低密度脂蛋白膽固醇勻相法與公式法間移動相關(guān)系數(shù)的研究

陳宣男 王志富 藺亞暉

[摘要] 目的 觀察血脂含量對血清低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）勻相法與公式法相關(guān)性的影響，比較LDL-C勻相法與五種公式法結(jié)果間的相關(guān)性，探討公式法的臨床應(yīng)用價(jià)值。 方法 募集2014年5月～2014年7月阜外醫(yī)院就診的患者17 488例，采用貝克曼AU5421全自動生化分析儀測定載脂蛋白（ApoB）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、LDL-C和三酰甘油（TG）。利用移動相關(guān)系數(shù)（Mr）觀察血脂含量對LDL-C勻相法與公式法相關(guān)性的影響，同時(shí)觀察勻相法與公式法的相關(guān)性和差異性。 結(jié)果 LDL-C勻相法和5種公式法的結(jié)果存在強(qiáng)相關(guān)（r > 0.95，P < 0.05），中位數(shù)偏差在-3.065～-8.145%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），Mr與ApoB、TC和HDL-C血清含量呈同向變化，在LDL-C中先下降后升高，在TG中先恒定后下降。Delong法、胡柏成法和吳秀茹法與LDL-C勻相法相關(guān)性最強(qiáng)（r = 0.97，P < 0.05）。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，LDL-C與ApoB和TC呈強(qiáng)相關(guān)，（r = 0.92，P < 0.05）。 結(jié)論 公式法與勻相法測定值呈顯著相關(guān)性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。如果有條件，建議實(shí)驗(yàn)室均采用勻相法進(jìn)行檢測。

[關(guān)鍵詞] 低密度脂蛋白膽固醇；移動相關(guān)系數(shù)；勻相法；Friedewald公式

[中圖分類號] R446.112 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2018）06（c）-0163-04

[Abstract] Objective To observe the effect of lipid levels on the correlation between homogeneous and formula assays for measuring low-density lipoprotein cholesterol （LDL-C）， and compare the relationship and difference between homogeneous and five formula assays， in order to explore the clinical application of formulas. Methods From May 2014 to July 2014， total 17 488 patients from Fuwai Hospital were recruited. All of apolipoprotein B （ApoB）， total cholesterol （TC）， high-density lipoprotein cholesterol （HDL-C）， LDL-C and total triglyceride （TG） were measured by an automatic biochemical analyzer （AU5421， Beckman）. The moving correlation coefficients （Moving r， Mr） were computed to evaluate lipid effects on the correlation between homogeneous assay and formulas. Meanwhile， observe the correlation and the difference between different methods. Results There were strong correlations between five formulas and homogeneous method （r > 0.95， P < 0.05）. Biases of median ranging were from -3.065% to -8.145%， the differences were statistically significant （P < 0.05）. Mrs changed with levels of ApoB， TC and HDL-C， which decreased firstly， then increased with LDL-C level， and hold constant， then decreased with TG level. The correlations between Delong， Hu Bocheng and Wu Xiuru methods were the strongest （r = 0.97， P < 0.05）. It was also found that LDL-C was correlated with ApoB and TC levels （r = 0.92，P < 0.05）. Conclusion There are significant correlations as well as the differences were statistically significant （P < 0.05） between the homogeneous assay and the formulas. It is recommended that the laboratory would employ the homogeneous assay.

[Key words] Low density lipoprotein cholesterol； Moving correlation coefficient； Homogeneous assay； Friedewald formula

《中國心血管病報(bào)告2016》顯示心腦血管疾病已成為居民死亡的首要病因[1]。低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）是心腦血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[2-5]。美國國家膽固醇教育計(jì)劃（National Cholesterol Education Program，NCEP）也將LDL-C含量作為治療高脂血癥的決策標(biāo)準(zhǔn)。目前LDL-C測定方法分為勻相法和公式法，前者適合自動化分析，能滿足臨床要求；后者由血脂其他實(shí)測指標(biāo)計(jì)算獲得，簡便、快速、經(jīng)濟(jì)，但也存在許多限制，如乳糜血、M型脂蛋白血癥時(shí)，由于載脂蛋白（ApoB）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、LDL-C和三酰甘油（TG）等測量誤差增大，導(dǎo)致公式法不準(zhǔn)，甚至不能應(yīng)用。本研究通過比較勻相法和公式法的相關(guān)性和差異性，探索LDL-C勻相法與公式法在不同ApoB、TC、HDL-C、LDL-C和TG水平下的變化趨勢，為正確使用公式提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

檢索2014年5月～2014年7月在中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院阜外醫(yī)院就診患者的血脂數(shù)據(jù)。

1.2 檢測方法

清晨空腹靜脈取血5 mL，血液自然凝固后，3000 r/min離心10 min分離血清。利用貝克曼AU5421全自動生化分析儀檢測血脂含量。LDL-C公式法如下[6]：

Friedewald法[7]：LDL-C（mmol/L） = TC - HDL-C - 0.45TG；

Delong法[8]：LDL-C（mmol/L）= TC - HDL-C - 0.37TG；

Planella法[9]：LDL-C（mmol/L）= 0.43TC - 0.32TG + 1.7ApoB - 0.27；

胡柏成法[10]：LDL-C（mmol/L）= 0.87TC - 0.9HDL-C - 0.32TG + 0.274；

吳秀茹法[11]：LDL-C（mmol/L）= 0.87TC - 0.9HDL-C -0.33TG + 0.27。

1.3 移動相關(guān)系數(shù)（Moving r，Mr）

觀察勻相法和公式法相關(guān)系數(shù)在不同血脂含量下的變化趨勢。本研究中的Mr定義為隨第三變量動態(tài)變化的另外兩變量子集的相關(guān)系數(shù)。如觀察不同TG含量對LDL-C勻相法和Friedewald法相關(guān)系數(shù)的影響，按TG含量排序，順序選取1-2000號的2000個(gè)樣本計(jì)算勻相法和Friedewald法相關(guān)系數(shù)，并計(jì)算中位數(shù)，然后選取2-2001號的2000個(gè)樣本計(jì)算相關(guān)系數(shù)和中位數(shù)，依次類推，以2000樣本量為窗口，按TG含量順序計(jì)算相關(guān)系數(shù)和中位數(shù)，最后以中位數(shù)為橫坐標(biāo)，相關(guān)系數(shù)為縱坐標(biāo)描繪LDL-C勻相法和Friedewald法相關(guān)系數(shù)隨TG含量的變化曲線。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用R3.4.2統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用中位數(shù)（M）和四分位數(shù)間距（Q）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，用配對Wilcoxon符號秩檢驗(yàn)比較組間差異，用Spearman秩相關(guān)進(jìn)行相關(guān)性檢驗(yàn)。雙側(cè)檢驗(yàn)，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 基本信息

共收集了17 488例來阜外醫(yī)院就診患者的血脂數(shù)據(jù)，年齡和血脂呈非正態(tài)分布（Kolmogorov-Smirnov正態(tài)性檢驗(yàn)，P < 0.01），采用中位數(shù)和四分位數(shù)間距進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述。見表1。

2.2 LDL-C勻相法與公式法各參數(shù)的相關(guān)性

LDL-C與ApoB和TC相關(guān)性較高（r = 0.92，P < 0.05），與HDL-C和TG相關(guān)性較低（r = 0.21、0.10，P < 0.05）。見圖1。

2.3 勻相法與公式法Mr曲線

5組Mr隨ApoB、TC和HDL-C血清含量的升高而升高，在LDL-C<2.2 mmol/L時(shí)，Mr隨LDL-C升高而降低，在LDL-C>2.2 mmol/L時(shí)，Mr隨LDL-C升高而升高，在LDL-C>3.5 mmol/L時(shí)呈線性增加。TG<3.5 mmol/L時(shí)，Mr維持恒定，當(dāng)TG>3.5 mmol/L時(shí)，Mr逐漸下降。見圖2，封四。

2.4 勻相法與公式法的相關(guān)性和差異性

5種LDL-C檢測法間均具有顯著相關(guān)性（r > 0.95，P < 0.05），其中Delong法、胡柏成法和吳秀茹法與勻相法相關(guān)性最強(qiáng)（r = 0.97，P < 0.05）。見圖3。公式法與勻相法中值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見表2。

3討論

本研究首次利用Mr描述血脂濃度對LDL-C勻相法與公式法相關(guān)性的影響，在大樣本人群中繪制了Mr變化曲線。發(fā)現(xiàn)Mr在ApoB、TC和HDL-C中呈遞增變化，在LDL-C中先降后升，在TG中先水平后下降。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，公式法與勻相法差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。

LDL-C的參考方法是美國疾病控制預(yù)防中心推薦的β定量法[12]，精準(zhǔn)度高，重復(fù)性好，但需要超速離機(jī)，技術(shù)難度大，不適合臨床常規(guī)工作。1972年提出的Friedewald公式[7]（F公式）計(jì)算的LDL-C與參考方法相關(guān)性很強(qiáng)，被NCEP推薦作為實(shí)驗(yàn)室LDL-C常規(guī)測定法而廣泛使用。隨后又有多人提出了LDL-C計(jì)算公式。但均存在前提條件：如不能存在乳糜微粒，TG主要包含在VLDL中，VLDL-C/TG恒定等。公式法中血脂參數(shù)任測定不準(zhǔn)會影響計(jì)算結(jié)果[13-15]。

文獻(xiàn)回顧[16-17]發(fā)現(xiàn)，在TC、TG和HDL-C符合NCEP性能要求的條件下，TG<2.26 mmol/L時(shí)F公式結(jié)果較可靠。TG在2.26～4.52 mmol/L時(shí)，除部分繼發(fā)性高脂蛋白血癥標(biāo)本外，大部分結(jié)果可接受。TG>4.52 mmol/L、Ⅲ型高脂蛋白血癥[18]、乳糜微粒（CM）血癥和異常脂蛋白血癥時(shí)結(jié)果不可靠。本研究通過Mr發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)公式的可靠性呈連續(xù)性變化，在TG<3.5 mmol/L時(shí)比較可靠，隨后隨著TG增高相關(guān)性急劇下降，證實(shí)了前人的觀察結(jié)果。Mr比分段分析能更詳盡的描繪LDL-C勻相法與公式法相關(guān)性隨觀察指標(biāo)的血清含量的動態(tài)變化，更加直觀和準(zhǔn)確。

Mr分析發(fā)現(xiàn)，勻相法和公式法的相關(guān)性在LDL-C中呈開口向上的拋物線，實(shí)測LDL-C約2.2 mmol/L時(shí)，相關(guān)性最低。當(dāng)大于3.5 mmol/L后呈線性增長，可能是由于LDL-C在TC中所占的比例改變所致。隨著LDL-C含量升高，TC中干擾成分比例下降，使公式法與勻相法越來越一致。但在極低LDL-C濃度時(shí)，相關(guān)系數(shù)呈現(xiàn)下降的趨勢有待進(jìn)一步研究。

公式法均未考慮中間密度脂蛋白（IDL）和載脂蛋白a[LP（a）]中的膽固醇對計(jì)算結(jié)果的影響[19-20]，正常人血清中IDL-C很少，但血脂紊亂患者TG和IDL常升高，高TG血癥患者中IDL-C也常增加，血清LP（a）升高也會伴有LDL-C升高，這些情況下公式法無法計(jì)算出可靠的LDL-C值，但勻相法測定的LDL-C包含了IDL和LP（a）中的膽固醇，比公式法更可靠。因此，NCEP建議分析性能不符合標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用更精準(zhǔn)的LDL-C勻相法。中華醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)分會血脂專家委員會制訂的《關(guān)于臨床血脂測定的建議》也推薦勻相法作為臨床實(shí)驗(yàn)室測定LDL-C的常規(guī)方法[21]。通過Mr分析發(fā)現(xiàn)，干擾因素對公式法的影響呈漸變趨勢，只有在某些范圍內(nèi)才和勻相法呈強(qiáng)相關(guān)。本研究為加速勻相法推廣，使公式法盡快退出歷史舞臺提供了強(qiáng)有力的證據(jù)。

綜上所述，就5種公式法比較而言，在分析性能達(dá)標(biāo)的實(shí)驗(yàn)室，可用Delong法、胡柏成法和吳秀茹法計(jì)算LDL-C含量。但若標(biāo)本ApoB、TC、HDL-C含量過低或TG含量過高，則應(yīng)使用均相法測定。

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