不同肺炎患兒降鈣素原、超敏C反應蛋白及T細胞亞群變化的臨床意義

莊金寶，劉天明，劉彩紅，馬淑紅，王江元

(吉林大學第一醫院二部 檢驗科，吉林 長春130031)

呼吸道感染是兒科臨床最常見、最多發的疾病之一，是僅次于早產的導致5歲一下兒童死亡的第二位原因，發達國家以病毒為主要病原菌，發展中國家以細菌為主[1]。細菌、病毒、支原體、真菌和原蟲是引起兒童社區獲得性肺炎的常見病原菌[2,3]。兒童呼吸道感染在年齡越小的患兒中表現越嚴重，并發癥及死亡率均較高。本文旨在研究外周血超敏C反應蛋白(hs-CRP)、降鈣素原(PCT)、T淋巴細胞亞群，在不同類型肺炎患兒中的變化情況，指導臨床診斷和鑒別診斷患兒肺炎。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選擇2014年5月6日-2016年11月23日我院收治的肺炎患兒，其中細菌性肺炎32例、支原體肺炎25例、病毒性肺炎30例、健康對照38例。通過病史、體格檢查、X線攝片和實驗室檢查，均符合小兒肺炎診斷標準[4]的住院患兒，且無心、肝、 腎等重要臟器疾患及其他基礎疾病。細菌性肺炎組，男15例、女17例，平均年齡(5.9±3.8)，均經痰或咽拭子細菌培養證實；支原體性肺炎組，男12例、女13例，平均年齡(6.1±2.8)，肺炎支原體IgM抗體均為陽性；病毒性肺炎組，男13例、女17例，平均年齡(4.9±4.2)；健康對照組，男18例、女20例，平均年齡(5.2±3.5)。各組之間性別、年齡統計學差異(P均>0.05)。

1.2 方法

1.2.1樣本采集 采集肺炎患兒和健康對照兒童2 ml EDTA-K2抗凝靜脈血用于流式細胞儀檢測；含分離膠試管分離血清用于檢測hs-CRP、PCT。肺炎患兒均于接受治療前采血。

1.2.2hs-CRP檢測 采用免疫散射比濁法，由BN II(型號，國家)全自動蛋白分析儀進行檢測，試劑購自西門子醫學診斷產品有限公司。

1.2.3PCT檢測 采用化學發光法，于Smart Line分析儀上進行，試劑為Thermo的降鈣素原檢測試劑盒，>5 mg/L為陽性。

1.2.4流式細胞儀檢測

采用FACSCalibur全自動流式細胞分析儀，定量檢測外周血T淋巴細胞亞群。向管中加入混勻的全血50 μl，之后加入CD4+CD8+CD3聯合抗體5 μl，充分渦旋混勻后，避光靜止15 min。再向管中加入2 ml的1×溶血素，避光放置7 min。向管中加入2 ml的PBS緩沖液，渦旋混勻后離心(300 g，5 min)后，倒去上清液，將管底剩余液體渦旋混勻后，在加入2 ml PBS緩沖液，再次離心(300 g，5 min)。倒去上清液，將管底剩余液體渦旋混勻，加入0.5 ml PBS緩沖液，即可上機檢測。T淋巴細胞CD4+CD8+CD3單克隆抗體購自BD公司。

1.3 統計學分析

采用SPSS19.0軟件進行統計分析，計量資料以均數±標準差(x—±s) 表示，多組間比較采用方差分析，兩組比較采用t檢驗； 計數資料采用χ2檢驗；P<0.05為有統計學差異。

2 結果

2.1 三組肺炎于健康兒童hs-CRP的比較

與健康對照組比較，細菌性肺炎組、支原體性肺炎組患兒hs-CRP水平均較高，且有統計學差異(分別t為13.99，8.13；P均<0.05)。細菌性肺炎組與支原體性肺炎組、病毒性肺炎組與健康對照組比較，hs-CRP水平無統計學差異(分別t為1.77，0.50；P均>0.05)，見表1。

2.2 三組肺炎于健康兒童T細胞亞群的比較

細菌性肺炎組、支原體性肺炎組、病毒性肺炎組患兒CD3+、 CD3+CD4+T淋巴細胞水平均低于對照兒童，差異均有統計學意義 (分別t為6.12、4.86，6.33、5.44，5.72、5.26；P均<0.05)； 三組肺炎患兒之間的差異則均無統計學意義(P均>0.05)。

表1 各組hs-CRP水平比較(x—±s)

注：與正常對照組比較aP<0.05，bP>0.05；與細菌性肺炎組比較cP<0.05，dP>0.05

細菌性肺炎組、支原體性肺炎組患兒CD3+CD8+T淋巴細胞水平均低于對照兒童，差異均有統計學意義 (分別t為5.64，5.51；P均<0.05)； 細菌性肺炎組與支原體性肺炎組、病毒性肺炎組與健康對照組比較，CD3+CD8+水平無統計學差異(分別t為0.05，1.12；P均>0.05)。

細菌性肺炎組、支原體性肺炎組、病毒性肺炎組患兒的CD4+/CD8+均低于對照兒童，差異均有統計學意義(分別t為7.03，6.30，6.69；P均<0.05)； 三組肺炎患兒之間的差異無統計學意義 (P>0.05)，見表1。

2.3 三組肺炎于健康兒童PCT的比較

細菌性肺炎組PCT水平高于支原體性肺炎組、病毒性肺炎組和健康對照組，差異有統計學意義(分別t為16.68、18.45、21.27；P均<0.05)。而支原體性肺炎組、病毒性肺炎組與健康對照組比較PCT水平無顯著統計學差異(P均>0.05)。細菌性肺炎組PCT陽性率高于其他兩組肺炎患兒和正常組，差異有統計學意義(分別χ2為32.25、40.51、55.42；P均<0.05)，見表2。

表2 各組PCT水平比較

注：與細菌性肺炎組相比eP<0.05。

3 討論

C反應蛋白是由肝臟合成的一種全身性炎癥反應急性期的非特異性標志物，提高檢測精度所測的CRP，稱為超敏CRP[5]。在炎癥反應階段4-6 h內，hs-CRP水平迅速升高，其升高幅度與細菌感染的嚴重程度相關，感染越重，hs-CRP升高幅度越大，但在非細菌性感染時，hs-CRP的升高并不明顯[6]，已逐漸成為診斷、鑒別診斷細菌感染的可靠指標。本研究中，細菌性肺炎和支原體性肺炎hs-CRP均較正常兒童升高明顯，病毒性肺炎與正常兒童hs-CRP無明顯差異，表明hs-CRP高效、靈敏，為早期診斷細菌性和非細菌性兒童肺炎提供了非常重要的依據[7]。而細菌性PCT水平、PCT陽性率明顯高于支原體性肺炎、病毒性肺炎和正常兒童，可見PCT可鑒別診斷細菌性肺炎和支原體性肺炎。其機制為，PCT由甲狀腺濾泡旁細胞分泌，細菌及其毒素是促進PCT升高的主要物質，在細菌感染，尤其是全身性感染時PCT會逐漸升高[5,8]。

T淋巴細胞來源于骨髓的多能干細胞，在胸腺激素的誘導下分化成熟，成為具有免疫活性的T細胞，它既是機體的免疫反應的效應細胞，又是免疫調節細胞。目前，評價細胞免疫功能的常用方法是T淋巴細胞亞群檢測[9]。外周成熟的T臨床細胞均表達CD3，再分為CD4+和CD8+亞群[10]。CD4+T細胞是輔助誘導性T細胞亞群(Th細胞)，其減少說明B細胞產生免疫球蛋白減少，細胞免疫功能下降；CD8+T細胞是抑制性細胞亞群，其數量增多，表示免疫受到抑制。CD4+/CD8+是人體內環境穩定的最重要指標，比值降低，則提示細胞免疫受抑制。當致病因子侵入人體后，會導致正常免疫平衡失調，T淋巴細胞大量凋亡，數量減少，CD4+/CD8+比例失衡，導致機體免疫功能紊亂[11]。

本研究中，三組肺炎患兒CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+水平均明顯低于健康對照兒童；細菌性、支原體性肺炎組患兒CD3+CD8+T淋巴細胞水平均顯著高于對照兒童，表明兒童肺炎存在一定程度的免疫失調，有研究發現免疫佐劑聯合常規治療可有效治療兒童反復的呼吸道感染[12]。

綜上所述，hs-CRP、PCT為早期診斷、鑒別診斷細菌性肺炎、支原體性肺炎和病毒性肺炎有較高的臨床價值；且兒童肺炎存在一定程度的免疫功能失調，臨床應將恢復免疫功能和常規抗感染治療相結合，為臨床治療兒童肺炎提供新思路。