氣相色譜法測定蜂蜜中氟胺氰菊酯的不確定度評定

◎ 張 茹，王紫昕，張文軒，沈 鑫

（寧夏食品檢測研究院，寧夏 銀川 750000）

1 測試原理和測試過程

1.1 測試原理

將蜂蜜試樣用水和丙酮溶解，試樣中殘留的氟胺氰菊酯用正己烷-二氯甲烷提取液提取，離心，將上層有機相濃縮近干，正己烷溶解后，用Oasis HLB固相萃取小柱凈化，正己烷-二氯甲烷提取液洗脫，氮吹近干后，用正己烷溶解，配有電子俘獲檢測器的氣相色譜儀測定，保留時間定性，外標法定量。

1.2 測試過程

稱取（5.0±0.05）g蜂蜜樣品于離心管中，加入5 mL水和6 mL丙酮，漩渦混勻1 min，使樣品溶解。加入20 mL正己烷-二氯甲烷提取液，渦旋振蕩提取3 min（如出現乳化現象則于離心機中3 000 r/min離心5 min），上層有機相轉入離心瓶中。再加入6 mL丙酮和20 mL正己烷-二氯甲烷提取液重復提取1次，合并有機相后于35 ℃濃縮近干，加入2.0 mL正己烷溶解，過HLB固相萃取小柱凈化，收集洗脫液于試管中，50 ℃氮吹近干，1.0 mL正己烷溶解，供氣相色譜儀測定。

2 建立數學模型

蜂蜜中氟胺氰菊酯含量按公式（1）計算：

式（1）中，X為待測樣品中氟胺氰菊酯的含量，μg/kg；C為從標準工作曲線上查出待測樣品溶液中氟胺氰菊酯的濃度，ng/mL；V為待測樣品定容體積，mL；m為待測樣品的質量，g。

3 不確定度分量的主要來源

①標準物質的影響。標準儲備液的不確定度以及在稀釋過程引入的不確定度。②樣品制備過程的影響。樣品均勻程度、天平的最大允許誤差（MPE）。③最小二乘法擬合標準曲線校準得出X0時所產生的不確定度。④重復性實驗變化的影響。

蜂蜜中氟胺氰菊酯含量測定的不確定度來源因果，如圖1所示。

圖1 蜂蜜中氟胺氰菊酯含量測定的不確定度來源因果圖

4 各分量標準不確定度的評定

4.1 標準溶液不確定度

4.1.1 標準溶液的不確定度

標準證書給出氟胺氰菊酯標準儲備液濃度為1 000 μg/mL，其不確定度為 ±1.4 μg/mL，k=2，假設為均勻分布，則氟胺氰菊酯的標準不確定度：

4.1.2 稀釋過程引入的不確定度

稀釋過程：①用1 mL刻度移液管移取1.0 mL濃度為1 000 μg/mL的標準溶液于10 mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度配成100 μg/mL的標準中間液。②用1 mL刻度移液管移取1.0 mL濃度為100 μg/mL的標準溶液于10 mL容量瓶中，配成10 μg/mL的標準中間液。③用5 mL刻度移液管移取2.5 mL濃度為10 μg/mL標準中間液于25 mL容量瓶中配制成1 μg/mL的標準使用液。④分別用1.0、2.0、5.0 mL刻度移液管移取濃度為1 μg/mL的標準使用液1、2、5 mL于10 mL容量瓶中并定容至刻度，配成濃度分別為10、200、500 ng/mL的標準使用液。⑤分別用2.0、5.0 mL刻度移液管移取濃度為100 ng/mL的標準使用液0.0、2、5 mL于10 mL容量瓶中并定容，配成濃度分別為0.0、20、50 ng/mL、的標準使用液。

在實驗過程中使用了很多玻璃量具，按照JJC 196-2006《常用玻璃量具檢定規程》的要求，按照三角分布考慮，k=，以此來估算相對不確定度的分量，見表1。

表1 由量具校準引起的不確定度表

由上述數據合成的氟胺氰菊酯相對標準不確定 度uCrel：

氟胺氰菊酯標準溶液是在20 ℃的條件下進行實驗的，因此，容量瓶和溶液溫度與的濃度是在20 ℃時的濃度，實驗室的溫度變化介于±5 ℃之間，不需要進行溫度修正。正己烷的體積膨脹系數為1.36×10-3℃，假設為均勻分布，則由溫度變化引入的不確定度為：

4.1.3 標準物質引入的不確定度

4.2 最小二乘法擬合標準曲線所產生的不確定度

氟胺氰菊酯標準溶液的濃度梯度為5個，得到相應的峰面積，用最小二乘法進行擬合，得到直線方程y=ax+b和相關系數r，見表2。

表2 標準曲線擬合數據表

本例中對待測樣品溶液進行了10次測定，由直線方程求得平均質量濃度為X0=97.66 ng/mL，則X0的標準不確定度為：

標準溶液峰面積的殘差的標準差；

標準溶液的平均濃度；

標準溶液質量濃度殘差的平方和；n為標準溶液的測量次數，本例為18；p為X0的測量次數，本例為10次。

則：

4.3 樣品制備過程引入的不確定度

4.3.1 取樣引入的不確定度

本實驗依照農業部781號公告-9-2006《蜂蜜中氟胺氰菊酯殘留量的測定》氣相色譜法規定，將蜂蜜充分混勻后隨機取樣，認為樣品是均勻的，不確定度忽略不計。

4.3.2 稱重

按農業部781號公告-9-2006的要求，稱重準確至0.01 g，要求的稱樣量為5.0 g（精確至0.001 g）。JJG 1036-2008《電子天平檢定規程》規定，該精度的天平在-0.01～50 g最大允差為±0.5 mg，天平線性MPE為矩形分布，兩次稱量的不確定度如下：

4.3.3 定容體積的標準不確定度

凈化后，洗脫液濃縮近干后，用1.0 mL正己烷溶解。按照三角分布考慮，k=，由校準引入的標準不確定度，見表3。

表3 定容體積的標準不確定度表

4.3.4 樣品制備過程引入的不確定度

從上述評定可知：urel(m)相對于urel(V)來說可忽略，則樣品制備過程中引入的不確定度主要來源于urel(V)。

4.4 重復性實驗

在重復性條件下，對蜂蜜樣品進行了10次獨立性測試，測量見表4。

表4 重復性實驗測量結果表

則蜂蜜的算數平均值為：

單次測量的標準偏差為：

算術平均值的不確定度：

5 不確定度分量列表

現將各不確定度分量列于表中，見表5。

表5 蜂蜜中氟胺氰菊酯含量測定的不確定度分量表

6 合成標準不確定度

7 擴展不確定度

按國際慣例，測量結果的擴展不確定度包含因子k取2，則相對擴展不確定度：

8 結果報告

通過對不確定度分量的分析，發現影響最大的是重復性帶來的，其次是曲線擬合帶來的不確定度，而標準儲備溶液稀釋過程產生的不確定度和樣品制備過程產生的不確定度相對較小，可忽略不計。用氣相色譜法測定蜂蜜中氟胺氰菊酯的含量，測定兩份樣品取其平均值報告結果，其結果和擴展不確定度為（19.43±0.74）μg/kg，包含因子k=2，相對擴展不確定度為3.8%。