防控制中心,福建 寧德 352100）

獸醫實驗室作為獸醫工作的基礎，是動物疫病防控機構的根基，承擔著動物疫病診斷、檢測、動物免疫狀況監測等工作，為動物疫病防控部門提供技術保障，因此加強獸醫實驗室建設非常重要。獸醫實驗室檢測能力比對工作在加強獸醫實驗室建設中有著重要作用，它不僅能加強獸醫實驗室質量控制、提高實驗室檢測能力，同時還能提高專業技術人員的業務水平，進而提高實驗室的綜合能力。

目前，我國獸醫系統實驗室采用的比對方案多為：將若干個已知結果或數值（真實值）的樣品作為盲樣分發給各實驗室；之后收集各實驗室的比對試驗結果，與真實值比較；通過結果符合數量與比對總數，計算出符合率；最后以符合率評價各參與比對實驗室的檢測能力。此次我中心組織的比對試驗所采用的比對方案與以往相比有所不同，本文將此次比對的其中一個項目做如下分析，以供同行參考。

1 比對范圍及項目

本次實驗室檢測能力比對試驗共8個縣級獸醫實驗室參與；檢測項目為豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體（PRRSX3 Ab）檢測ELISA試驗。

2 材料與方法

2.1 儀器與耗材

試驗所需要的儀器及設備由參與比對的實驗室各自準備，耗材（含緩沖液）由組織方統一準備。

2.2 試劑

豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測試劑盒（PRRS X3 Ab）由北京愛德士元亨生物科技有限公司提供。

2.3 樣品

2.3.1 制備。樣品由北京愛德士元亨生物科技有限公司制備、分裝、編號。做到各盲樣的血清量相同、保證可進行重復性檢測，盲樣外觀顏色無明顯差異，并標定各樣品的參考值。為保證比對的科學性，組織方對比對樣品再次統一編號后，作為盲樣發放使用。

2.3.2 保存與發放。在比對試驗開始前，盲樣由組織方密閉、低溫保存。待各參比實驗室人員、儀器設備到位后，統一發放。

2.4 試驗方法

比對試驗所采用的方法為依據《豬繁殖與呼吸綜合診斷方法》（GB/T 18090-2008），并參照試劑盒使用說明書進行。8份盲樣具體布局，按下表進行。

表1 口蹄疫O型抗體ELISA比對試驗布局表

依據上表，要求各參比實驗室，對提供的8份盲樣進行3次重復試驗，設置內部質控品4份，同時設立陰、陽性對照各2份；具體試驗方法按照試劑盒使用說明書操作。完成試驗后，立即出具、提交正式檢測報告。

2.5 評判（分）標準

2.5.1 試驗結果

雄安“新”區，“新”在創新。它著眼于培養高新技術產業，發展前沿科技，打造京津冀協同化創新發展平臺。首先，新取得建設規劃吸引了一批來自北京的高校、科研機構以及醫療機構等創新引擎，有利于雄安新區多元化科技城的打造。其次，雄安新區致力于發展包括如3D打印、機器人、芯片、高端裝備、生物、新材料、新能源、航空、航天、交通、電子等在內的新興產業，打造新的經濟增長極。除此之外，雄安新區的建設也體現著可持續發展的新思維，其通過加強資源節約與環境保護，來促進區域的持續發展。雄安新區的創新不只局限于科技產業，它在教育、政府職能、機制體制方面的創新也在推動著京津冀地區的進一步發展[4]。

2.5.1.1 樣品檢測值。查看盲樣豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測值是否在給定的參考值區間內，落在參考值區間內，判為結果準確并得分；檢測值落在參考值區間外，則判為結果存在較大偏差，不得分。

2.5.1.2 樣本重復性。根據3次重復試驗檢測值，計算出變異系數，查看變異系數的大小。如果變異系數≤10%，則判定為樣本重復性好，得分；如果變異系數＞10%，則判定為樣本重復性較差，不得分。

2.5.1.3 內部質控品。查看4個質控樣品檢測值是否滿足限定區間。如果滿足限定區間，得分；否則不得分。

2.5.1.4 陰陽性對照。陰陽性對照OD值在確保試驗成立后，再驗證其是否滿足參考標準要求。如果滿足要求，得分；否則不得分。

2.5.2 檢測報告。查看各參比實驗室所出具的正式檢測報告。報告中每出現1個錯誤，扣除一定分數。比對試驗具體分數評定標準，詳見下表。

表2 口蹄疫O型抗體ELISA比對試驗評分標準

3 結果分析

3.1 總體結果

參與此次比對的8個獸醫實驗室都能在規定時間內完成檢測并提交正式報告。根據比對結果評判（分）標準，7個實驗室的所有OD值在區間范圍內，正確率為87.5%；6個實驗室的所有變異系數（CV%）都小于10%，比例為75%。這說明大部分獸醫實驗室具備相應的檢測能力，且技術操作穩定、重復性好、水平較高。

3.2 具體結果

8個實驗室共檢測樣品192份·次，獲得192個OD值，其中189個OD值處于給定的參考區間范圍內，合格率達98.4%；樣本重復性試驗，共計獲得64個變異系數（CV%），其中61個CV%值小于10%，重復性良好率達95.3%；陽性對照均合格。此外，3個實驗室的4個質控樣品檢測值不在限定區間內、3個實驗室的3個陰性對照未達參考標準。

3.3 檢測報告

收到檢測報告8份，每份報告均存在或大或小的問題。主要問題有：簽、蓋章不夠規范，報告內容存在對應英文翻譯錯誤，診斷試劑未寫明具體廠家，未實行2級簽字等。

具體得分結果詳見表3。

表3 口蹄疫O型抗體ELISA比對試驗得分統計表

4 討論

血清學檢測是目前基層獸醫系統實驗室的基本檢測手段，本次比對的豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測項目采用了ELISA檢測方法，能客觀的反應基層獸醫實驗室的技術水平；且此次比對試驗采用統一的試劑、樣品及標準，并現場立即收回檢測結果，加以統計分析，更能真實地反映出各實驗室的檢測能力水平。

試驗結果顯示，7個實驗室的合格率為100%，1個實驗室的合格率為87.5%，說明該市獸醫實驗室檢測人員的實際操作技能較強，整體檢測能力較高。但通過此次比對試驗的評比，也發現了各實驗室存在的一些問題。

4.1 未嚴格按照規程操作。D實驗室在收到樣品后，未及時對樣品進行編號登記，使得在后續試驗過程中將樣品弄混，是導致其出現檢測不合格的主要原因。

4.2 檢測報告不規范。各實驗室出具的檢測報告，存在格式不規范，內容存在瑕疵，表述不準確、審核程序不夠健全等問題。

4.3 實驗記錄不規范。個別實驗室檢測報告所附的原始實驗記錄信息不完整，存在未使用正規試驗表格，試驗記錄涂改、未實行二級簽字等情況。

5 小結

檢測能力比對工作具有極其重要的意義，因為檢測能力不僅是動物防控部門建設的基礎、更是獸醫實驗室生存之基，而且出具的檢測報告是作為政府相關部門制定政策、執行決策的依據。各動物疫病預防控制機構要不斷提高檢測人員的技術水平，使得實驗室檢測更加科學、準確、規范，為重大動物疫病防控和食品衛生安全提供有力的技術支持。