吉林地區(qū)102例21三體綜合征的細胞遺傳學分析

陳士威 許友強 張 巖 李雨艷 劉丹丹 李 寧

（吉林金域醫(yī)學檢驗所有限公司，吉林長春 130000）

21三體綜合征又稱先天愚型或唐氏綜合征，是新生兒最常見的染色體疾病，在新生兒中的發(fā)病率為1/600-1/800。該病的病因是多了一條21號染色體，所以稱為21-三體綜合征。現(xiàn)代醫(yī)學證實，唐氏綜合征發(fā)生率與母親懷孕年齡有相關(guān)，系21號染色體的異常，有單純、易位及嵌合3種類型。高齡孕婦、卵子老化是發(fā)生不分離的重要原因[1-3]。

本文分析了吉林地區(qū)檢測的外周血染色體患者中染色體異常患者511例的染色體核型，性別分布，及年齡分布，為圍產(chǎn)優(yōu)生診斷、遺傳咨詢提供遺傳素材和科學依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月至2018年1月所有在吉林金域醫(yī)學檢驗所有限公司檢測的外周血染色體患者7 881例。其中男性3 984例，女性3 897例。

1.2 材料

外周血淋巴細胞培養(yǎng)基、離心管、玻璃滴管、一次性無菌注射器、甲醇、冰乙酸、胰酶、秋水仙素、吉木薩染液、載玻片等。

1.3 設(shè)備

生物安全柜（BSC-1500IIB2-X）、CO2培養(yǎng)箱2046、低速離心機（JW-1050）、電熱恒溫水浴箱（600-C）、電熱恒溫水浴箱（DK-600S）、電熱恒溫水浴槽（DK-8D）、便攜式吸痰器（7E-A）、通風廚、生物顯微鏡（BX43）、干燥箱、冰箱。

1.4 實驗方法

用肝素抗凝管靜脈抽血2 mL血液取外周血樣本，無溶血無凝血。用接種針滅菌后抽取血液，分別加入兩個外周血染色體培養(yǎng)基中并搖勻，放入CO2培養(yǎng)箱中續(xù)培養(yǎng)。收獲前加秋水仙素，搖勻后開蓋倒入離心管內(nèi)，低速離心機離心，去上清液。加入KCL溶液低滲，之后放入水浴箱水浴，然后加入少量固定液混勻，2次離心后去上清液，后繼續(xù)加入固定液混勻。固定一段時間后再第3次離心，去上清液，將沉淀合至1個離心管，調(diào)成一定濃度的懸液。將調(diào)好的懸液滴在處理過的載玻片上制片，然后做烘干，染色處理。然后進行核型分析[4]。

2 結(jié)果

所有患者中染色體異常患者511例，陽性率為6.48%，其中，男性269例、女性242例；511例異常患者中21三體綜合征患者102例，其中，男性56例，女性46例。56例男性中單純型54例，易位型1例，嵌合型1例。46例女性中單純型為45例，嵌合型1例，單純型21三體綜合征為21三體患者中表現(xiàn)最多的1種，見表1。

表1 102例21三體患者的染色體核型

3 結(jié)論與討論

本次研究顯示吉林地區(qū)送檢的7 881例患者中，染色體異常人數(shù)為511例（其中男性269，女性242），異常率為6.48%，其中21三體綜合征患者為102例（其中男性56例，女性46例）占511例全部染色體異常患者的比例為20%。結(jié)果表明21三體綜合征是染色體病里發(fā)病率占比較高的。精子或卵子在減數(shù)分裂過程中21號染色體未發(fā)生分離是21三體綜合征的主要發(fā)病原D21S58-D21S42 之間約5 Mb的基因區(qū)域基因的過度導(dǎo)致蛋白質(zhì)的表達量增加，使患者出現(xiàn)智力低下、生長發(fā)育遲緩、特殊面容等癥狀[5-6]。

單純型21三體綜合征，患兒體細胞染色體為47條，有一個額外的21號染色體，核型為47，XX（或XY），+21，本文中102例21三體患者中單純型99例，占比97%，單純型21三體綜合征為此類患者中表現(xiàn)最多的一種

易位型21三體綜合征，患兒的染色體總數(shù)為46條，多為羅伯遜易位，是指發(fā)生在近端著絲粒染色體的一種相互易位，多為D/G易位，D組中以14號染色體為主，即核型為46，XX（或XY），-14，+t（14q21q）；少數(shù)為 15號染色體易位，這種易位型患兒約半數(shù)為遺傳性，即親代中有平衡易位染色體攜帶者，另一種為G/G易位，較少見，是由于G組中2個21號染色體發(fā)生著絲粒融合，形成等臂染色體t（21q21q），或1個21號易位到1個22號染色體上。2016年至2018年，102例21三體患者中僅有一例男性易位核型 46，XY，-14，+t（14q21q），占比 0.98%。

嵌合型21三體綜合征，患兒體內(nèi)有2種或者2種以上細胞株（以2種為多見），一株正常，另一株為21-三體細胞，臨床表現(xiàn)的嚴重程度與正常細胞所占百分比有關(guān)，可表現(xiàn)為從接近正常到典型表型，21-三體細胞株比例越高，智力落后及畸形的程度越重。102例21三體患者中僅兩例，1例為女性，核型為 47，XX，+21[14] / 46，XX[16]，1例為男性，核型為47，XY，+21[24]/46，XY，占比1.96%。這種嵌合型的發(fā)生主要是正常的受精卵在胚胎發(fā)育早期的卵裂過程中，第 21 號染色體發(fā)生不分離所致[6]。嵌合型臨床癥狀不如 21 三體型嚴重、典型，當異常細胞系比例低于9%時，一般不表現(xiàn)出臨床癥狀。本例嵌合型患兒異常核型細胞所占比例較高，為 91.5%，臨床癥狀與單純型差別不大[7]。

21三體綜合征的體征多樣，患者許多器官組織都有異常發(fā)育畸形通常沒有嚴重到危及生命的程度，但其出生給家庭和社會都帶來沉重的負擔，因此做遺傳咨詢、備孕和懷孕初期做染色體檢查至關(guān)重要，通過染色體檢查能降低21三體發(fā)生的危險，能有效降低智力低下兒的出生率，為社會和家庭較少負擔，從而做到優(yōu)生優(yōu)育，提高人口質(zhì)量[8]。