病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用效果觀察

徐剛

【摘 要】目的：研究病理技術(shù)蘇木精-伊紅染色（HE染色）在病理診斷中的應(yīng)用效果。方法：選取60張宮頸組織的石蠟切片，其中30張為HE染色改進(jìn)前的石蠟切片，30張為HE染色改進(jìn)后的石蠟切片，比較HE染色改進(jìn)前、后染色標(biāo)準(zhǔn)率。結(jié)果：HE染色技術(shù)改進(jìn)前染色標(biāo)準(zhǔn)率為73.33%，HE 染色技術(shù)改進(jìn)后染色標(biāo)準(zhǔn)率為 93.33%， HE染色技術(shù)改進(jìn)前后染色標(biāo)準(zhǔn)率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：病理診斷技術(shù)是臨床病理診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，HE 染色技術(shù)的改進(jìn)有利于提高染色標(biāo)準(zhǔn)率，提高切片質(zhì)量，從而提高診斷的準(zhǔn)確率。

【關(guān)鍵詞】病理技術(shù)；病理診斷；蘇木精-伊紅染色；應(yīng)用效果

引言：

在病理檢查的過程中，臨床的診斷結(jié)果會受到組織染色質(zhì)量的影響，而診斷的結(jié)果會對臨床治療方案產(chǎn)生影響，從而對臨床治療的有效率以及安全性造成影響。病理組織切片的處理效果和染色效果也會對病理診斷的準(zhǔn)確率造成一定的影響。對病理組織進(jìn)行制片處理的過程中，染色處理是關(guān)鍵環(huán)節(jié)，染色質(zhì)量的高低會影響到病理診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性。目前病理診斷存在標(biāo)本固定時間不規(guī)范、試劑濃度不合理、組織脫水不足等諸多弊端，導(dǎo)致制片質(zhì)量較差，增加診斷難度，影響病理診斷的準(zhǔn)確性。本文就HE染色技術(shù)在臨床病理診斷中的應(yīng)用價值展開研究，現(xiàn)將具體的研究內(nèi)容分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料.選取本院病理科2016年5月～2017年5月60張宮頸組織的石蠟切片作為研究對象，其中30張為HE染色改進(jìn)前的石蠟切片，30張為HE染色改進(jìn)后的石蠟切片，HE染色處理均在相關(guān)操作標(biāo)準(zhǔn)下嚴(yán)格進(jìn)行。

1.2 方法

1.2.1 HE染色方法.采用人工染色方法，要求技術(shù)人員在取材中嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作，制片中盡量縮短標(biāo)本的脫水時間和固定時間。技術(shù)人員按照宮頸組織切片染色SOP文件進(jìn)行染色，采用二甲苯脫蠟3缸，5min/缸。過無水乙醇2缸，5min/缸 ， 95%乙醇1缸3 min， 90% 乙醇1缸3min、85%乙醇1缸1min， 隨后再用蒸餾水洗3min。用蘇木精染色3～5 min后，采用濃度為1%的鹽酸酒精分化5～10s，用蒸餾水清洗2min，再用稀氨水反藍(lán)。技術(shù)人員應(yīng)注意對細(xì)胞核染色深度進(jìn)行觀察，根據(jù)顏色深淺，進(jìn)行再次分化或再染色操作。用醇溶性伊紅液染色10～20s， 可根據(jù)情況適當(dāng)調(diào)整染色時間， 再梯度酒精脫水，85%乙醇1缸10s， 90%乙醇1缸20s， 95%乙醇1缸30min，無水乙醇2缸，3min/缸，隨后用二苯甲透明3缸，3 min/缸，中性樹膠封片，并粘貼標(biāo)簽。

1.2.2HE染色技術(shù)改進(jìn)方法：針對不同大小的宮頸組織標(biāo)本的特點分別進(jìn)行相應(yīng)脫水、固定以及染色等操作，染色時確保細(xì)胞核變成藍(lán)色。細(xì)胞間質(zhì)的顏色為粉紅或桃紅，紅血球為橘紅色，彈力纖維為亮粉紅色，嗜酸性顆粒為鮮紅色，蛋白性液體為粉紅色，膠原纖維為淡粉紅色。為了降低組織脫落的發(fā)生率，對宮頸組織進(jìn)行烤片處理，完成后將烤片的溫度降低到與室溫相同的水平，再對宮頸組織進(jìn)行染色處理。在染色的過程中蘇木精多次被稀釋，pH（氫離子濃度）發(fā)生改變，因此，在染色架經(jīng)水瀝干20s后放入蘇木精缸中，再滴入2滴冰醋酸，使酸堿中和，使染色具有一致性【1】。

1.3 觀察指標(biāo)。比較HE染色技術(shù)改進(jìn)前和HE染色技術(shù)改進(jìn)后染色標(biāo)準(zhǔn)率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法。采用SPSS22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率（%）表示，采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

HE染色技術(shù)改進(jìn)前染色標(biāo)準(zhǔn)率為73.33%， HE染色技術(shù)改進(jìn)后染色標(biāo)準(zhǔn)率為 93.33%， HE 染色技術(shù)改進(jìn)前后染色標(biāo)準(zhǔn)率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。（P<0.05）。見表1。

3 結(jié)語

在臨床操作期間，染色質(zhì)量大部分是由細(xì)胞核的染色質(zhì)量所決定的，這屬于化學(xué)以及物理的共同作用之下完成的。大部分是由于組織內(nèi)部有非常多的微小細(xì)孔，在染料滲透以后，與組織結(jié)合牢固之后發(fā)生溶解以及擴(kuò)散細(xì)胞以及組織的HE染色的質(zhì)量非常容易受到取材操作、時間以及質(zhì)量等相關(guān)因素的影響，所以在組織染色當(dāng)中一定要按照不同標(biāo)本類型，選擇相對應(yīng)的工具以及方法，以免使組織結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。另外， 需要送入檢驗科的組織全部首選要給予有效固定，可以使組織以及活體成分以及形態(tài)得到保障，同時避免出現(xiàn)自溶。

染色質(zhì)量對臨床病理檢查的診斷結(jié)果有很大的影響，可對疾病治療的方案產(chǎn)生影響。進(jìn)行組織染色時，技術(shù)人員應(yīng)在相關(guān)操作標(biāo)準(zhǔn)的指導(dǎo)下進(jìn)行染色操作。技術(shù)人員應(yīng)加強(qiáng)對HE染色涉及到的相關(guān)理化學(xué)知識的重視，對不同大小的標(biāo)本進(jìn)行針對性處理，根據(jù)標(biāo)本的大小和厚薄制定合理的固定以及脫水時間。切片組織的結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜，技術(shù)人員在使用染色劑后，應(yīng)在較短的時間內(nèi)使染色劑和組織充分結(jié)合，確保徹底染色。病理細(xì)胞存在酸性分子，而酸性分子會與染色劑中的陽離子結(jié)合，從而形成固定分子；而病理細(xì)胞中含有的堿性分子可以與染色劑中的陰離子結(jié)合，會使固定作用得以強(qiáng)化，從而保持細(xì)胞活性平穩(wěn)，并維持組織結(jié)構(gòu)，從而提高檢查的準(zhǔn)確性。本次研究結(jié)果顯示，改進(jìn)病理技術(shù)HE染色后，染色標(biāo)準(zhǔn)率顯著高于技術(shù)改進(jìn)前（93.33% VS73.33%）， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述，病理技術(shù)中的 HE 染色技術(shù)在病理診斷中的意義重大，技術(shù)人員應(yīng)不斷提高和改進(jìn) HE 染色的操作技術(shù)，根據(jù)組織類型進(jìn)行相對應(yīng)的固定、脫水、切片、染色等操作從而提高切片質(zhì)量，提高染色標(biāo)準(zhǔn)率，進(jìn)而促進(jìn)病理診斷準(zhǔn)確性的提升，最終保證臨床治療效果【2】。

參考文獻(xiàn)：

[1]陳潔.研究病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用價值[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2018，18（21）：93+99.

[2]鄭菲，陳培瓊，王玉環(huán).HE染色在臨床病理診斷中的應(yīng)用研究[J].中外醫(yī)療，2016，35（30）：17-18+21.