肺腺癌EGFR、ALK突變與TTF-1表達的關系??

彭昆偉，何湘軍，羅漫君，尤長宣△

(南方醫科大學南方醫院:1.腫瘤科；2.惠僑醫療中心，廣州 510515)

肺癌是世界上最常見的惡性腫瘤[1]，病死率高，嚴重影響人類健康，分為非小細胞肺癌和小細胞肺癌兩大類型。以往主要根據患者的一般狀態、病理分型、腫瘤分期等決定治療方式，綜合運用手術、化療、放療等手段。隨著對腫瘤分子生物學的研究深入，影響腫瘤細胞生長、侵襲、轉移及腫瘤血管生成的信號傳導通路逐漸被認識，通過特定的靶向藥物阻斷信號傳導過程，可以達到治療腫瘤的目的。表皮生長因子受體(EGFR)、間變性淋巴瘤激酶(ALK)基因是非小細胞肺癌的兩個主要治療靶點，常見于肺腺癌、非吸煙或少吸煙的年輕患者[2]，除個別罕見病例，二者之間相互排斥[3]。針對EGFR、ALK突變的靶向藥物(EGFR-TKIs：吉非替尼、厄洛替尼，ALK-TKIs：克唑替尼)相繼被批準用于臨床，對比傳統化療有更好的療效及安全性[4-6]，為晚期肺腺癌患者的治療提供了新的選擇。甲狀腺轉錄因子-1(thyroid transcription factor-1 TTF-1)正常情況下可在甲狀腺和肺組織中表達，是診斷肺癌常用的免疫組織化學標志物，在60%～90%的肺腺癌、90%的小細胞肺癌、大多數的甲狀腺癌中表達[7]，少見于非肺腺癌、肺鱗癌[8]，主要用于肺腺癌的診斷與鑒別診斷。TTF-1、EGFR、ALK具有一些類似的臨床特點(均常見于肺腺癌)，為了解其中是否存在關聯，TTF-1表達狀態是否可預測EGFR、ALK突變,本研究以南方醫科大學南方醫院腫瘤科、呼吸科收治的肺腺癌患者為對象，研究肺腺癌EGFR、ALK突變與TTF-1表達之間的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取南方醫科大學南方醫院腫瘤科、呼吸科2016年1月至2017年5月收治的肺腺癌患者242例，男146例，女96例；年齡28～87歲，平均(58.12±10.77)歲；有吸煙史者109例，無吸煙史者133例。本研究通過本院醫學倫理委員會審查批準。

1.2方法 采用免疫組織化學技術(D5F3抗體)檢測ALK突變，其靈敏度和特異度均較高(分別達86%～90%和95%～100%)[9-10]，國家食品藥品監督管理總局(CFDA)批準可以替代FISH檢測技術。采用擴增阻滯突變系統法檢測標本中EGFR基因18～21外顯子的突變情況。由南方醫科大學南方醫院病理科完成檢測。

1.3判斷標準 采用二元判別法，TTF-1、ALK陽性表達標準：無論著色細胞多少，只要腫瘤細胞有染色顆粒，即判定為陽性。

1.4統計學處理 采用SPSS20.0統計軟件進行統計分析。計數資料以例數或百分率表示，比較采用χ2檢驗及Fisher確切概率法(理論頻數小于5時)，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1肺腺癌患者EGFR、ALK突變情況 所有患者均行TTF-1檢測，陽性210例，陰性32例。行EGFR、ALK基因檢測者分別有194、224例(部分患者因經濟原因未行基因檢測)，EGFR總體突變率為41.75%(81/194)，女性突變率[55.26%(42/76)]高于男性[33.05%(39/118)]，以19、21外顯子突變為主，占96.30%(78/81)。ALK總體突變率為10.27%(23/224)；未發現EGFR、ALK雙突變共存。基因突變情況見表1。

2.2EGFR基因突變與TTF-1表達的關系 共194例患者行EGFR基因檢測，169例TTF-1陽性患者中檢測出79例EGFR突變，25例TTF-1陰性患者中檢測出2例EGFR突變，TTF-1陽性患者中EGFR基因突變率明顯高于陰性患者(46.74%vs. 8.00%)，差異有統計學意義(χ2=13.44，P=0.000)。TTF-1表達與EGFR突變關系密切，肺腺癌TTF-1表達預測EGFR突變的陽性預測值為46.74%(79/169)，陰性預測值為92.00%(23/25)，靈敏度為97.53%(79/81)，特異度為20.35%(23/113)。

表1 不同臨床特征下患者TTF-1表達情況(n)

2.3ALK基因突變與TTF-1表達的關系 197例TTF-1陽性患者中檢測出23例ALK突變，27例TTF-1陰性患者中未檢測出ALK突變，TTF-1陽性患者中ALK基因突變率明顯高于陰性患者(11.68%vs. 0)，差異無統計學意義(χ2=3.51，P=0.085)。肺腺癌TTF-1表達預測ALK突變的陽性預測值為11.68%(23/197)，陰性預測值為100.00%(27/27)，靈敏度為100.00%(23/23)，特異度為13.43%(27/201)。

3 討 論

TTF-1是一種細胞核蛋白，屬于核蛋白轉錄因子NKX2家族中的成員，參與肺細胞的發育、生長、分化、表面活性物質生成等過程。TTF-1常表達于肺腺癌，靈敏度、特異度分別為60%～89%、75%～98%[11-12]，可作為肺腺癌的特異性標志物，對原發性肺腺癌及轉移性肺腺癌的鑒別診斷具有重要作用。近年來，有關肺腺癌的靶向治療研究進展迅速，不斷有新一代的靶向藥物進入臨床應用(如最新的EGFR-TKIs奧西替尼，ALK-TKIs艾樂替尼)，療效顯著，在進行靶向治療前均應行基因突變檢測，非突變患者的靶向治療療效欠佳。SOMAIAH等[13]研究顯示，TTF-1陰性的肺腺癌患者，EGFR突變率非常低。95例TTF-1陽性患者中有20例EGFR突變，36例TTF-1陰性患者僅有1例EGFR突變，TTF-1預測EGFR突變的靈敏度和特異度分別為95.24%、31.82%，陰性預測值高達95.00%。另有研究顯示，508例TTF-1陽性患者有105例EGFR突變，237例TTF-1陰性患者中僅有9例EGFR突變[14]。EGFR突變與TTF-1表達明顯相關，TTF-1預測EGFR突變的陰性預測值超過95%。本研究同樣顯示，EGFR突變與TTF-1表達關系密切，在TTF-1陰性患者中，僅8.00%的患者存在EGFR突變，靈敏度為97.53%，陰性預測值92.00%，提示EGFR突變少見于TTF-1陰性患者，有助于指導患者個體化的治療。雖然ALK突變與TTF-1表達均常見于肺腺癌，但本研究顯示二者無明顯關系，分析原因可能為：(1)肺腺癌中ALK突變率低，造成 TTF-1陽性、TTF-1陰性患者ALK突變率相差不大；(2)本研究樣本量較小，可能產生誤差。本研究顯示，所有ALK突變患者均為TTF-1陽性，未發現TTF-1陰性的ALK突變患者，TTF-1預測ALK突變的陰性預測值100.00%，靈敏度為100.00%，與以往研究結果相近[15-16]，提示ALK突變罕見于TTF-1陰性患者。此外，本研究中EGFR總體突變率為41.75%，女性突變率高于男性，以19、21外顯子突變為主，占96.30%。ALK總體突變率為10.27%，未發現EGFR、ALK雙突變共存。TTF-1不僅可作為肺腺癌的特異性診斷標志物，還可作為判斷預后的指標。MA等[17]研究表明，在早期可手術肺癌患者中，TTF-1陽性預后較好，兩組人群的5年生存率分別為84.8%、65.0%。有研究表明，在晚期肺癌中，TTF-1陽性患者總生存時間較TTF-1陰性患者長(18個月vs. 9個月，P<0.01)[18]。但對于TTF-1表達狀態是否會影響靶向藥物的療效，目前尚無報道，本研究將繼續追蹤此類患者的療效。

綜上所述，EGFR、ALK基因在TTF-1陰性患者中突變率極低。基因檢測費用較高，且費時，從節約時間和經濟成本的角度考慮，可根據TTF-1表達情況，合理篩選EGFR、ALK陽性率高的人群。