孕婦血清PIGF、sFlt-1及sEng聯(lián)合使用在預(yù)測子癇前期發(fā)病中的診斷價(jià)值分析

張 翀,賀 銳,趙翠生,王紅洲

(甘肅省婦幼保健院 臨床檢驗(yàn)中心,甘肅 蘭州730050)

妊娠期高血壓(GH)和子癇前期(PE)屬于妊娠期高血壓疾病,均在孕20周以后發(fā)病,其中PE因病情重且難以準(zhǔn)確預(yù)測而備受關(guān)注,研究表明PE發(fā)病的早晚與分娩早晚以及疾病預(yù)后有密切的關(guān)系,越來越多的證據(jù)表明,胎盤促血管形成因子和抗血管形成因子參與了PE的發(fā)病。本研究選擇促血管形成因子的胎盤生長因子(PlGF)和抗血管形成因子的可溶性血管生長因子受體-1(sFlt1)和可溶性內(nèi)皮因子(s-Eng)作為研究指標(biāo),檢測其在健康孕母、PE和GH患者血清中的濃度,分析其在子癇前期發(fā)病中的預(yù)測和診斷價(jià)值。

1 對象與方法

1.1一般資料

本研究采用前瞻性病例對照研究,納入孕20周后初次出現(xiàn)高血壓的孕婦為病例組,共245例,年齡為21-38歲(28.5±3.6),GH組57例,PE組共188例(其中早發(fā)型PE 67例)；每位病例匹配同孕齡,年齡相仿健康孕婦2-3名為健康對照組,共629例,年齡為23-39歲( 28.6±3.7)。

排除標(biāo)準(zhǔn):異常分娩、吸煙、多胎妊娠、孕期糖尿病、過度肥胖、孕期甲狀腺功能異常、急慢性肝臟疾病等內(nèi)外科合并癥及妊娠并發(fā)癥。

1.2儀器與試劑

酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測用酶標(biāo)儀為雷杜RT-6500酶標(biāo)分析儀；血清PLCF、sFlt-1和sEng濃度檢測用試劑盒購于上海藍(lán)基生物科技有限公司,具體實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.3方法

1.3.1樣本收集 抽取孕婦空腹靜脈血4 ml,以2 000 g相對離心力離心10 min,取上層血清置-70℃冰箱保存待用。

1.3.2檢測方法 本研究采用ELISA方法定量檢測研究對象血清PIGF、sFlt-1和sEng濃度,計(jì)算sFlt-1/PIGF和sEng/PIGF值。

1.3.3中位數(shù)倍數(shù)值(MoM)值的計(jì)算 因各篩查指標(biāo)濃度分布區(qū)間大,對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行對數(shù)轉(zhuǎn)化使數(shù)據(jù)分布較為集中；為消除孕周對篩查指標(biāo)濃度分布的影響,確定孕周各指標(biāo)中位數(shù)并與孕周進(jìn)行曲線擬合,確定最優(yōu)曲線,計(jì)算出各孕周各指標(biāo)中位數(shù),利用中位數(shù)倍數(shù)計(jì)算公式：MOM=標(biāo)記物檢測值/同孕周該標(biāo)記物的中位數(shù)[1],計(jì)算出各指標(biāo)各個(gè)MOM 值。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

計(jì)量資料以中位數(shù)(四分位間距)及均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,不同組別間的比較用非參數(shù)Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,各篩查指標(biāo)診斷效能的評價(jià)應(yīng)用ROC曲線進(jìn)行評估,P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1各組PIGFMOM、sFlt-1MOM、sEngMOM、sFlt-1/PIGFMOM和sEng/PIGFMOM的比較

研究對象血清指標(biāo)PIGF、sFlt-1、sEng、sFlt-1/PIGF和sEng/PIGF 檢測結(jié)果見表1,經(jīng)單因素方差分析 (One-Way ANOVA)顯示,各組孕婦各指標(biāo)數(shù)據(jù)分布方差不齊,經(jīng)過對檢測數(shù)據(jù)對數(shù)轉(zhuǎn)化、MoM數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化后,應(yīng)用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)進(jìn)行對照組、GH組和PE組間的兩兩比較,結(jié)果顯示：PE組各指標(biāo)與GH和正常對照組間均有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05。GH組與正常對照組間sFlt-1/PIGF MOM指標(biāo)差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05,其余各指標(biāo)在這兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P>0.05,結(jié)果見表2。

2.2各篩查指標(biāo)預(yù)測PE發(fā)病的診斷價(jià)值評估

應(yīng)用ROC曲線分析篩查指標(biāo)PIGFMOM、sFlt-1MOM、sEngMOM、sFlt-1/PIGFMOM和sEng/PIGFMOM預(yù)測PE發(fā)病的診斷價(jià)值,結(jié)果顯示：各指標(biāo)預(yù)測188例PE患者的發(fā)病中都有很好的預(yù)測診斷價(jià)值,并且sFlt-1/PIGFMOM和sEng/PIGFMOM 的曲線下面積(AUC)更大,診斷價(jià)值更高,結(jié)果見表3；以上指標(biāo)在預(yù)測67例早發(fā)型PE的發(fā)病中,其曲線下面積均較預(yù)測全部PE的優(yōu)勢更為明顯,AUC接近或超過90%,而且sFlt-1/PIGFMOM和sEng/PIGFMOM的診斷價(jià)值也優(yōu)于單獨(dú)指標(biāo)的使用,結(jié)果見表4。

表1 對照組、GH組和PE組各篩查指標(biāo)檢測結(jié)果[中位數(shù)(四分位間距)]

表2 對照組、GH組和PE組各篩查指標(biāo)MOM值濃度比較

注：*表示與對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05,△表示與GH 組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P<0.05。

表3 應(yīng)用ROC曲線評價(jià)各生化指標(biāo)診斷PE的應(yīng)用價(jià)值

表4 應(yīng)用ROC曲線評價(jià)各生化指標(biāo)診斷早發(fā)PE的應(yīng)用價(jià)值

3 討論

與妊娠相關(guān)的許多指標(biāo)其變化與孕周關(guān)系密切,因此無論建立正常值的參考區(qū)間還是進(jìn)行病例對照數(shù)據(jù)的比較,都要充分考慮孕周的因素,不考慮孕周因素而進(jìn)行的數(shù)據(jù)對比盡管有時(shí)體現(xiàn)了本質(zhì)上的差異,但科學(xué)性差,這在以往PE的研究中有體現(xiàn)[2-5]。MOM是產(chǎn)前疾病篩查中常用的用于消除孕周影響的數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化方法,本研究通過對檢測數(shù)據(jù)的對數(shù)轉(zhuǎn)化和MOM的使用,使數(shù)據(jù)分布更為集中,同時(shí)也消除了孕周差異帶來的影響,建立了健康孕婦20-40周孕95%的參考值區(qū)間,為病例組對照組間數(shù)據(jù)的比較打下了基礎(chǔ)。

PE是導(dǎo)致孕產(chǎn)婦死亡的主要原因之一,全球發(fā)病率3%-5%[6],發(fā)展中國家的發(fā)病率為10%左右[7]。盡管目前臨床上缺乏有效的治療方法,但有研究表明孕早期預(yù)防性治療可以改變子癇前期的病理生理學(xué)變化[8],因此探尋有效、實(shí)用的篩查、預(yù)測指標(biāo)十分重要。國外一些前瞻性的研究表明[9-13],PE患者有較低的PIGF濃度和較高的sFlt-1 、s-Eng濃度,并且有較可靠的預(yù)測、診斷和鑒別價(jià)值。本研究結(jié)果顯示反應(yīng)血管形成和抗血管形成平衡狀態(tài)的sFlt-1/PIGFMOM和sEng/PIGFMOM的診斷價(jià)值更高,ROC曲線下面積(AUC)達(dá)到0.87以上,并且有較高的診斷靈敏度和特異性,尤其值得關(guān)注的是,sFlt-1/PIGFMOM和sEng/PIGFMOM指標(biāo)在預(yù)測診斷早發(fā)型PE的價(jià)值更高,其ROC曲線下面積在0.9左右及以上,診斷靈敏度和特異性均達(dá)到0.93以上。

盡管PE目前的診斷是以血壓升高和蛋白尿?yàn)橐罁?jù),但血壓和蛋白尿在預(yù)測疾病進(jìn)展中缺乏應(yīng)有的價(jià)值；研究表明血管形成因子PIGF、抗血管形成因子sFlt-1和sEng在預(yù)測PE的發(fā)病中有較高的應(yīng)用價(jià)值,但以上指標(biāo)在預(yù)測疾病進(jìn)展和預(yù)后的進(jìn)一步前瞻性研究將是他們進(jìn)入臨床應(yīng)用階段的必要理論基礎(chǔ),也是我們下一步研究的重點(diǎn)。