結直腸癌患者血清中雌激素及雌激素受體β的表達和臨床意義研究*

寧偉偉，楊雪峰，謝 銘（遵義醫學院附屬醫院胃腸外科，貴州遵義563000）

結直腸癌是常見消化道腫瘤之一，其發生及發展表現出多基因、多病因、多階段的復雜特征。近年來，隨著人們生活環境及飲食習慣、結構的改變，其發病率及病死率均呈上升趨勢[1]。據文獻報道，結直腸癌病死率占所有惡性腫瘤的9%[2]，在全球排名第2位[3]。Globocan2012（IARC）最新數據顯示，結直腸癌全球范圍內男性居常見腫瘤的第3位和女性居第2位[4]。流行病學調查結果顯示，結直腸癌在發病率方面表現出性別差異，男性發病率明顯高于女性，且絕經后婦女患病風險高于絕經前婦女[5]。近年來，隨著雌激素受體β（ER-β）在大腸組織中被發現后，越來越多的學者相信，雌激素[雌二醇（E2）]及 ER-β 參與了大腸癌的發生及發展，并對大腸組織具有一定的保護作用，但針對結直腸癌患者體內血清E2、ER-β與結直腸癌之間關系的研究目前鮮有文獻報道。本研究通過分析結直腸癌患者與健康體檢者血清E2、ER-β表達水平的變化，進一步探索結直腸癌與E2、ER-β的相關性，為臨床研究E2、ER-β與結直腸癌的發生及發展的關系提供實驗依據。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 一般資料 選取2014年9月至2015年9月本院胃腸外科住院、經腸鏡病理檢查確診為結直腸癌患者141例作為結直腸癌組（女性均選擇絕經后人群），年齡 21～84歲，平均（62.01±13.15）歲；其中男性 88例，年齡 21～84 歲，平均（60.28±13.64）歲；絕經后女性53例，年齡 50～82歲，平均（63.74±12.93）歲。選取同期本院體檢中心的141例健康體檢者作為健康體檢組，年齡22～77歲，平均（61.87±12.78）歲；其中男性 88例，年齡 22～77 歲，平均（61.20±12.64）歲；絕經后女性53例，年齡50～77歲，平均（62.62±11.68）歲。2組研究對象年齡、性別等一般資料比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。

1.1.2 排除標準 （1）絕經正在應用更年期激素替代療法或停藥不足3個月者；（2）婦科疾病，如卵巢腫瘤、子宮肌瘤、子宮惡性腫瘤、乳腺腫瘤等；（3）曾進行過婦科手術，如子宮或卵巢切除等；（4）婦科疾病以外的腫瘤或其他疾病，如肺癌、胸腺癌、甲狀腺功能亢進癥、肝硬化等；（5）接受過雌激素治療的結直腸癌患者。

1.2 方法

1.2.1 測試儀器 DXI800發光分析儀（美國貝克曼庫爾特有限公司）、純水系統（型號：PURELAB UITRA BIOSCI，英國ELGA公司）、RT6000全自動酶標分析儀（深圳雷杜生命科學股份有限公司）、高速離心機、電子分析天平（型號：FA2004N，上海精科天平儀器廠）等。

1.2.2 主要試劑 E2發光定量檢測試劑盒（DXI800配套試劑，美國貝克曼庫爾特有限公司）、ER-β酶聯免疫分析試劑盒（美國賽默飛世爾公司）等。

1.2.3 標本采集 采集2組研究對象清晨空腹靜脈血5.0 mL，4℃、3 000 r/min離心10 min取血清，分裝于1.0 mL的微型離心（EP）管內，每管0.5 mL，存放于-20℃冰箱中備用。

1.2.4 化學發光法檢測E2水平 取血5.0 mL，4℃、3 000 r/min離心10 min取血清0.5 mL備用，取0.5 mL血清至進樣管，采用DXI800發光分析儀檢測E2水平，嚴格按試劑盒說明書操作。

1.2.5 酶聯免疫法檢測ER-β水平 取血5.0 mL，4℃、3 000 r/min離心10 min取血清0.5 mL備用，取0.5 mL血清按ER-β酶聯免疫分析試劑盒說明書加樣，采用RT6000全自動酶標分析儀檢測血清ER-β水平。

1.3 統計學處理 應用SPSS19.0統計軟件進行數據分析，計量資料以表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗；相關分析采用Pearson相關。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 2組男性研究對象血清E2、ER-β表達比較 結直腸癌組男性患者血清E2水平明顯高于健康體檢組男性，血清ER-β水平明顯低于健康體檢組男性，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表 1。

表1 2 組男性研究對象血清E2、ER-β表達比較（±s）

表1 2 組男性研究對象血清E2、ER-β表達比較（±s）

注：-表示無此項

組別n E2（pmol/L）ER-β（ng/L）健康體檢組（男）結直腸癌組（男）--88 88 tP 35.30±10.72 168.89±91.35 2.48 0.000 22.98±7.41 15.02±6.03 1.44 0.000

2.2 2組女性研究對象血清E2、ER-β表達比較 結直腸癌組女性患者血清E2水平明顯高于健康體檢組女性，血清ER-β水平明顯低于健康體檢組女性，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表 2。

表2 2組女性研究對象血清E2、ER-β表達比較（±s）

表2 2組女性研究對象血清E2、ER-β表達比較（±s）

注：-表示無此項

組別n E2（pmol/L）ER-β（ng/L）健康體檢組（女）結直腸癌組（女）--53 53 tP 50.80±16.40 147.21±57.52 2.79 0.000 21.36±8.99 14.98±6.13 1.02 0.000

2.3 2組男女研究對象血清E2、ER-β表達比較 結直腸癌組男女患者血清E2水平明顯高于健康體檢組男女研究對象，血清ER-β水平明顯低于健康體檢組男女研究對象，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表 3、圖 1。

表3 2組男女研究對象血清E2、ER-β表達比較（±s）

表3 2組男女研究對象血清E2、ER-β表達比較（±s）

注：-表示無此項

組別健康體檢組（男女）結直腸癌組（男女）n 141 141 tP--E2（pmol/L）43.05±13.56 158.05±74.44 2.67 0.000 ER-β（ng/L）22.17±8.21 15.01±6.08 1.21 0.000

圖1 2組男女研究對象血清E2、ER-β表達比較

2.4 結直腸癌患者血清E2、ER-β相關性分析 男性結直腸癌患病率為62.41%，女性結直腸癌患病率為37.59%，見圖2。男性結直腸癌患病率高于女性；結直腸癌患者血清E2水平與ER-β水平呈顯著負相關（r=-0.69，P＜0.05）。見圖 3。

圖2 結直腸癌患病率柱狀圖

圖3 結直腸癌患者血清E2、ER-β相關性分析散點圖

3 討 論

引起結直腸腫瘤的原因很多，結直腸癌的發生及發展可能與E2和ER-β關系密切。結合文獻[6-8]分析認為，雌激素在機體內發揮的生物學效應可能會促進細胞凋亡，抑制異型增生，維護細胞正常的形態、結構和功能，從而起保護作用，預防結直腸癌的發生。流行病學調查結果顯示，結直腸癌發病率和病死率呈男性高于女性的趨勢，且絕經后婦女患病的風險高于絕經前婦女[9]；推測可能與雌激素對結直腸黏膜具有保護作用有關。

LIMSUI等[10]關于55～69歲絕經后婦女激素治療的回顧性研究表明，對絕經后女性，激素治療與結直腸癌的發生風險呈負相關，有關雌激素與結腸癌發病風險的meta分析研究成果最終也得出雌激素與結腸癌發病率降低有關的結論[11]。上述研究均提示雌激素可能在結直腸癌的發生中具有阻抑作用。但另有研究卻指出，雌激素對結腸癌的保護作用只限于結腸癌發病前，一旦腫瘤發生過程啟動，雌激素則無明顯保護作用，甚至有可能具有促進增殖的作用[12]。

本研究探討了結直腸癌患者血清E2水平變化，結果顯示，結直腸癌組患者血清E2水平較健康體檢組明顯呈升高趨勢，與國內研究發現結直腸癌患者血清E2水平較健康者升高的結果一致[13]；表明E2與結直腸癌發生及發展密切相關，E2有可能在結腸黏膜發生癌變的早期過程中具有一定的阻抑作用，隨著E2水平的降低，結腸黏膜發生癌變的風險增加，最終可能導致結直腸癌的發生，但后期在腫瘤發展的過程中，由于體內下丘腦-垂體-性腺軸的調節，體內E2水平反而升高，并進一步促進腫瘤的發展，但具體原因尚不清楚，還有待進一步研究。另外，本研究還發現，結直腸癌患者血清ER-β水平明顯低于健康體檢者。在過去的研究中，國內學者發現，ER-β水平與大腸癌發生及發展關系密切，并可作為其生物學及判斷預后指標[13-14]。另有研究表明，ER-β可能為大腸癌的“抑癌基因”[15]。結合本研究直腸癌患者體內血清ER-β表達水平明顯低于健康體檢者這一結果，進一步說明ER-β與大腸癌的發生及關系密切，且可能是判斷大腸癌患者預后指標之一。根據本研究結果，結直腸癌組患者血清ER-β水平較健康體檢組呈降低趨勢，推測ER-β表達水平下調的改變有可能參與了結直腸癌的發生及發展，但具體機制尚不清楚。

本研究分析結直腸癌組男性和絕經后女性患者血清E2、ER-β水平發現，結直腸癌組男性和絕經后女性患者血清E2水平均較健康體檢組增高，而ER-β水平均較健康體檢組降低，說明男性結直腸癌患者與絕經后女性結直腸癌患者體內E2、ER-β可能存在相似的生物學調節機制，并影響其腫瘤的發展。另外，本研究進行的相關分析還發現，結直腸癌患者血清E2水平與ER-β水平呈顯著負相關，E2、ER-β可能在結直腸癌的發生及發展過程中協同發揮其生物學效應。

綜上所述，結直腸癌患者體內E2、ER-β水平的改變與結直腸癌的發生及發展密切相關，但E2、ER-β調節并影響結直腸癌發生及發展的關鍵點尚不清楚，機制也不明確，類似的研究鮮見文獻報道，所以，對結直腸癌的發生及發展與E2、ER-β具體的調節關系尚需增加體內外試驗進一步進行研究。本研究僅探索了結直腸癌與E2、ER-β的關系，為臨床進一步研究結直腸癌的發生及發展提供了一定的實驗依據。