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智能手機顯微鏡用于中藥飲片真偽鑒別研究*

2018-11-20 07:42:36黃成祿
中國藥業 2018年22期
關鍵詞:植物

黃成祿

(四川省成都市青白江區中醫醫院藥劑科,四川 成都 610300)

中藥飲片是中藥產業的基石,其質量是中醫藥生存發展的基本條件。近年來,中藥飲片用量不斷增加,質量也出現了諸多問題[1]。因其種類繁多,來源復雜,市場商品混雜,真偽鑒定難度較大。目前,中藥飲片主要從來源、性狀、顯微、理化4個方面鑒別,其中顯微和理化鑒定對專業人員要求高,且需要昂貴的檢驗設備[2],開展及推廣有難度。本研究中選擇了9組真偽中藥飲片為樣本,利用智能手機照相機和手機顯微鏡對其區別進行了研究,以便為中藥飲片的鑒別提供更多鑒定依據。

1 材料與方法

1.1 藥品

選擇青葙子與莧菜子、覆盆子與山莓、西洋參片與人參片、大黃片與土大黃片、烏藥片與偽品、王不留行與蕓苔子、當歸片與歐當歸片、蒼術片與關蒼術片、金錢白花蛇與赤鏈蛇9組中藥飲片,所選正品中藥飲片均購自四川國強中藥飲片廠,偽品由該廠中藥標本館提供。

1.2 方法

肉眼觀察中藥飲片的性狀特征,再用智能手機照相機連接卡蘭德手機顯微鏡,放大400倍,掃描,保存其真偽中藥飲片的半顯微圖片,再對比觀察并鑒別。

2 結果

2.1 青葙子與莧菜子

來源及性狀:青葙子為莧科植物青葙 Celosia argentea L.的干燥成熟種子;呈扁圓形,少數呈圓腎形,直徑1.0~1.8 mm;表面黑色或紅黑色,光亮,中間微隆起,側邊微凹處有種臍,種子易粘手,種皮薄而脆;氣無,味淡;以粒飽滿、色黑、光亮者為佳[3]。莧菜子為同科植物莧菜 Amaranthus mangostanus L[A.inamoenus Willd.]的干燥種子,呈近圓形或倒卵形,兩面凸,紅棕色或黑棕色,光澤不明顯,狹端凹陷[4]。兩者均為同科植物的種子,大小、顏色相近,種子細小,由于性狀特征十分相似,肉眼無法鑒別。

半顯微鑒別:青葙子側邊凹,中間有一突出種臍,形如“W”(見圖 1 A);而莧菜子狹端處有微凹形如“V”(見圖 1 B)。

圖1 青葙子與莧菜子的半顯微圖

2.2 覆盆子與山莓

來源及性狀:覆盆子為薔薇科懸鉤子屬植物華東覆盆子 Rubus chingii Hu的干燥果實;呈圓錐形或扁圓錐形,高 0.6 ~1.3 cm,直徑 0.5 ~1.2 cm;表面黃綠色或淡棕色,頂端鈍圓,基部中心凹入;宿萼棕褐色,下有果梗痕;小果易剝落,每個小果呈半月形,背面密被灰白色茸毛,腹部有突起的棱線;體輕,質硬;氣微,味微酸澀[5]。山莓為同科植物山莓 Rubus corchorifolius L.F.的干燥果實,為聚合果,呈長圓錐形或半球形,高 0.5~1.0 cm,直徑 0.3~0.7 cm,表面密被灰白色茸毛,基部扁平或中心微凹[6]。兩者為同科植物,性狀特征多有相似,肉眼難以準確判定。

半顯微鑒別:覆盆子的小果呈半月形,頂端密被灰白色茸毛,兩側有明顯的突起網紋(見圖2 A);山莓成圓錐形,稍彎曲,頂端同樣密被灰白色茸毛,但兩側無突起的網紋(見圖2 B)。

圖2 覆盆子與山莓的半顯微圖

2.3 西洋參片與人參片

來源及性狀:西洋參為五加科植物西洋參 Panax quinquefolium L.的干燥根;呈長圓形或類圓形薄片,外表皮為淺黃褐色;切面淡黃白色至黃白色,皮部有黃棕色點狀樹脂道,近形成層環處較多而明顯,木部略呈放射狀紋理;氣微而特異,味微苦、甘[7]。人參為五加科植物人參 Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根;人參片呈圓形或類圓形薄片,外表皮灰黃色,切面淡黃色或類白色,略顯粉性,形成層環紋棕黃色,皮部有黃棕色的點狀樹脂道及放射性裂隙;體輕,質脆;香氣特異,味微苦、甘。兩者為同科植物,性狀特征十分相近。

半顯微鑒別:西洋參片斷面木部類白色有許多黃色塊狀物,皮部有許多片狀深黃棕色的塊狀物(見圖3 A及圖3 B);人參片斷面木部類白色有少量淺黃色點狀物,皮部有少量黃色小塊狀物(見圖3 C及圖3 D)。西洋參片的黃棕色塊狀物比人參片明顯得多,大,且色更深。

圖3 西洋參與人參的半顯微圖

2.4 大黃片與土大黃片

來源及性狀:大黃為墓科植物掌葉大黃 Rheum palmatum L.,唐 古 特 大 黃 Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.或藥用大黃 Rheumoffcinale Bail.的干燥根和根莖,本次采用的是藥用大黃的根;大黃片呈不規則類圓形厚片或塊,大小不等;外表皮為黃棕色或棕褐色,有縱皺紋及疙瘩狀隆起;切面黃棕色至淡紅棕色,較平坦,有明顯散在或排列成環的星點,有空隙[8]。土大黃為蓼科酸模屬植物土大黃 Rumex madaio Makino[R.daiwoo Makino]的干燥根和根莖;土大黃片為同科植物藏邊大黃的干燥根及根莖,表面為黃棕色,質堅體輕,橫斷面紅棕色放射狀紋理,氣特異,味苦[9]。兩者為同科植物加工成的飲片,性狀特征相似。目前大多將大黃加工成厚片小塊狀,更增加了鑒定難度。

半顯微鑒別:大黃片斷面為許多深褐色和黃色相間的紋理(見圖4 A),而土大黃片則是類白色與淺黃色相間的紋理(見圖4 B)。

圖4 大黃與土大黃的半顯微圖

2.5 烏藥片與偽品

來源及性狀:烏藥為樟科植物烏藥 Lindera aggregata(Sims)Kosterm.的干燥塊根。烏藥片性狀為呈類圓形的薄片;外表皮為黃棕色或黃褐色;切面為黃白色或淡黃棕色,射線放射狀,可見年輪環紋;質脆;氣香,味微苦、辛,有清涼感[10]。偽品為同一植物的非膨大部分的直根加工切片,兩者性狀十分相似。

半顯微鑒別:烏藥片斷面有許多淺黃色塊狀物與類白色相間形成的紋理(見圖5 A),而偽品直根片只有類白色偶有不明顯淺黃色點狀物形成的紋理(見圖5 B)。

圖5 烏藥與烏藥直根的半顯微圖

2.6 王不留行與蕓苔子

來源及性狀:王不留行為石竹科植物麥藍菜 Vaccaria segetalis(Neck.)Garcke 的干燥成熟種子;呈球形,直徑約2 mm;表面為黑色,少數為紅棕色,略有光澤;有細密顆粒狀突起,各側有一凹陷縱溝;質硬;胚乳白色,胚彎曲成環;子葉 2;無臭,味微澀苦[11]。蕓苔子為十字花科蕓苔屬植物油菜 Brassica campestris L.的種子;呈類球形,直徑1~2 cm;表面為褐色或黑色,有細微網狀紋理[12]。兩者之間大小、顏色相近,形狀相同。對王不留行表面顆粒與蕓苔子表面網狀紋理之間區別,由于種子細小表面特征不明顯,憑肉眼很難判定。

半顯微鑒別:王不留行表面突起的粗顆粒狀很明顯(見圖6 A),而蕓苔子表面稍粗糙,但無突起的顆粒狀(見圖 6 B)。

圖6 王不留行與蕓苔子的半顯微圖

2.7 當歸片與歐當歸片

來源及性狀:當歸為傘形科植物當歸 Angelica sinensis(Oliv.)Diels的干燥根;當歸片呈類圓形、橢圓形或不規則薄片;外表皮為淺棕色至棕褐色;切面為淺棕黃色或黃白色,平坦,有裂隙,中間有淺棕色的形成層環,并有多數棕色的油點;有濃郁的香氣,味甘、辛、微苦[13]。歐當歸片為同科植物歐當歸 Levisticum officinale Koch.的干燥根,兩者之間性狀特征十分相似,僅歐當歸的油性和香味稍差。

半顯微鑒別:當歸片木部有許多淺黃色油狀物小塊與類白色相間形成的紋理,皮部有大片鮮黃色油狀物與類白色相間形成的紋理(見圖7 A);而歐當歸片木部有少量的淺黃色油狀物與類白色相間形成的紋理,皮部大塊狀黃色油狀物與類白色相間形成的紋理(見圖7 B)。兩者油狀物數量和顏色均有明顯區別。

圖7 當歸與歐當歸的半顯微圖

2.8 蒼術片與關蒼術片

來源及性狀:蒼術為菊科植物茅蒼術 Atractylodes lancea(Thunb.)DC.或 北 蒼 術 Atractylodes chinensis(DC.)Koidz.的干燥根莖,本次采用的是北蒼術。北蒼術片呈類圓形或條形厚片;外表皮為灰棕色至黃棕色,有皺紋,有時可見根痕;切面為黃白色或灰白色,散有多數橙黃色或棕紅色油室,有的可析出白色細針狀結晶;氣香特異,味微甘、辛、苦[14]。關蒼術為菊科植物關蒼術Atractylodes japonica Koidz.ez Kitam.的干燥根莖;表面深棕色,斷面淺黃色,結節狀片,質較輕,纖維性強,麩炒后斷面顏色加深與蒼術片性狀特征更相似。

半顯微鑒別:蒼術片斷面有許多棕褐色塊狀物,大片鮮黃色與少量白色相間形成的紋理,偶有白色樣纖維物(見圖8 A);關蒼術斷面物無棕褐色塊狀物,有少數淺黃色與類白色相間形成的紋理,并有較多纖維狀物(見圖 8 B)。

圖8 北蒼術與關蒼術的半顯微圖

2.9 金錢白花蛇與赤鏈蛇

來源及性狀:金錢白花蛇為眼鏡蛇科動物銀環蛇Bungarus multicinctus multicinctus Blyth的幼蛇干燥體;銀環蛇全身體背有白環和黑環相間排列,白環較窄,尾細長,背面為黑色或藍黑色,有30~50個白色或乳黃色窄橫紋;腹面污白色;頭背黑褐,幼體枕背有淺色倒“V”形斑;背脊較高,橫截面呈三角形,尾末端較尖;頭橢圓形,與頸區分較不明顯,關背有典型的9枚大鱗片,無頰鱗,背正中一行脊鱗擴大呈六角形;尾下鱗單行[15]。赤鏈蛇為游蛇科動物赤鏈蛇 Dinodon rufozonatum的干燥幼體,頭部略扁,呈橢圓形;吻鱗高,從背面可以看到;鼻間鱗小,前端橢圓;額鱗短,長約等于自其前緣到鼻間鱗前緣的距離;體背面黑色,有約70條狹窄的紅色橫紋;頭部鱗片黑色,有明顯的紅色邊緣;頭后部有一“丫”形紋;腹部白色,在肛門前面則散生灰黑色小點[16]。成品金錢白花蛇藥材以黑白相間條紋為主,也有黑和淺紅相間的條紋為藥材,而赤鏈蛇是以黑白相間的條紋為主,兩者均為很小的幼蛇,干燥后各自原有區別特征不明顯,很難判定。

半顯微鑒別:金錢白花蛇背正中有一條突起背棱把異常擴大的背鱗分成兩半(見圖9 A和圖9 B),而赤鏈蛇無擴大的背鱗(見圖9 C)。

圖9 金錢白花蛇與赤鏈蛇的半顯微圖

3 討論

3.1 真偽鑒別困難的原因

專業人員欠缺:當前,中藥專業人員素質普遍較低,掌握的專業知識與實踐相差太遠,無法正確判定中藥飲片的真偽,基層單位更是缺乏中藥專業人員。目前藥典標準越來越高,人員和設備的專業化要求也越來越高,檢驗成本相應大幅增加。

把關不嚴:在經濟效益的驅使下,中藥某些種類比較珍貴,在市場流通中供不應求,因此出現大幅漲價的趨勢。一些不法商家看到商機,故意用部分相似的偽品或次品冒充正品[17]。如臺烏片用非膨大根切片摻入,用赤鏈蛇冒充金錢白花蛇,用蕓苔子冒充王不留行等。此外,某些中藥飲片廠為了降低成本,將未經檢驗或者少做檢驗項目的飲片直接供給經銷單位或使用單位,也造成了飲片質量下降,真偽難辨[18]。

藥品本身原因:我國中藥資源豐富,來源復雜,種類繁多,國家藥典標準與地方標準存在很大差異。有的藥材來源不同科,也有的藥材來源同科不同屬或同種同屬不同科等,還有生長環境的影響,給藥材鑒別增加了一定難度。藥材加工成飲片后,其辨別更是難上加難[19]。比如西洋參與人參藥材切片前也僅有輕微差別,切片后則十分相似,很難辨別。

采收加工環節不正規:中藥品種繁多,加工方法都不一樣,采收季節不同對中藥有效成分和鑒別都有影響。中藥飲片廠大都雇傭當地農民作為炮制加工人員,無專業知識,加工的中藥飲片與合格品相差甚遠[20]。比如當歸切片后應低溫干燥,溫度過高加工出來的當歸片柴性增加,油性減小,與偽品歐當歸片特征更相似,增加了鑒別難度。

3.2 手機顯微鏡鑒別的優勢

傳統的中藥鑒別方法是通過性狀鑒別和顯微鑒別兩方面進行,性狀鑒別是利用眼看、手摸、口嘗、鼻嗅來觀察中藥的形狀、大小、顏色、質地、斷面、表面特征、氣味等特點;顯微鑒別為利用顯微鏡觀察中藥的切面或粉末的組織構造、細胞形狀、內含物等特征。性狀鑒別誤差率高,對形狀十分相似的中藥飲片很難作出辨別;而顯微鑒定對人員專業性及設備的要求均較高,特別是基層醫療單位和經營單位,受困于無專業檢驗人員和設備及外出的專業采購人員無法攜帶專業檢驗設備的現狀。2種鑒別方法各有局限,而手機顯微鏡鑒別兼具兩者的優點,用其放大400倍后,原來肉眼觀察相似的特征將有所區別,故可利用手機顯微鏡把中藥飲片的表面或斷面特征放大后對其真偽區別點進行鑒別。手機顯微鏡攜帶方便,操作簡單,使用方便,價格便宜,實用性強,用于中藥鑒別便于圖片保存及對比研究,鑒別效果準確可靠,能快速、簡便地鑒別中藥飲片,對于保證藥品質量有重要意義,也是對現有鑒別方法的重要補充,有較高的應用價值。

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