適配體在毒品毒物分析中的實踐探索

摘要：所謂適配體，主要是指通過體外合成，可以與蛋白質、其他小分子物質等配體進行特異結合單鏈DNA和RNA，主要是通過SELEX篩選技術來獲得的。就適配體本身的優(yōu)勢特征而言，具有針對靶標的高特異性以及親和性、化學穩(wěn)定、不存在免疫原性以及毒副作用。本文基于適配體，探討如何將其應用于毒品毒物分析中，以供參考。

關鍵詞：適配體;毒品毒物分析;實踐探索

通過適配體自身存在的優(yōu)勢，充分利用其特點為生物識別分子，將其使用在傳感器和分析試紙中，能夠在最快時間內檢測出存在的毒品毒物，有利于提升相關工作人員的辦案效率，為國家、社會的穩(wěn)定發(fā)展提供一定的技術支持。下文對此進行簡單分析。

1 概述SELEX篩選技術原理

整個篩選過程是由隨機選擇的單鏈寡核苷酸庫來開始的，在篩選DNA適配體過程中，單鏈寡核苷酸庫可直接應用在SELEX篩選過程中的第一步，將DNA庫或RNA庫結合其中的靶分子，然后進行沖洗工作，使其出現(xiàn)的結合復合物，與結合較弱或沒有結合的寡核氨酸處于分離狀態(tài)，隨之，洗掉原來與靶分子結合的寡核苷酸，在利用PCR或RTPCR進行有效擴增，將通過體外進行轉錄或者是單鏈DNA與純化合成RNA實施純化提煉，將其制造成雙鏈DNA，隨著形成一個嶄新的寡核苷酸庫，利用擴增和篩選的循環(huán)，隨機狀態(tài)下存在的寡核苷酸庫也隨之變得很少，以此同時針對靶分子具有較高的特異性和親和性，一般情況下，進行篩選適配體的階段中需要SELEX循環(huán)的次數(shù)約為6-20次。

2 分析毒品毒物中存在的適配體實踐探索

自上世紀八十年代以來，全球毒品讀物犯罪活動逐漸增多，因此關于毒品檢測方面的問題需要加快進行。

其一，通過將原本能夠在體外合成的SSDNA轉為附在瓊脂糖凝膠顆粒上，其次對這種附在瓊脂糖凝膠顆粒上的SSDNA與其相融的DNA分子實行固相與表面分離，并通過熒光檢測方法進行檢測，篩選效率結果高達62.1%，并且針對甲胺磷核酸能夠得到5條適配體。

其二，蛤蚌毒素（STX）核酸適體在篩選的過程中，需要經過至少十次以上的篩選過程，其中第四輪第十輪的篩選方式利用JeffamineKLH進行反篩，最終得到擁有特異識別性質的蛤蚌毒素（STX）核酸適體。經過對其中一條隨意選取的適體實行SPR檢測，其檢測結果顯示結合率優(yōu)良，不存在交叉反應情況[1]。

其三，于1997年Anniron報道在RNA適體進行檢測過程中，其中檢測結果顯示多巴胺測出為2.8umol/L。

其四，陸鑫蔚等其他人，通過對SELEX篩選技術的使用，能有篩選出來具有特異性識別甲基苯丙胺的適配體，然后根據(jù)適配體為基礎，將生物識別分子充分運用到有關試劑盒中或者是傳染器等方式，以上幾種方式具有體型小、攜帶方便的優(yōu)勢特征，能夠有效應用于案發(fā)現(xiàn)場中，以便于刑事案件相關工作人員開展檢測工作能夠更加快速有效。

其五，建立電化學傳感器平臺，這個平臺主要用于可卡因的檢測。若靶分子處于存在狀態(tài)下，適配體就有很大可能折疊成結合位點，這時候氧化還原探針與電極表面兩者之間距離縮小，電子傳遞也因此得到相應的改變，而且還加大了能夠實行檢測的亞甲基藍還原峰。

其六，使可卡因和與其相類似的愛康寧二者之間實行分離。如果樣品種含有可卡因適配體，將形成復合物，能夠促使其中處于游離狀態(tài)的可卡因數(shù)量降低，同時在毛細管中，復合物與處于游離狀態(tài)下的可卡因會呈現(xiàn)分離的狀態(tài)，這種情況下可卡因本身峰將會底下，此外，適配體不會與愛康寧產生反應，這時候峰將不會發(fā)生變化，由此能夠得出，當可卡因峰降低時，能夠實現(xiàn)進一步的八項識別，同時能夠確保定量檢測的準確性，而此時，檢測限為2umol/L。

其七，通過試紙樣平臺對可卡因進行相關監(jiān)測，這種平臺具有一定的測流技術，充分利用可卡因適配體以及上訴已經闡述的腺苷用來制造新型的試紙，使用可卡因檢驗檢測的方法將人體血清進行樣本檢測，對試紙進行改進，形成能夠快速檢測試劑盒，應用于犯罪現(xiàn)場，另外適配體與靶標兩者之間存在較高的特異性以及親和性特征，能夠促使適配體在面對識別分子時，進行有效、靈敏以及快速性的毒品讀物檢測[2]。

其八，除以上幾點之外，初步將可識別氯胺酮的適配體進行有效篩選，同時還對其中存在的親和性以及特異性等進行表現(xiàn)，進一步顯示出該適配體與美沙芬、美沙酮之間將不存在交叉反應的現(xiàn)象，所以該適配體能夠起到識別分子的作用，可以制成試劑盒，這樣做可對現(xiàn)場進行最快時間檢測，與此同時也在很大程度上提升檢測準確度。

3 對適配體在毒品毒物分析領域的展望

其一，根據(jù)識別小分子中存在特異性這一形態(tài)而言，篩選毒品毒物中存在的核酸適配體，SELEX篩選開始于單鏈寡核苷酸庫中含有單鏈核苷酸的數(shù)量約為1015個至1016個，而且組成單鏈寡核苷酸的序列是隨機合成，若隨機出現(xiàn)偏離情況，就會使得整個序列空間出現(xiàn)歪曲情況，因此也就對能否與靶分子高特異性進行結合的適配體捕獲有一定的限制性，通過以上足以說明寡核苷酸庫在其中重要性。

其二，在進行毒品毒物快速檢測方式研發(fā)過程中，利用適配體作為生物識別分子引入其中。從整體上來講，能夠在犯罪現(xiàn)場最快時間、最準確檢測其中存在的毒品毒物，有利于提升相關人員的辦案工作成效。而適配體對靶分子而言，其中具有很高的特異性、親和性以及能夠有效超過抗體的使用性特征，以上幾種特征促使適配體可應用于傳感器以及分析試紙中。

4 總結

綜上所述，本文首先概述SELEX篩選技術原理，分析適配體在毒品毒物中的實踐，最后提出對對適配體在毒品毒物分析領域的展望，旨在針對毒品毒物分析提出更好的適配體檢測，為我國社會發(fā)展、國家穩(wěn)定貢獻一份力量。

參考文獻：

[1]曾玲，蔡能斌，PAWLOWSKANatalia，等.核酸適配體識別技術在法醫(yī)毒物分析中的應用[J].刑事技術，2017，42（1）：5260.

[2]王宇田，曲晗，郝良玉，等.基于核酸適配體SERS技術快速檢測大腸埃希菌O157：H7的研究[J].中國病原生物學雜志，2018（1）：1621.

作者簡介：曹錚（1988），男，漢族，陜西子洲人，工學學士學位，工程師，研究方向：毒品檢驗。