間變性淋巴瘤激酶在神經(jīng)母細(xì)胞瘤患兒病理組織中的表達(dá)及臨床意義

黃體龍 李麗娟(通訊作者)

（昆明市兒童醫(yī)院血液科 云南 昆明 650000）

神經(jīng)母細(xì)胞瘤（NB）占小兒惡性實(shí)體腫瘤10%和兒童腫瘤死亡率的15%[1],NB預(yù)后較差。筆者采用IHC方法分析ALK在NB患兒的表達(dá)特點(diǎn)。

1.資料與方法

1.1 一般資料

收集2010年10月至2016年1月昆明市兒童醫(yī)院血液腫瘤科收治的90例經(jīng)病理初次證實(shí)NB患兒臨床資料，平均年齡（9.53±3.62）歲，35例患兒進(jìn)行Nmyc基因擴(kuò)增檢測(cè)，8例陽(yáng)性，27例陰性，根據(jù)INSS分期將Ⅰ+Ⅱ+ⅣS期NB患兒分為低危組，INSSⅢ+Ⅳ期分為高危組，根據(jù)INSS分期和Nmyc基因擴(kuò)增檢測(cè)對(duì)NB患兒采取手術(shù)或化療。

1.2 ALK檢測(cè)方法

免疫組織化學(xué)檢測(cè)：手術(shù)或組織活檢取得組織標(biāo)本后，制作10%福爾馬林固定石蠟包埋細(xì)胞學(xué)蠟塊，常規(guī)切片，脫蠟，EDTA熱修復(fù)法修復(fù)抗原，滴加一抗，37℃溫箱中孵育40min，PBS緩沖液中沖洗5次，滴加二抗，37℃溫箱中孵育30min，PBS緩沖液中沖洗5次，加DAB顯色劑，清水沖洗5min,蘇木精染色2rnin,中性樹膠封片。高倍鏡下取4個(gè)不同視野共計(jì)數(shù)800個(gè)細(xì)胞，計(jì)算ALK陽(yáng)性細(xì)胞比例，0～4分代表ALK細(xì)胞比例，未發(fā)現(xiàn)ALK細(xì)胞為0分，ALK陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≤10%為1分，11%＜ALK陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜50%為2分，51%＜ALK陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜75%為3分，ALK陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞75%為4分。0分～3分表示染色強(qiáng)度，分值越高，染色越重。ALK細(xì)胞比例評(píng)分和染色評(píng)分結(jié)果的積為最終結(jié)果，0分為陰性（-），1～3為弱陽(yáng)性（+），3～7為中度陽(yáng)性（++），7～12分為強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。-、+為低表達(dá)，++、+++為高表達(dá)。

1.3 隨訪

所有患者隨訪期間截止2018年2月。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

SPSS22.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 ALK表達(dá)情況

ALK高表達(dá)于NB患兒臨床特征見表1。

表1 ALK高表達(dá)于NB患兒臨床特征的關(guān)系[例（%）]

2.2 NB患兒生存狀態(tài)

NB患兒存活狀態(tài)見表2。

表2 NB患兒存活狀態(tài)的（n，%）

3.討論

正常情況下，ALK表達(dá)于人體胚胎的神經(jīng)系統(tǒng)[2]，出生以后ALK除在腦組織中較少表達(dá)外，其他組織均不表達(dá)ALK，ALK基因異?？蓪?dǎo)致細(xì)胞增殖與凋亡失調(diào)，引起腫瘤。目前ALK與NB疾病預(yù)后的關(guān)系尚不明確。

本研究發(fā)現(xiàn)ALK高表達(dá)與年齡存在一定的關(guān)系，NB低危組和高危組、ALK高度表達(dá)組和低度表達(dá)組的生存率明顯不同，INSS分期高危NB患兒死亡率顯著高于INSS分期低危組，ALK高度表達(dá)NB死亡率顯著高于ALK低表達(dá)患兒。

總之，我們認(rèn)為ALK在國(guó)內(nèi)NB患兒中陽(yáng)性表達(dá)率較高，ALK高表達(dá)與NB患兒不良預(yù)后有著密切的關(guān)系。