CK10和CK19在脂溢性角化病和基底細(xì)胞癌中的表達(dá)和作用

孫業(yè)曉, 申志華, 張艷峰, 繆希紅, 段慶華

(河北省承德市中心醫(yī)院, 河北 承德 067000)

脂溢性角化病(seborrheic keratosis,SK)是皮膚科常見病,屬于良性皮膚腫瘤,一般好發(fā)于暴露部位,患者老年人居多,罕見發(fā)生轉(zhuǎn)移,預(yù)后良好[1]。基底細(xì)胞癌(basal cell carcinoma,BCC)是一種惡性皮膚腫瘤,也是老年患者常見的皮膚腫瘤,較少發(fā)生轉(zhuǎn)移[2]。在臨床工作中,我們發(fā)現(xiàn)SK和BBC經(jīng)常難以鑒別診斷,最可能造成誤診的是不典型的SK與色素性BBC,兩者表現(xiàn)較易混淆[3]。我們在SK和BBC中檢測CK10和CK19,觀察他們的表達(dá)情況,有助于掌握SK和BBC在細(xì)胞分化行為方面的差異,這對兩種疾病的診斷、治療、預(yù)后意義重大。

1 資料與方法

1.1一般資料:隨機(jī)選取承德市中心醫(yī)院皮膚科2016年1月到2020年12月經(jīng)手術(shù)切除的脂溢性角化病(SK)和基底細(xì)胞癌(BCC)各40例。病例資料完整并經(jīng)兩名主治以上病理醫(yī)師閱片,明確病理診斷,納入實(shí)驗(yàn)。SK患者年齡分布在51～79歲,平均(70.5±6.74)歲；男13例,女27例；BCC患者年齡分布在43～76歲,平均(62.5±5.03)歲；男15例,女25例。

1.2方法:采用標(biāo)準(zhǔn)免疫組化技術(shù),不同抗體按說明書指導(dǎo)操作。立空白對照,保證實(shí)驗(yàn)的科學(xué)性,空白一抗以PBS緩沖液替代,選取組織中的正常皮膚為內(nèi)對照。自福州邁新生物有限公司購買實(shí)驗(yàn)試劑。

1.3結(jié)果判定:CK10陽性：細(xì)胞質(zhì)呈棕褐色或黃色為陽性；CK19陽性：細(xì)胞質(zhì)呈棕褐色或黃色為陽性。由兩名病理醫(yī)師雙盲閱片,以細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)黃色或黃褐色顆粒視為免疫組織化學(xué)染色陽性。評分標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)：①染色強(qiáng)度：無色為0分,淡黃色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分；②陽性細(xì)胞數(shù)比率：無細(xì)胞陽性著色為0分；1%～25%的細(xì)胞陽性著色為1分；26%～50%的細(xì)胞陽性著色為2分；51%～75%的細(xì)胞陽性著色為3分；大于75%的細(xì)胞陽性著色為4分；最終評分結(jié)果為染色強(qiáng)度和染色細(xì)胞所占比率的評分乘積；<3分為低表達(dá),用“-”表示；≥3分為高表達(dá),用“+”表示。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:統(tǒng)計(jì)軟件選用SPSS26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件,統(tǒng)計(jì)分析方法采用χ2檢驗(yàn),以P<0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1正常表皮CK10在上層陽性表達(dá):SK標(biāo)本中,CK10表達(dá)于瘤體部位,陽性表達(dá)率為39/40(97.5%),陰性表達(dá)率為1/40(2.5%)；在BCC標(biāo)本中,瘤體幾乎不表達(dá)CK10,其中35/40(87.5%)陰性表達(dá),僅有5/40(12.5%)弱陽性表達(dá)。二者對比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=58.384,P<0.01),見表1。結(jié)果見圖1。

性角化病中表達(dá)；⑥CK10在基底細(xì)胞癌中表達(dá)(SP×100)

2.2正常表皮中CK19在上皮基底部陽性表達(dá):在BCC標(biāo)本中,CK19表達(dá)于瘤體部位,有38/40(95%)陽性表達(dá),僅有少數(shù)陰性2/40(5%)表達(dá)；在SK標(biāo)本中,CK19很少表達(dá)于瘤體,陽性表達(dá)率僅為3/40(7.5%),陰性表達(dá)率為37/40(92.5%)。二者對比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=61.288,P<0.01),見表2。

3 討 論

在上皮中,其主要的骨架蛋白成分是角蛋白,間葉組織缺少角蛋白的表達(dá)。角蛋白參與上皮細(xì)胞的各種生物學(xué)過程,包括上皮細(xì)胞的分裂、移動、分化、凋亡等過程[4]。已知的角蛋白共有幾十種,在上皮分化的過程中,角蛋白的表達(dá)具有差異性,不同的分化階段表達(dá)不同的角蛋白,只有角蛋白正確表達(dá)才能保證表皮的正常分化,保證皮膚功能正常。不同皮膚腫瘤,角蛋白的種類和含量也不同,早期的上皮來源惡性腫瘤和轉(zhuǎn)移癌,能通過標(biāo)記角蛋白來鑒別診斷,間葉組織不表達(dá)角蛋白,而上皮組織表達(dá),這種價(jià)值應(yīng)用在臨床早期診斷中[5]。

Aslan等研究了角蛋白的表達(dá),在表皮腫瘤中,發(fā)現(xiàn)CK10主要表達(dá)于鱗狀上皮及角化的上皮,而不在鱗狀上皮的基底細(xì)胞表達(dá)[6]。我們通過對SK和BCC中的CK10及CK19蛋白的檢測,發(fā)現(xiàn)SK標(biāo)本中,CK10表達(dá)明顯高于在BBC中的表達(dá),在BCC標(biāo)本中,瘤體幾乎不表達(dá)CK10,這說明SK的分化方向是鱗狀上皮及角化的上皮不會演變?yōu)锽BC。分子量44kD的角蛋白CK19,最早被發(fā)現(xiàn)于毛囊隆突部表達(dá),不斷地實(shí)驗(yàn)探索又發(fā)現(xiàn)在隆突外根鞘外層及外根鞘近隆突處CK19也有表達(dá)。多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)證明,表皮干細(xì)胞存在于表皮基底細(xì)胞、毛囊外隆突部、汗腺導(dǎo)管部等生發(fā)部,而這些部位中CK19高度表達(dá),表皮的干細(xì)胞在不斷增殖分化的階段,CK19有重要作用[7],而在組織細(xì)胞分化成熟的過程中CK19表達(dá)下降[8]。我們的研究發(fā)現(xiàn),在BCC標(biāo)本中,CK19表達(dá)于瘤體部位,在SK標(biāo)本中,CK19僅表達(dá)于表皮基底部,很少表達(dá)于瘤體。這又進(jìn)一步證明,相對于SK,BCC增殖能力更強(qiáng)、這種無限制的增殖能力也是惡性腫瘤的一個生物學(xué)特點(diǎn)。

總之,本研究通過對CK10,CK19在SK和BCC中表達(dá)的研究,我們進(jìn)一步證明了SK和BCC的分化方向不同；SK是良性病變,分化成熟,預(yù)后良好；BCC分化較低,不向鱗狀細(xì)胞分化,與SK相比較,BCC侵襲性強(qiáng),是惡性腫瘤。我們通過免疫組化的研究,更深刻理解了兩種疾病的不同,這對兩種疾病的細(xì)胞生物學(xué)行為的表達(dá)指明了原理,在臨床診斷及鑒別診斷過程中具有重要參考作用,也為兩種疾病的治療提供思路,有助于疾病預(yù)后的判斷。