高脂血標(biāo)本對纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物檢測的干擾及消除

郭怡華

【摘要】目的：建立高脂血標(biāo)本纖維蛋白（原）檢測的稀釋法解決方案。方法：隨機(jī)收集30例高脂血標(biāo)本，分別檢測原血漿和8倍稀釋后纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物結(jié)果，其中稀釋前后均有結(jié)果的20例，將結(jié)果的兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)線性回歸分析，對回歸方程進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。結(jié)果：原血漿與8倍稀釋后血漿的纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物具有線性相關(guān)特征。經(jīng)過相應(yīng)回歸方程計(jì)算，稀釋前后數(shù)據(jù)無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論：該解決方案可以適用于臨床實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)重脂血標(biāo)本的纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物的檢測。

【關(guān)鍵詞】高脂血標(biāo)本；纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物；稀釋法

[中圖分類號]R4 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A [文章編號]2096-5249（2018）04-046-01

臨床檢查中常因高脂血癥或者注射脂肪乳，導(dǎo)致血液標(biāo)本出現(xiàn)不同程度的混濁，若未提取進(jìn)行預(yù)篩選、預(yù)處理，也會因高脂血標(biāo)本對臨床生化、放射免疫、凝血及PCR等檢驗(yàn)項(xiàng)目的準(zhǔn)確性受到極大影響。本文主要針對纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物，即FDP檢測中脂血標(biāo)本產(chǎn)生的干擾與消除辦法。

目前，光學(xué)法全自動凝血分析儀在醫(yī)學(xué)臨床實(shí)驗(yàn)室已得到普遍應(yīng)用，為出血和血栓性疾病診斷、溶栓與抗凝治療監(jiān)測及療效觀察提供了簡便、迅速、準(zhǔn)確、可靠的平臺，是目前血栓/止血實(shí)驗(yàn)室中最常用的設(shè)備。光學(xué)法全自動凝血分析儀的檢測原理主要有散射比濁法、發(fā)色底物法和免疫比濁法等，除結(jié)構(gòu)簡單以及靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)外，其主要缺點(diǎn)是易受特意血漿等干擾，尤其易受血漿濁度的干擾。[1]

我們科室通過光度測定來判斷微粒懸液濁度的變化，包被有特異性FDP單克隆抗體的微粒乳膠懸濁液，與待檢測血漿混合，用以測定血漿的FDP水平，抗原抗體反應(yīng)發(fā)生，從而導(dǎo)致乳膠微粒的凝集，誘導(dǎo)反應(yīng)介質(zhì)濁度的增加，濁度的增加反映在吸光度的增加上，后者可通過光度計(jì)來測量，吸光度的增加反應(yīng)測試樣本中的FDP水平。

散射比濁法是凝血項(xiàng)目最常用的檢測方法之一，而在實(shí)驗(yàn)室檢測工作中經(jīng)常遇到標(biāo)本嚴(yán)重脂血的情況，即使常規(guī)離心3000r/min離心10min后，血漿依然呈現(xiàn)乳白色，渾濁程度嚴(yán)重，凝血分析儀無法檢測。基于這一臨床實(shí)驗(yàn)室常見問題，我們利用分析儀能夠直接做稀釋模式的特點(diǎn)，建立稀釋法，試圖解決嚴(yán)重脂血標(biāo)本干擾FDP檢測的問題。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本資料 取2017年9月至2017年12月期間離心后外觀嚴(yán)重脂血標(biāo)本20例來自我院門診及住院患者，枸櫞酸鈉抗凝，抗凝比例1：9。

1.2 儀器和試劑 日本Sysmex CA150全自動血凝分析儀，KHB離心機(jī)，F(xiàn)DP 為BIOLINKS公司生產(chǎn)的配套檢測試劑盒。

1.3 方法

1.3.1標(biāo)本準(zhǔn)備與檢測 30例脂血標(biāo)本以3000r/min離心10min。未稀釋組直接用Sysmex CA150檢測，稀釋組使用Sysmex CA150稀釋模式稀釋8倍檢測。獲得稀釋前與稀釋后兩組檢測數(shù)據(jù)。

1.3.2數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)回歸分析 有10個(gè)標(biāo)本儀器檢測不出稀釋前結(jié)果。另外20個(gè)標(biāo)本分別有稀釋前及稀釋后結(jié)果。對后20例標(biāo)本的稀釋前與稀釋后兩組數(shù)據(jù)分別做散點(diǎn)圖，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)直線回歸分析。

1.3.3方法學(xué)驗(yàn)證 將后20例標(biāo)本稀釋后結(jié)果與稀釋前結(jié)果做統(tǒng)計(jì)學(xué)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 散點(diǎn)圖分析 分別以后20例稀釋前檢測結(jié)果為橫坐標(biāo)，稀釋后檢測結(jié)果為縱坐標(biāo)，繪制散點(diǎn)圖。結(jié)果顯示稀釋前后檢測結(jié)果成線性相關(guān)。

2.2 方法學(xué)驗(yàn)證 后20例嚴(yán)重脂血標(biāo)本稀釋后的檢測結(jié)果按回歸方程換算，與稀釋前結(jié)果進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P>0.05，結(jié)果顯示兩組數(shù)據(jù)無顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

3 討論

高脂血癥是因脂肪代謝異常或者脂肪運(yùn)轉(zhuǎn)異常，導(dǎo)致血漿中1種或者多種脂質(zhì)高于正常水平，臨床多表現(xiàn)為血漿中膽固醇與三酰甘油升高。我國現(xiàn)今正常成人血清膽固醇的正常值范圍為<5.20mmol/L，5.23～5.69mmol/L為臨界值升高，而>5.72mmol/L為升高，女性血清膽固醇水平略高于男性；兒童血清總膽固醇正常值應(yīng)<4.40mmol/L，4.4～5.1mmol/L為臨界值，≥5.2mmol/L為升高。高三酰甘油血癥是一種家族性三酰甘油合成與降解障礙[2]。正常三酰甘油水平兒童<1.13mmol/L，成人<1.7mmol/L；而當(dāng)三酰甘油水平超過1.7mmol/L時(shí)則提示為升高。

脂血標(biāo)本即血液中血脂濃度的異常增高，典型表現(xiàn)是血漿為白色或乳白色，其主要成分是乳糜微粒和極低密度脂蛋白，3000r/min離心10min后其乳糜成分仍然懸浮于血漿中[3]。而血漿中的乳糜成分可干擾散射光檢測[4]，造成結(jié)果檢測不出。在日常工作中，遇到嚴(yán)重脂血標(biāo)本時(shí)，一般有兩種處理方法：一種時(shí)經(jīng)高速離心后再檢測，結(jié)果準(zhǔn)確，可信度高，是最好的解決方法。但是一般血凝實(shí)驗(yàn)室并不配備高速離心機(jī)。另一種是手工法，但是存在操作繁瑣和結(jié)果可信度不高等缺點(diǎn)。

本實(shí)驗(yàn)中采用稀釋法，根據(jù)前10例結(jié)果顯示，用此方法可以檢測出常規(guī)無法檢測出的脂血標(biāo)本，后20例結(jié)果顯示稀釋前后檢測結(jié)果有較高相關(guān)程度的線性關(guān)系。試驗(yàn)結(jié)果表明經(jīng)回歸計(jì)算后稀釋前后結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。證明稀釋法檢測嚴(yán)重脂血標(biāo)本FDP是可行的，可以用來滿足臨床的檢測需求。

參考文獻(xiàn)：

[1]李強(qiáng)等.稀釋法在嚴(yán)重脂血標(biāo)本凝血檢測中的應(yīng)用 [J].血栓與止血學(xué)， 2011， 17（4）： 172-174.

[2]王雪.高脂血標(biāo)本對臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目的干擾及消除[J].醫(yī)藥， 2017（1）： 00268-00268.

[3] KROLL MH， ELIN A RJ.”Clinical laboratory analysis of interference”[J]， Clinical Chemistry.1994， （40）： 1996-2005.

[4]魏明競。應(yīng)重視血清標(biāo)本的外觀檢查[J] .臨床檢驗(yàn)雜志， 1996， 14（5）： 271-272.