復(fù)方牛磺酸滴眼液抗眼疲勞實(shí)驗(yàn)研究

由 東 ，劉馨湄 ，才 鳳

（1.遼寧省藥品認(rèn)證中心，遼寧 沈陽 110036； 2.遼寧省中醫(yī)藥研究院，遼寧 沈陽 110034；3.遼寧省食品檢驗(yàn)檢測(cè)院，遼寧 沈陽 110015）

眼疲勞會(huì)引起眼干、眼澀、眼酸脹、視物模糊，甚至視力下降。維生素與眼疾的發(fā)生及視力的好壞關(guān)系密切，用眼過多者，需要更多的維生素及礦物質(zhì)，合理補(bǔ)充眼睛所需營養(yǎng)素，對(duì)于保護(hù)眼睛、防治眼疾、提高視力非常重要。牛磺酸是一種特殊的高滲透性氨基酸類物質(zhì)，對(duì)視網(wǎng)膜損傷和視細(xì)胞凋亡有明顯的保護(hù)作用[1－3]。復(fù)方牛磺酸滴眼液主要由牛磺酸、鹽酸萘甲唑林、維生素B6、馬來酸氯苯那敏、透明質(zhì)酸鈉和氯化鈉組成，用于防治眼疲勞及過敏等。本研究中主要考察了復(fù)方牛磺酸滴眼液對(duì)紫外線輻射所致家兔瞼結(jié)膜、球結(jié)膜和角膜炎性損傷的防護(hù)作用，以及對(duì)家兔眼分泌物和眼睫狀肌張力的影響。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、儀器與試藥

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康成年家兔30只，普通級(jí)，日本大耳白種，體質(zhì)量為 2.1～2.7 kg，雌雄兼用，由中國醫(yī)科大學(xué)第二臨床學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)為SCXK（遼）2003－0013。所有家兔均自由采食和攝水。本研究嚴(yán)格符合眼科與視覺研究中使用動(dòng)物的科學(xué)聲明。

儀器：紫外燈，功率為30 W，波長為254 nm，由沈陽市東陵燈具廠生產(chǎn)。

試藥：復(fù)方牛磺酸滴眼液，規(guī)格為每支10 mL，其成分為牛磺酸、鹽酸萘甲唑林、維生素B6、馬來酸氯苯那敏，含量分別為2%，1%，0.5%（以牛磺酸含量計(jì)），遼寧省藥物研究院提供，批號(hào)為20050513；空白溶劑為透明質(zhì)酸鈉和氯化鈉；萘敏維滴眼液，規(guī)格為每支10 mL，其成分為鹽酸萘甲唑林、馬來酸氯苯那敏、維生素B12，含量為0.02%（以鹽酸萘甲唑林計(jì)），山東博士倫福瑞達(dá)制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)為20040302。

1.2 方法

1.2.1 分組

將家兔按體質(zhì)量隨機(jī)分為5組，各6只，即空白對(duì)照組（等容量溶劑，A組），萘敏維滴眼液組（0.02%，B組），復(fù)方牛磺酸滴眼液大劑量組（2.0%，C1組）、中劑量組（1.0% ，C2組）、小劑量組（0.5% ，C3組）。

1.2.2 模型建立與試驗(yàn)

兔眼紫外線輻射損傷模型[4－5]：取兔夾固定家兔，將波長為254 nm的紫外燈置兔眼前40 cm進(jìn)行照射，照射強(qiáng)度為 5 000 μW ／cm2。第 1天上午照射 3 h，下午照射1 h，第2天、第 3天上午照射 2 h，下午照射2 h，3 d共照射12 h。末次照射后次日，開始滴眼藥，連續(xù)給藥 6 d。每天滴眼藥 4次，每次 1只眼 1滴（0.05 mL），間隔2 h。自然光下，肉眼觀察紫外燈照射前及照射后第3，6天瞼結(jié)膜、球結(jié)膜和角膜的受損程度，以及眼分泌物。用分級(jí)計(jì)分法觀察與統(tǒng)計(jì)結(jié)膜、角膜等輻射損傷程度，損傷評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)[6]。

家兔眼睫狀肌張力模型[7－9]：隨機(jī)取健康家兔，摘取眼球，置K－H營養(yǎng)液中，除去晶狀體和玻璃體，于鞏膜和睫狀肌間剝離，游離睫狀肌，肌韌帶與鞏膜相連。將睫狀肌連同鞏膜縱向剪成約4 mm寬的肌條，剪斷距離睫狀肌正端約3 mm處鞏膜，去掉多余的鞏膜。將2條睫狀肌條用絲線串連，上下兩端串線，下固定于盛有K－H營養(yǎng)液的麥?zhǔn)显」艿撞浚线B于換能器杠桿上，加負(fù)荷100 mg，恒溫30℃，通氧氣，用記錄儀記錄睫狀肌收縮活動(dòng)，溫育約1 h，待肌張力穩(wěn)定后，麥?zhǔn)显」苤蟹?9 mL K－H營養(yǎng)液，加空白溶劑(A組)、0.02%萘敏維滴眼液(B組)或2%復(fù)方牛磺酸滴眼液(C組)1 mL，終濃度即為原眼液被稀釋20倍的濃度，觀察睫狀肌在藥物作用下的張力。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 對(duì)兔眼紫外線輻射損傷的防護(hù)作用

家兔眼經(jīng)紫外線輻射后，瞼結(jié)膜和球結(jié)膜均呈現(xiàn)充血、水腫等炎性反應(yīng)，炎性反應(yīng)隨輻射劑量的增加而加重，復(fù)方牛磺酸滴眼液呈現(xiàn)顯著的保護(hù)作用（P＜0.05）；眼角膜受長時(shí)間紫外線輻射后，出現(xiàn)散在渾濁或半透明區(qū)，給藥各組眼角膜的損傷明顯減輕（P＜0.01）；經(jīng)紫外線輻射后，從外觀所見兔眼分泌物增加，與空白對(duì)照組相比，眼分泌物均明顯少于給藥各組。詳見表1。

表1 對(duì)家兔眼紫外線輻射損傷的保護(hù)作用試驗(yàn)結(jié)果（s，分，n＝6）

表1 對(duì)家兔眼紫外線輻射損傷的保護(hù)作用試驗(yàn)結(jié)果（s，分，n＝6）

注：與空白對(duì)照組比較， P ＜0.01， P ＜0.05。

組別 給藥劑量（%） 瞼結(jié)膜損傷程度 球結(jié)膜損傷程度A組B組C1組C2組C3組－0.02 2.0 1.0 0.5給藥前2.40 ± 0.52 2.40 ± 0.52 2.30 ± 0.48 2.30 ± 0.67 2.27 ± 0.65 3 d 2.30 ± 0.48 1.30 ± 0.48 1.10 ± 0.57 2.00 ± 0.67 1.80 ± 0.79 6 d 1.80 ± 0.42 0.80 ± 0.63 0.30 ± 0.48 1.10 ± 0.88 1.30 ± 0.82給藥前2.25 ± 0.45 2.30 ± 0.67 2.40 ± 0.52 2.40 ± 0.69 2.30 ± 0.48 3 d 2.20 ± 0.47 1.30 ± 0.82 1.20 ± 0.63 1.50 ± 0.53 1.90 ± 0.57 6 d 1.70 ± 0.48 0.90 ± 0.74 0.20 ± 0.42 0.60 ± 0.69 1.30 ± 0.67組別 給藥劑量（%）A組B組C1組C2組C3組眼角膜損傷程度 眼分泌物變化－0.02 2.0 1.0 0.5給藥前2.50 ± 0.53 2.40 ± 0.52 2.40 ± 0.52 2.40 ± 0.69 2.60 ± 0.52 3 d 2.20 ± 0.42 1.20 ± 0.63 1.00 ± 0.67 1.40 ± 0.69 1.60 ± 0.52 6 d 1.72 ± 0.48 0.52 ± 0.53 0.40 ± 0.52 0.70 ± 0.48 0.90 ± 0.57給藥前2.50 ± 0.53 2.60 ± 0.52 2.40 ± 0.69 2.50 ± 0.53 2.40 ± 0.69 3 d 2.20 ± 0.63 1.60 ± 0.52 1.30 ± 0.67 1.80 ± 0.63 1.90 ± 0.57 6 d 1.60 ± 0.52 0.60 ± 0.52 0.40 ± 0.52 0.70 ± 0.48 1.10 ± 0.74

2.2 對(duì)家兔眼睫狀肌張力的影響

給予復(fù)方牛磺酸滴眼液后，睫狀肌張力逐漸降低，5 min最大下降(3.62±0.61)mm，詳見表 2。

表2 對(duì)家兔眼睫狀肌張力的影響試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

目前，眼科常用消炎藥為皮質(zhì)激素類或非甾體激素類滴眼劑，前者副作用較大，長期應(yīng)用可導(dǎo)致白內(nèi)障、青光眼等嚴(yán)重并發(fā)癥[10]，后者雖無嚴(yán)重副作用，但有一定的刺激性[11]。馬來酸氯苯那敏為H1受體拮抗劑，對(duì)由組織胺引起的滲出、水腫有較強(qiáng)的抑制作用，廣泛用于過敏及其他炎癥的治療[12]。本研究中將副作用極小的復(fù)方牛磺酸滴眼液應(yīng)用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，觀察其消炎作用和對(duì)眼睫狀肌張力的影響，驗(yàn)證其是否具有抗眼疲勞作用。

根據(jù)視疲勞的臨床癥狀和電光性眼炎動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)報(bào)道[13－15]，用家兔經(jīng)過多次試驗(yàn)確定紫外線輻射的劑量、時(shí)間和距離，建立視疲勞動(dòng)物模型。結(jié)果表明，復(fù)方牛磺酸滴眼液能顯著防護(hù)兔眼瞼結(jié)膜、球結(jié)膜和角膜的炎性損傷，拮抗紫外線輻射所致眼分泌物增多的作用較強(qiáng)，并成一定的量效關(guān)系，具有明顯的降低兔眼睫狀肌張力作用。

綜上所述，復(fù)方牛磺酸滴眼液具有明顯的抗眼疲勞作用，為治療眼疲勞的適應(yīng)證提供了實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。