長春地區(qū)網(wǎng)織紅細胞血紅蛋白含量參考區(qū)間的建立

趙麗娟，王 言，肖賀欣，王 瑩，趙鳳蓮

(吉林大學第二醫(yī)院 檢驗科，吉林 長春130041)

網(wǎng)織紅細胞血紅蛋白含量(Ret-He)反映了骨髓前體紅細胞中血紅蛋白的合成，能夠間接反映過去3到4天內(nèi)新生紅細胞內(nèi)鐵含量。因此，Ret-He下降被認為是早期鐵缺乏的指標[1-3]，為缺鐵性貧血的早期診斷提供了依據(jù)。絕大多數(shù)檢驗項目的參考區(qū)間是參照其他國家已建立的參考區(qū)間或由體外診斷試劑廠家提供[4]，缺乏實用性和準確性。使用進口儀器及配套試劑檢測Ret-He時，應建立符合本地區(qū)實驗室的Ret-He參考區(qū)間。

1 資料與方法

1.1一般資料參照衛(wèi)生行業(yè)標準[5]和美國臨床實驗室標準化協(xié)會(CLIS)C28-A3[6]標準，選取2017年2月-6月在吉大二院體檢中心經(jīng)問診，體格檢查、實驗室檢查、腹部超聲均正常的健康成人480例。其中男性228名，女性252名，年齡20-60歲。排除標準：1)近期未服用鐵劑；2)三個月之內(nèi)未獻血；3)無哺乳及妊娠期婦女。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準，所有受試者均簽署知情同意書。

1.2儀器與試劑Sysmex-XN2000是新一代用于檢測Ret-He的全自動血細胞分析儀。所有試劑、質(zhì)控品及校準品均由Sysmex公司提供。

1.3方法

1.3.1Sysmex-XN2000全自動血液分析儀檢測系統(tǒng)每半年進行一次校準，并進行校準后驗證。每日標本檢測前采用低、中、高三個濃度水平質(zhì)控品進行室內(nèi)質(zhì)量控制，確保檢測的精密度。

1.3.2安靜狀態(tài)下，按照靜脈采血的標準操作程序所有受試者均采集EDTA-K2抗凝靜脈血2 ml，輕輕顛倒混勻8次，在SysmexXN2000全自動血液分析儀CBC+DIFF+RET通道下測定Ret-He，所有樣本在2小時內(nèi)檢測完畢。

2 結果

2.1Ret-He分布參考個體的年齡為37.0(30-49)歲(95%CI,37.9-40.0)，男性比例為47.5%，女性比

例為52.5%。經(jīng)Kolmogorov-Smirnov正態(tài)性檢驗，本組數(shù)據(jù)Ret-He為偏態(tài)分布(P<0.05)，如圖1。

圖1 健康成人Ret-He的分布頻率

2.2Ret-He在不同性別組的結果男性、女性Ret-He中位數(shù)分別為33.5pg、32.5pg，男性高于女性。經(jīng)非參數(shù)兩個獨立樣本Mann-Whitney U檢驗，組間差異有統(tǒng)計學意義(Z=-7.308，P=0.000)。因此，應將男女分組。

2.3Ret-He在不同性別和年齡組的結果同性別各年齡組的均數(shù)經(jīng)非參數(shù)多個獨立樣本Kruskal-Wallis檢驗，男(P=0.196)、女(P=0.085)各年齡組間差異均無統(tǒng)計學意義，相同年齡組不同性別間差異均有統(tǒng)計學意義。

2.4長春地區(qū)Ret-He參考區(qū)間的確立長春地區(qū)健康男性Ret-He參考區(qū)間為(30.2-36.0)pg，健康女性Ret-He參考區(qū)間為(29.1-35.4)pg。見表1。

2.5參考區(qū)間的驗證選擇長春市不同區(qū)域3家醫(yī)院對已建立的Ret-He參考區(qū)間進行驗證，分別是吉林大學第一醫(yī)院(朝陽區(qū))，吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院(二道區(qū))，吉林省人民醫(yī)院(朝陽區(qū))。三家醫(yī)院均使用Sysmex-XN系列全自動血液分析儀，在盡量保證分析前、分析中因素與參考區(qū)間提供實驗室相一致的基礎上，根據(jù)篩選標準分別選擇健康男女標本各20例，采集標本在本實驗室進行測定，檢測結果均落在參考范圍之內(nèi)。因此，本研究建立的Ret-He參考區(qū)間適用于長春地區(qū)。見表2。

表1 健康成人不同性別、年齡組的Ret-He的水平

表2 男性、女性Ret-He水平及參考區(qū)間

3 討論

Ret-He作為評價骨髓紅系增生程度指標，對臨床血液病的診斷與治療具有重要意義，尤其是鐵缺乏癥的早期診斷和監(jiān)測治療[7-10]。Mireille等[7]研究了1024名荷蘭成人Ret-He值和傳統(tǒng)鐵狀態(tài)參數(shù)的關系，發(fā)現(xiàn)Ret-He的檢測不受炎癥影響，并且在鐵缺乏早期即可出現(xiàn)降低。我們回顧性研究了30例在本院確診為缺鐵性貧血患者的資料，得到的Ret-He值為(23.5±5.5)pg，明顯低于健康人，兩者之間的差異有統(tǒng)計學意義(Z=-8.501，P<0.05)。由于檢驗項目的參考區(qū)間受種族、年齡、性別、生長發(fā)育、檢測儀器等眾多因素的影響而有差異[11]，建立本地區(qū)Ret-He正常參考區(qū)間的意義尤為重要。

有研究表明[12]隨著海拔高度和年日照時數(shù)的不斷增大，不同年齡紅細胞計數(shù)和血紅蛋白測定正常參考值也在不斷增大；同時隨著年平均相對濕度、年平均氣溫、年降水量的逐漸增大，不同年齡血紅蛋白和紅細胞參考值反而在減小。廠家提供的Ret-He參考區(qū)間為(27.0-32.6)pg，未按性別分組。因此，本研究建立了長春地區(qū)Ret-He正常參考區(qū)間，并按性別分組，男性為(30.2-36.0)pg、女性為(29.1-35.4)pg，與試劑廠商提供的參考區(qū)間相比，明顯右移。梁琴[13]等研究蘭州地區(qū)成人Ret-He參考區(qū)間為男性(37.00-47.11)pg，女性(35.45-45.35)pg，顯著高于本地區(qū)的參考區(qū)間，歸因于蘭州地處北方高原，海拔高于本地區(qū)，含氧稀薄，外周血中紅細胞數(shù)和血紅蛋白量代償性增加。唐玉鳳[14]等人研究的北京地區(qū)成人Ret-He參考區(qū)間為男(29.25-33.83)pg，女(26.52-30.04)pg，低于本地區(qū)的參考區(qū)間。劉小敏[15]等人研究的深圳地區(qū)成人Ret-He參考區(qū)間為男(32.96-39.28)pg，女(31.11-36.99)pg。這充分說明，不同人群由于地理環(huán)境、飲食習慣、氣候、濕度等差異，從而導致機體內(nèi)Ret-He含量的不同，進一步說明不同地區(qū)實驗室應建立各地區(qū)健康人群的Ret-He參考區(qū)間。本研究建立的Ret-He正常參考區(qū)間適用于長春地區(qū)，為臨床鐵缺乏及鐵利用障礙相關疾病的診斷和療效判斷提供可靠依據(jù)。