開心散合安神湯對慢性不可預(yù)知應(yīng)激刺激抑郁模型大鼠行為學(xué)及海馬5-羥色胺的影響

郭盼盼

（河南省南陽市中心醫(yī)院中藥科，河南 南陽 473000）

抑郁癥屬中醫(yī)“郁證” 范疇［1］。研究發(fā)現(xiàn)，開心散可改善慢性應(yīng)激抑郁大鼠的抑郁行為、調(diào)節(jié)中樞單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的表達［2］、含藥血清對Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)細胞損傷有修復(fù)作用［3］等。本研究用慢性不可預(yù)知應(yīng)激刺激建立大鼠抑郁模型，探討開心散合安神湯對抑郁大鼠的治療作用及其機制。

1 材料與方法

實驗材料：開心散合安神湯（人參7.5g，蓮肉12g，蓮須3g，麥冬6g，遠志6g，芡實6g，甘草3g，茯苓135g，石菖蒲67.5g，購自張仲景大藥房）按方劑組成的10倍，稱取飲片，加水浸泡1 h，水煎2 次，取濾汁，合并藥液，濃縮至含生藥1 g/mL，4℃冰箱冷藏備用。鹽酸氟西汀（禮來蘇州制藥有限公司）。

模型制備［4］： 采用慢性不可預(yù)知刺激，刺激種類包括晝夜顛倒、4℃冷水游泳、45℃熱水游泳、水平震蕩、鼠籠傾斜45°飼養(yǎng)24h、夾尾、禁食、禁水、禁食禁水、束縛、濕墊料等12種刺激，每天兩種無規(guī)律刺激，連續(xù)刺激28天。

動物分組及處理：（180±20）g雄性SD大鼠60只，購自河南省實驗動物中心。隨機抽出15只為正常組，剩余45只給予慢性不可預(yù)知刺激造模，并隨機分為模型組、陽性組、合方組。造模同時給予藥物，陽性組給予鹽酸氟西汀2.5g/kg，合方組給予以原生藥12g/kg。連續(xù)灌胃給藥28天，正常組和模型組每天灌胃生理鹽水。

2 觀測指標

體質(zhì)量：實驗開始前稱量大鼠體質(zhì)量，28天實驗結(jié)束時稱量大鼠體質(zhì)量并記錄。

糖水消耗量： 給藥28天進行糖水消耗，禁食禁水20h，每個鼠籠上方兩個給水瓶，1瓶純水，1瓶1%的糖水，測量2h后每只鼠的飲水量（純水、1%糖水），計算糖水消耗量。糖水消耗量=1%糖水消耗量/（純水消耗量+1%糖水消耗量）×100%。

曠場實驗：于實驗前、給藥28天進行曠場實驗。曠場箱地面有等大的25個方格。每只大鼠放置于中央格內(nèi)，四爪進入同一方格內(nèi)計水平運動1次，兩前肢離地計垂直運動1次。記錄4min內(nèi)大鼠的水平運動次數(shù)和垂直運動次數(shù)。

海馬5-HT測定：實驗結(jié)束，每組大鼠采用斷頭處死的方法，處死并取腦內(nèi)海馬組織，所有操作在冰上進行，采用ELISA法檢測海馬5-HT，Bio-Rad 680型酶標儀檢測酶標板各孔光密度（OD）值，計算5-HT含量。

統(tǒng)計處理：用SPSS18.0軟件進行單因素方差分析（One-Way ANOVA）統(tǒng)計處理，如若方差齊采用ANOVA/LSD方法，如若方差不齊則采用Dunnett' s T3方法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié) 果

各組大鼠體質(zhì)量及糖水消耗率見表1。

表1 各組大鼠體質(zhì)量及糖水消耗率比較 （±s）

表1 各組大鼠體質(zhì)量及糖水消耗率比較 （±s）

注：與正常組比較，*P＜0.05；與模型組比較，△表示P＜0.05。

組別 體重（g） 糖水消耗率（%）例 實驗前 28d 實驗前 28d正常組 15 191.36±6.18 328.66±7.39 75.33±1.64 78.32±2.45模型組 15 190.29±5.87 271.72±7.11* 74.61±1.53 53.67±4.46*陽性組 15 188.96±5.56 307.21±6.95*△ 75.75±2.02 72.04±5.42*△合方組 15 189.77±6.43 295.18±6.37*△ 73.11±1.96 65.14±5.35*△

各組大鼠行為見表2。

表2 各組大鼠行為比較 （±s）

表2 各組大鼠行為比較 （±s）

注：與正常組比較，*P＜0.05；與模型組比較，△P＜0.05。

組別 水平運動次數(shù)（次） 垂直運動次數(shù)（次）例 實驗前 28d 實驗前 28d正常組 15 79.86±5.85 81.24±6.74 30.64±4.24 31.63±5.13模型組 15 81.36±6.71 50.52±5.37* 31.08±4.65 10.64±2.63*△陽性組 15 80.86±7.56 76.43±4.41*△ 30.73±3.43 24.35±4.26*△合方組 15 81.44±7.32 66.22±6.63*△ 29.97±4.86 17.57±4.35*△

各組大鼠5-HT比較見表3

表3 各組大鼠5-HT比較 （mg/mL，±s）

表3 各組大鼠5-HT比較 （mg/mL，±s）

注：與正常組比較，*P＜0.05；與模型組比較，△P＜0.05。

組別 例 5-HT正常組 15 5.32±0.68模型組 15 4.16±0.43*陽性組 15 5.02±0.62△合方組 15 4.87±0.59△

4 討 論

海馬內(nèi)5-HT的水平與抑郁癥密切相關(guān)，有研究表明抑郁癥患者的5-HT水平顯著低于正常人群［5］。5-HT是一種重要的神經(jīng)遞質(zhì)，具有中樞神經(jīng)調(diào)節(jié)作用，參與睡眠、體溫等多種生理功能的調(diào)節(jié)，其含量、功能異常可能與抑郁癥、帕金森等多種疾病的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)［5-6］。

開心散合安神湯可顯著提高大鼠體質(zhì)量及糖水消耗量，使抑郁程度得到緩解。合方組還可使大鼠穿越格子數(shù)及直立次數(shù)顯著性增加，海馬5-羥色胺水平顯著提高，說明開心散合安神湯即可改善抑郁大鼠的自發(fā)活動能力，又能提高海馬5-羥色胺的水平，從而降低其抑郁程度。