復方中藥組分對鏈脲菌素糖尿病大鼠心肌過氧化的影響

黃 波，楊 鑫，劉永林，馮 瑤，吳曉嵐，謝 劍，張 何，宋光熠，劉文艷

（遼寧醫藥職業學院，沈陽 110101）

心臟是糖尿病常累及的臟器之一[1]，其發生發展是多種因素綜合作用所致，病因的復雜性使其缺乏有效的治療藥物。目前中藥及其有效組分對糖尿病及其并發癥的防治作用越來越受到關注，本實驗研究旨在證實復方中藥組分防治糖尿病及糖尿病心臟病的有效性以及探討其作用機制。

1 材料與方法

1.1 材料 8周齡SPF級SD種系大鼠（適應性飼養一周），體重190～210 g、繁育鼠全價固體顆粒飼料，均由遼寧省長生生物技術有限公司提供（實驗動物許可證為遼寧省科學技術廳簽發，許可證號：SCXK（遼）2010-0010）。鏈脲菌素（Streptozotocin）是Adamas Reagent CO.Ltd產品（貨號：CFHF-33231A；批號：644548120509；規格：25 g；95+）。黃芪、麥冬、三七皂苷等中藥多糖由北京普惠天悅生物技術有限公司提供。SOD、CAT、MDA等測定試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。酶標儀（型號318C）為上海三科儀器有限公司產品。分光光度計（型號SPECORD plus200）為德國耶拿分析儀器股份公司產品。

1.2 方法 應用pH值為5.0、濃度為0.01 mol/L檸檬酸緩沖液配制濃度為12.2 mg/mL的鏈脲菌素，然后以55 mg/Kg體重的標準對大鼠進行一次性腹腔注射，1周后檢測其空腹血糖，取血糖水平超過16.0 mmol/L的大鼠為合格大鼠，繼續實驗，將其隨機分為模型組和中藥組分干預組，中藥組分干預組又分為2組（大劑量干預組、小劑量干預組），3組大鼠均為8只，雌雄各半。中藥干預組的大、小劑量組大鼠每天分別灌胃復方中藥組分500 mg/kg體重、50 mg/kg體重；模型對照組大鼠每天灌胃生理鹽水，3組灌胃量均為1 mL/100 g體重。另取大鼠8只（雌雄各半）作為正常對照組（空白對照組），應用0.01 mol/L檸檬酸緩沖液（pH 5.0）與注射鏈尿菌素同樣標準對該組每只大鼠一次性腹腔注射，且每天以另外三組同樣標準灌胃生理鹽水。各組大鼠連續給藥12周后斷頭采血檢測SOD、CAT、MDA；取心臟，10%組織勻漿后，3 000 r/min離心15 min，取上清液檢測SOD、CAT和MDA。指標檢測按照試劑盒說明書進行操作。

2 結果

2.1 心臟SOD、CAT、MDA的變化 連續給藥12周后鏈脲菌素糖尿病模型對照組心肌SOD、CAT含量明顯低于空白對照組，MDA活性明顯高于正常對照組；復方中藥組分大劑量組心肌SOD、CAT含量明顯高于糖尿病模型對照組，MDA活性明顯低于糖尿病模型對照組。小劑量僅對MDA有降低作用，對升高SOD和CAT活性無效。詳見表1。

2.2 血漿SOD、CAT、MDA的變化 連續給藥12周后各組大鼠血漿SOD、CAT、MDA的檢測結果表明，糖尿病模型對照組SOD和CAT明顯低于空白對照組、MDA明顯高于正常對照組，復方中藥組分治療組的大鼠SOD和CAT均高于糖尿病模型對照組、MDA低于糖尿病模型對照組。詳見表2。

表1 中藥組分對鏈脲菌素糖尿病心組織SOD、CAT、MDA的影響（± s ，n = 8）

表1 中藥組分對鏈脲菌素糖尿病心組織SOD、CAT、MDA的影響（± s ，n = 8）

注：與模型對照組比較，# P＜0.01，△ P＜0.05，▲ P＞0.05

組 別 SOD/（U/mgprot） CAT/（U/mgprot） MDA/（nmol/mgprot）空白對照組 827.1034±76.7913# 9.1470±0.9517△ 82.5464±10.8951#模型對照組 597.2921±59.0763 7.6690±0.9173 106.5263±8.0725大劑量組 711.8283±60.4303△ 11.5530±1.2178# 89.1625±8.9969#小劑量組 589.3618±58.4203▲ 7.7332±1.0373▲ 96.3440±8.9563△

表2 中藥組分對鏈脲菌素糖尿病大鼠血漿SOD、CAT、MDA的影響（± s ，n = 8）

表2 中藥組分對鏈脲菌素糖尿病大鼠血漿SOD、CAT、MDA的影響（± s ，n = 8）

注：與模型對照組比較，# P＜0.01，△ P＜0.05

組 別 SOD/（U/mL） CAT/（U/mL） MDA/（nmol/mL）空白對照組 174.6800±8.0981# 14.8213±1.3852# 9.2248±1.0678#模型對照組 151.1263±13.6340 8.2850±0.8591 11.3594±1.1637大劑量組 180.0088±15.3012# 9.5775±0.9209△ 9.9635±1.3636△小劑量組 173.3025±15.5913# 9.4675±0.9946△ 9.9032±1.0483△

3 討論

糖尿病患者，尤其是2型糖尿病患者的死亡因素中，有三分之二與冠心病和中風有關。而許多糖尿病患者被診斷糖尿病時就已經患有冠心病，因而糖尿病心臟病的早期防治尤為重要[2]。

自由基代謝異常是糖尿病心肌病發生的主要病因之一[3-6]，自由基可誘導膜發生脂質過氧化反應[7]，生成MDA。MDA是脂質發生過氧化反應的終產物，具有細胞毒性，它的產生能加劇膜的損傷，破壞組織細胞，引起組織病變[8-9]，MDA的含量可反映自由基的水平和膜脂過氧化的程度[10]。正常情況下體內的SOD、CAT等酶系統具有抗氧化反應[10]。SOD是氧自由基的天敵，可對抗與阻斷氧自由基引起細胞損害，且可及時修復受損傷的細胞[11-12]；CAT能催化H2O2分解成O2和H2O，阻止H2O2與O2反應生成非常有害的-OH，從而使細胞免于遭受H2O2的毒害[11,13]；糖尿病患者長期的高血糖狀態，可引起細胞代謝紊亂[14]，不僅自由基生成增多，且抗氧化酶不足以清除過量生成的自由基，過量生成過氧化物，破壞細胞膜磷脂，嚴重者可導致生物膜溶解和細胞死亡，從而引起心肌組織嚴重損傷[4,15-16]。其損傷程度可通過心肌組織SOD、CAT活性和MDA含量評定，SOD和CAT水平降低、MDA升高，提示脂質過氧化作用的增強及抗氧化酶的活性降低。所以，糖尿病大鼠自由基代謝異常對糖尿病心血管并發癥起到重要作用[4,17]。

本項實驗研究表明由黃芪、麥冬、三七皂苷等中藥多糖組成的復方制劑對鏈脲菌素糖尿病大鼠的心臟有保護作用，其作用機制與升高SOD、CAT水平、降低MDA，抑制脂質過氧化反應密切相關。其中大劑量作用較強，小劑量對心臟的保護作用很弱。