龔 廷 薛佩彤 張 振
(湖北醫藥學院附屬襄陽市第一人民醫院麻醉科, 襄陽 441100)
在醫學、生物學試驗研究中,大鼠已是國際通用的標準化實驗動物。對大鼠進行呼吸機控制呼吸或者行呼吸功能監測等實驗中,大鼠氣管插管的成功與否是實驗成敗的關鍵。目前常用的插管方法有:頸部切口鋼絲引導插管法[1-2]、經口明視插管法[3]、盲插法、內窺鏡輔助插管法[4-5]、頸部切口插管法[6]和經頸部透照氣管插管法[7]等,但其中一部分是有創性操作,增加了對氣管及咽喉部周圍組織的損傷,影響插管的速度及可重復性,甚至如操作不當會造成動物死亡,進而影響整個實驗的進展。而盲插法的成功率低,反復插管易損傷氣道及其周邊黏膜,容易造成喉痙攣水腫、出血和分泌物增多阻塞氣管導致窒息等并發癥。因此無創而又快捷的插管方法為大家所推崇。多年來諸多學者對大鼠氣管內插管的方法和插管器械做了大量的研究和改進,但由于大鼠呼吸頻率較快、口腔空間狹小、聲門位置較高,插管時聲門暴露困難,加之大小鼠專用的氣管插管內窺鏡裝置,價格昂貴,不適于教學實驗。我們在反復實踐中,對直視插管方法進行了多方面的摸索研究,通過改造,自創小器械,取得滿意的效果,并采用經頸透照和經口可視喉鏡兩種直視氣管插管方法,為大鼠進行插管操作。對兩種方法的安全性和有效性進行了比較。
雄性SD大鼠40只,體質量280~350 g,由軍事醫學科學院實驗動物中心提供,實驗動物生產許可證號:[SCXK-(軍)2012-0004)],實驗在天津武警后勤學院附屬醫院武警救援所動物實驗室內進行。根據隨機對照原則,將大鼠分為經口可視喉鏡組和經頸透照直視組兩組。
異氟醚揮發罐(HARVARD APPARATUS)、雙頭冷光源(北京眾實迪創科技發展有限責任公司ZS 310)、小動物人工呼吸機(北京眾實迪創科技發展有限責任公司DW3000-B)、干凈紗布、自制可視喉鏡、開口器、靜脈留置針、小棉簽、玻片一個。
1.2.1自制可視喉鏡:購置家庭應用發光挖耳勺(light earpick)[執行標準:Q/YXY 001-2010],選擇其中較小的透明耳勺勺頭,將其中間部分在酒精燈上烤熱塑形,使其前端成30度角,整個形狀成弧形(如圖1、2、3)。前端處理光滑,以防刮傷大鼠口腔內黏膜組織。

圖1 家用挖耳勺勺頭(light earpick)Fig.1 Household ear spoon scoop

圖2 自制可視喉鏡鏡片Fig.2 Homemade video laryngoscope lens

圖3 自制可視喉鏡成品Fig.3 Homemade video laryngoscope

圖4 自制開口器Fig.4 Homemade opener
1.2.2氣管導管:采用16~18G 靜脈留置針,針頭鈍化,套管比針頭略長0.3 cm,彎曲約15 度。根據大鼠體質量選擇合適的靜脈留置針[8]。
異氟醚揮發罐進氣口接壓縮氧氣管道,出氣口連接三通, 一端接15 cm×15 cm×40 cm有機玻璃動物麻醉箱, 另一端接自制大鼠麻醉面罩。將大鼠置于麻醉箱中,打開氧氣,調節流量為0.6~1.2 L/min, 異氟醚吸入濃度為2%~3%, 待大鼠的意識消失,鉗夾腳掌無反射后, 取動物仰臥位, 固定于動物手術臺面上。用自制環形面罩扣住大鼠面部(鼻子), 吸入異氟醚維持麻醉,待氣管插管結束連接呼吸機控制呼吸。
固定大鼠,用橡皮筋固定大鼠上門齒,將雙頭冷光源靠近大鼠下頜部,術者左手持平鑷將鼠舌向左外上方拉出口腔。右手持自制開口器[8](如圖4),暴露聲門,光源透過大鼠頸部皮膚和肌層,能夠看到大鼠的聲門隨著呼吸開啟與閉合。此時術者左手捏住開口器,保持喉部暴露狀態,右手持插管,彎曲端朝上,從開口器中進入,趁聲門打開瞬間迅速將氣管插管插入氣道,退出針芯,將留置針套管留在氣道內。將玻片放置于管口,如插管是在氣道中,則有水蒸氣凝結,隨后連接呼吸機控制呼吸;若無則判定插入不成功,應立即拔管,吸氧,稍后重新插管。
固定大鼠,方法同上,術者左手持平鑷將鼠舌向左外上方拉出口腔,右手持自制可視喉鏡,彎曲端朝上,沿舌面緩緩進入,當進入達舌根部時,輕輕上挑喉鏡,可見薄而粉嫩的會厭,其下方便可見隨呼吸一張一合的聲門。趁聲門打開瞬間迅速將氣管插管插入氣道,退出針芯,將留置針套管留在氣道內。將玻片放置于管口,如插管是在氣道中,則有水蒸氣凝結,隨后連接呼吸機控制呼吸;若無則判定插入不成功,應立即拔管,吸氧,稍后重新插管。
分別用秒表計時,記錄兩組插管時間(從大鼠麻醉固定好,準備插管開始到確定插管成功所需時間,以秒為單位)、插管次數、一次插管成功率。
兩組氣管插管時間、插管次數及一次插管成功率的比較,經口可視喉鏡組的插管操作時間、插管次數、一次插管成功率均優于經頸透照組(P<0.05),見表1。

表1 氣管插管時間、插管次數及一次成功率的比較Table 1 Comparison of the time, frequency of intubation and the success rate of the first
注: 與經頸透照組比較,*P<0.05
Note:Compared with the transilluminated group,*P<0.05
在臨床麻醉過程中, 良好的全麻誘導是氣管插管的必要條件,亦可減少插管的并發癥[9]。嚙齒類動物與人類相比,吸入麻醉藥的劑量個體差異較小, 其中大鼠最小肺泡濃度(minimum alveolar concentration,MAC)與人類的MAC 之比為100∶67[10],本實驗中,采用異氟醚全憑誘導,足夠的麻醉深度有利于插管時避免喉痙攣的發生, 同時便于觀察大鼠的聲門運動而方便插管。在氣管插管遇到困難時,大鼠亦可快速蘇醒。而靜脈麻醉時,個體差異較大,往往導致麻醉深度不易控制, 從而導致麻醉過淺、長時間未能進入麻醉狀態, 或者麻醉過深而蘇醒延遲甚至死亡。本試驗中對比使用了兩種無創直視氣管插管的方法,兩種方法都可順利完成氣管插管。
采用參考文獻[8]自制的開口器,經頸透照插管存在以下問題:
1)自制開口器標準不一,不同的制作往往存在細小的差別,從而導致使用過程中達不到文獻中使用效果。
2)開口器的管徑太小對插管操作有一定限制。
3)經頸透照,畢竟是間接照射,光線較暗,觀察氣道口存在偏差。
4)光源要求較高,需要冷光源且聚光,普通動物手術燈透照效果較差。
而采用筆者自制可視喉鏡操作更簡單,并且避開了經頸透照組所存在的問題。依據臨床使用的可視喉鏡原理,可在直視下觀察到會厭,可清晰觀察到氣管口的位置,在掌握好大鼠呼吸節奏,插管成功率很高,且操作時間更短,顯著降低氣管插管后的死亡率,是進行大鼠氣管插管的好方法,而且材料易得,價格低廉,改造方便,使用簡單,特別適用于動物實驗教學。
氣管插管是麻醉的基本操作之一,亦是大多數動物實驗的關鍵步驟。氣管插管一直遵循減少對實驗動物的損傷和插管中的應激反應,縮短氣管插管的時間,提高氣管插管的成功率的原則。隨著科技不斷發展,多年來大鼠氣管插方法不斷改進,各種氣管插管工具有效降低了大鼠氣管插管的難度,使氣管插管變得越來越方便快捷,從而提高了動物實驗的質量,降低了實驗成本。與此同時,方便快捷的工具的產生,仍需要操作者熟練的應用和實踐,在使用中不斷改善,從而真正提高氣管插管的質量。