傳染性單核細胞增多癥外周血淋巴細胞亞群和免疫球蛋白變化特點分析

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(西安市兒童醫院感染二科，陜西 西安 710003)

EB病毒(Epstein-Barr virus，EBV)是屬于皰疹病毒科嗜淋巴細胞病毒群的一員，好發于兒童及青少年群體，且對所有人群均普遍易感，屬于終生攜帶型病毒。有文獻指出，我國超過8歲的人群中約90%其血清EBV均為陽性[1-2]。臨床上最常見的初次EBV感染多為傳染性單核細胞增多癥，多呈良性自限性，具有較好的臨床預后。但是，若患者長期處于免疫抑制、潛伏感染或遺傳缺陷的刺激下，EBV感染仍可出現淋巴瘤、慢性活動性EBV感染或EBV相關噬血細胞綜合征，其臨床預后較差。據相關研究顯示，EBV可顯著降低感染者的免疫功能，若是感染者本身免疫機制存在缺陷，感染EBV后病情則更容易惡化，具有較高的臨床病死率[3-4]。EBV可通過感染自然殺傷細胞、B淋巴細胞及T淋巴細胞導致機體的免疫機制出現紊亂，故不同感染宿主對EBV存在不一樣的應答反應，出現不同的臨床表現。本研究通過我院診治的40例感染EBV致傳染性單核細胞增多癥患兒作為研究組，并選取同期體檢健康兒童30例作為對照組分析兒童EBV感染致傳染性單核細胞增多癥外周血淋巴細胞亞群和免疫球蛋白變化特點。

1資料與方法

1.1一般資料

將西安市兒童醫院2017年1至12月收治的40例感染EBV致傳染性單核細胞增多癥患兒作為研究組，選取同期體檢健康兒童30例作為對照組。研究組中男21例，女19例；年齡為3～8歲，平均為(6.01±1.34)歲。對照組中男15例，女15例；年齡為3～9歲，平均為(6.25±1.40)歲。兩組的性別、年齡一般資料比較差異均無統計學意義(均P>0.05)，具有可比性。

1.2納入標準

研究組患兒符合《兒童主要非腫瘤性EB病毒感染相關疾病的診斷和治療原則建議》[5]中的臨床診斷及實驗室診斷標準。臨床癥狀診斷標準：①頸部淋巴結腫大；②肝脾腫大；③發熱；④咽部或扁桃體發炎；⑤眼瞼部水腫。實驗室診斷標準：①外周血清抗EBV衣殼抗原IgG抗體(Epstein-Barr virus-virocapsid antigen-IgG，EBV-VCA-IgG)滴度顯著增加超過4倍；②外周血清抗EBV-核抗原-IgG陰性，抗EBV-VCA-IgG及抗EBV-病毒衣殼抗原陽性；③外周血淋巴細胞計數升高超過5.0×109/L和(或)異性淋巴細胞分數超過0.10；④外周血清抗EBV-VCA-IgG陰性，然而EBV-VCA-IgG抗體陽性，同時表現為低親和力抗體。同時符合上述臨床癥狀診斷標準中的任意三項且實驗室診斷標準中的第三項即可診斷為感染EBV致傳染性單核細胞增多癥。對照組兒童均無家族遺傳性疾病、急慢性疾病及自身免疫性疾病。

1.3排除標準

①具有自身免疫性疾病或者免疫缺陷性疾病；②具有骨髓癌、淋巴癌等各種惡性腫瘤性疾病；③具有遺傳性疾病、先天畸形或先天生理缺陷；④精神異常，具有精神疾病或精神病史者。

1.4外周血淋巴細胞亞群及免疫球蛋白檢測方法

抽取兩組兒童早晨空腹靜脈血2mL，采用乙二胺四乙酸行抗凝處理后，通過流式細胞儀[由貝克曼庫爾特商貿(中國)有限公司提供]行外周血淋巴細胞、白細胞及淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞，自然殺傷細胞，B淋巴細胞)計數，并通過CXP 2.0系統行圖像分析。抽取兩組兒童早晨空腹靜脈血2mL，凝固后行離心處理，離心速度為3 400r/min，離心半徑為15cm，離心時間為10min，充分分離血清，通過免疫散射比濁法測量兩組兒童的IgA、IgG、IgM表達水平。本研究中所用的檢測試劑盒均由貝克曼庫爾特商貿(中國)有限公司提供。

1.5統計學方法

2結果

2.1兩組兒童免疫球蛋白表達水平的比較

統計結果顯示，研究組免疫球蛋白IgA、IgG水平均較對照組明顯升高(均P<0.01)；兩組IgM水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

2.2兩組兒童外周血血常規及淋巴細胞亞群計數的比較

統計結果顯示，研究組的淋巴細胞、CD3+、CD8+淋巴細胞及白細胞數量均較對照組顯著升高(均P<0.05)；研究組的B淋巴細胞數量顯著低于對照組(P<0.05)；兩組的CD4+和自然殺傷細胞數量比較差異均無統計學意義(均P>0.05)，見表2。

表2 兩組兒童外周血淋巴細胞亞群計數的比較結果

3討論

3.1感染EBV患兒對外周血血常規及淋巴細胞亞群計數的影響

本研究發現感染EBV致傳染性單核細胞增多癥患兒的淋巴細胞計數顯著增加，其中尤以T淋巴細胞最為明顯，而T淋巴細胞中以CD8+細胞的瘋狂增加最為明顯。本研究中研究組患兒CD8+細胞的計數是正常健康兒的12倍，與相關文獻[6-7]報道相一致。本研究同時發現感染EBV致傳染性單核細胞增多癥患兒的外周血中CD3+淋巴細胞與CD8+淋巴細胞同樣存在異常增加的現象。由此可見感染EBV致傳染性單核細胞增多癥患兒的機體會在短時間內發生強烈的T淋巴細胞反應，造成其機體內產生大量的T淋巴細胞，引起外周血的T淋巴細胞濃度升高。有研究指出，大部分感染EBV致傳染性單核細胞增多癥患兒會發生T淋巴細胞擴增活化，而CD8+淋巴細胞約占80%，CD8+淋巴細胞是一種具有強大的溶解能力的細胞，通過識別EBV感染的B淋巴細胞并將其溶解殺死，從而抑制EBV感染的B淋巴細胞的增殖分化；且由于此溶解過程分泌出大量的細胞因子將會造成頸部淋巴結腫大、肝脾腫大、發熱、咽部或扁桃體發炎、眼瞼部水腫等臨床癥狀[8-9]。目前臨床上普遍認為CD8+淋巴細胞作用機制是其大量增殖后分泌出大量的TRAIL、CD95-CD95L、穿孔素、腫瘤壞死因子及顆粒酶等方式溶解消滅EBV感染的B淋巴細胞，因此CD+19的B淋巴細胞于急性感染期內會顯著減少[10-11]。本研究發現，感染EBV致傳染性單核細胞增多癥患兒于急性發作期其自然殺傷細胞計數及CD4+淋巴細胞計數均無明顯差異，與相關文獻[12-13]相一致。目前臨床上尚未明確自然殺傷細胞計數及CD4+淋巴細胞計數的變化是否與患兒自身免疫系統、遺傳、病毒、環境等因素有關，有待進一步證實。

3.2感染EBV患兒對免疫球蛋白表達水平的影響

本研究發現研究組免疫球蛋白IgA、IgG均顯著高于對照組(均P<0.05)，可見感染EBV致傳染性單核細胞增多癥患兒的機體內存在劇烈的免疫應激反應。據相關研究顯示，EBV抗原長久隱藏于機體內是造成傳染性單核細胞增多癥最直接致病原因之一，由于EBV抗原可誘導機體分泌出特異性抗體，并結合呈EBV抗原-抗體復合物，同時EBV抗原可刺激免疫細胞的異常增殖，引發免疫瀑布連鎖反應，造成更嚴重的自身免疫系統損傷問題[14-15]。但是，關于自身免疫系統受損的問題是否直接由感染EBV引起目前臨床上尚未得到明確的認可，有待進一步證實。

綜上所述，CD8+淋巴細胞數量急劇增加可能是感染EBV致傳染性單核細胞增多癥患兒淋巴細胞急劇增加的重要因素，且患兒免疫球蛋白IgA、IgG急劇增加，因此通過檢測淋巴細胞亞群對診斷感染EBV致傳染性單核細胞增多癥具有一定意義。