干擾素聯合光動力療法對尖銳濕疣患者皮損朗格漢斯細胞的影響

葉艷芬

廣東省佛山市南海區人民醫院皮膚科，廣東佛山 528200

尖銳濕疣（CA）是由人乳頭瘤病毒感染引起的性傳播疾病，常發生在肛門及外生殖器等部位，好發于中青年女性，臨床表現為異物感、痛、癢感或性交痛、便血等癥狀，嚴重影響了患者的正常生活[1]。目前，針對CA 主要通過光動力療法（PDT）治療，用于治療多種腫瘤及良性皮膚病變，具有良好的臨床效果[2]，有研究表明，CA 患者皮損朗格漢斯細胞（LC）數量減少，導致表皮內的免疫細胞失去活性，影響治療療效[3]。而干擾素是具有多種功能的活性蛋白質( 主要是糖蛋白)，也是一種廣譜抗病毒劑，已被廣泛應用于多種感染性疾病治療中[4]，但兩者聯合治療LC 效果還有待考究，對此，本研究通過干擾素聯合PDT 治療CA，探討其對LC 的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013 年12 月～ 2016 年12 月本院收治的 CA 患者 100 例，納入標準：（1）經臨床癥狀、實驗室、影像學或 MRI 等檢查證實為 CA[5]；（2）無精神病病史；（3）無體質過敏者；（4）患者或其家屬簽署知情同意書；排除標準：（1）妊娠及哺乳特殊人群；（2）院前1 個月有糖皮質激素、免疫、抗炎、抗凝等治療史；（3）有心、肝、腎等嚴重性疾病；（4）拒絕或終止本研究者；隨機分為干光組和單光組，每組50 例，干光組男21 例，女29例，年齡 28 ～ 70 歲，平均（49.2±20.6）歲，病程15 ～ 45d、平均（30.54±15.25）d，疣體直徑 2 ～13mm、平均（6.45±0.81）mm，數量 3 ～ 8 個、平均（5.72±0.70）個，單光組男 21 例，女 29 例，年齡28 ～ 70 歲，平均（49.2±20.6）歲，病程 14 ～ 44d、平均（30.33±15.22）d，疣體直徑 2 ～ 12mm、平均（6.45±0.67）mm，數量 2 ～ 7 個、平均（5.61±0.72）個，本研究經我院倫理委員會審批且通過，兩組在性別、年齡、病程、疣體直徑、數量等比較差異無統計學意義（P＞ 0.05），具有可比性。

1.2 方法

所有患者在治療前應保持充足的睡眠時間和良好的睡眠質量，同時謹遵醫囑適當攝入部分營養，單光組給予PDT 治療，即通過0.4% 的氯己定溶液對疣體及周邊黏膜消毒，在疣體部位放置適當大小的滴有20% 的5- 氨基酮戊酸（上海復旦張江生物醫藥股份有限公司，118g/ 瓶）溶液的脫脂棉球，范圍為覆蓋至皮損周邊外約2cm，封包3h 后，采用光動力半導體激光治療儀（武漢博激世紀科技有限公司，輸出波長（635±5）nm，連續可調輸出功率0～ 300mw）局部給予照射能量100mW 的100J/cm2的半導體激光垂直照射，20 ～ 30min/ 次，每次間隔7 ～ 10d，以患者耐受為宜，共3 個月；干光組在此基礎上給予干擾素治療，即皮損內注射50 萬U 的重組人干擾素a-2b 干擾素，隔日1 次，療程為8 周。

1.3 指標觀察和標準[6-7]

所有患者于治療前后在皮損局部取材，10% 福爾馬林固定、制片后，依照CD1a 免疫組化試劑盒（購自英國Novocastra Laboratiories 有限公司）說明書進行染色后，鏡下見細胞膜或胞質呈黃褐色樹枝狀突起的細胞即CD1a 染色陽性的LC 取5 個LC分布最為密集的高倍視野，計數LC 數量和計算陽性細胞密度=5 個視野陽性細胞總數/5 個視野總細胞數，計3 次，取平均值；統計分析所有患者治療前后的LC 數量、陽性細胞密度、治療療效、復發率和不良反應，其中療效標準[5]：HPV 免疫法和5% 醋酸白實驗等臨床檢查陽性、疣體消退＜ 30%、皮膚黏膜無改善為無效，臨床檢查陰性、疣體消退30%～ 70%、皮膚黏膜恢復為有效，臨床檢查陰性、疣體消退＞ 70%、皮膚黏膜基本恢復正常為顯效，臨床檢查陰性、疣體完全消失、皮膚黏膜正常、3 個月內無復發為基本治愈，治療有效率=（基本治愈數+顯效數+ 有效數）/ 總例數×100%，治療3 個月后出現新疣體、HPV 免疫法和5% 醋酸白實驗陽性為復發，干擾素的不良反應：惡心、嘔吐、嗜睡等癥狀，光動力療法的不良反應：皮膚紅腫、水泡等癥狀。

1.4 統計學數據處理

采用SPSS22.0 統計軟件處理數據，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗，計數資料以百分比表示，采用χ2檢驗，P＜ 0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者治療前后LC數量、陽性細胞密度比較

兩組治療前LC 數量、陽性細胞密度基本相同，差異無統計學意義（P＞ 0.05）；干光組和單光組治療后LC 數量、陽性細胞密度明顯高于治療前，干光組治療后LC 數量、陽性細胞密度明顯高于單光組，差異有統計學意義（P＜ 0.05）。見表1。

表1 兩組治療前后LC數量、陽性細胞密度比較（± s）

組別 n LC數量（個） 陽性細胞密度（%）治療前 治療后 治療前 治療后單光組 50 5.62±0.58 8.12±0.91 2.42±0.52 3.01±0.62干光組 50 5.60±0.57 10.85±1.21 2.44±0.55 4.84±0.73 t 0.174 12.750 0.187 13.511 P 0.894 ＜0.05 0.882 ＜0.05

2.2 兩組患者治療有效率比較。

干光組治療有效率明顯高于單光組，差異有統計學意義（P＜ 0.05）。見表 2。

2.3 兩組患者復發率比較。

隨訪12 個月后，干光組復發率為6.25%（3/48），明顯低于單光組的 23.81%（10/42），差異有統計學意義（χ2=5.589，P＜ 0.05），見圖 1。

2.4 兩組不良反應比較

干光組無惡心、嘔吐、嗜睡等不良反應，單光組無皮膚紅腫、水泡等不良反應。

圖1 兩組復發率比較

3 討論

CA 是臨床常見的性傳播疾病之一，主要表現為肛門生殖器增生性損害，隨著近年來生活節奏的改變，該發病率有明顯上升的趨勢，由患者全身免疫功能下降或局部免疫功能紊亂引起，表現為生殖器、肛周等部位出現丘疹、肉質贅生物等癥狀，嚴重影響患者的身心健康[8-9]。

PDT 是一種聯合應用5- 氨基酮戊酸及相應光源，通過光動力學反應選擇性破壞病變組織的全新技術，已被廣泛應用于各類皮膚病的治療中，能夠有效的治療CA，但可能由于療效單一，仍有部分患者病情頑固或出現復發[10-11]。而干擾素是一種由單核細胞和淋巴細胞產生的多功能活性蛋白質，在細胞上具有廣譜的抗病毒、影響細胞生長，以及分化、調節免疫功能等多種生物活性[12-13]。

此外，LC 是位于表皮內的樹突狀細胞，向T 淋巴細胞提呈抗原的同時，激活T 淋巴細胞進行免疫應答，具有較強的抗原提呈作用，提示其水平可作為局部皮膚免疫狀態的重要指標[14-15]。

本研究通過給予CA 患者PDT 治療及在此基礎上給予干擾素治療，結果發現干光組治療后LC數量、陽性細胞密度明顯高于單光組，干光組治療有效率96.00% 明顯高于單光組84.00%，干擾素聯合PDT 有效改善了患者LC 水平，提高了患者的治療療效。這有可能由于PDT 能夠刺激多種細胞因子、生長因子、補體分子等從而產生或增強機體的免疫反應而提高抗HPV 活性[16-17]。而在本研究聯合干擾素的治療下，可能由于其能夠有效均勻地散布至病灶部位并與宿主細胞表面上的干擾素受體相結合[18]，進而干擾病毒復制、轉錄所需蛋白的合成，增強病灶部位多種免疫細胞（如淋巴細胞、吞噬細胞、自然殺傷細胞等）的細胞毒性、吞噬殺傷能力，進而提升LC 的生存環境，使LC 得以分化，這與俞鶯等的研究結果部分一致[12-13]，進一步提示干擾素可有效抑制細胞毒性，阻止其繁衍分化，從而激活正常細胞，促使其能夠正常分解和增強機體免疫功能，從而達治療的療效。

同時，本研究對患者隨訪12 個月后，干光組復發率明顯低于單光組。這可能是由于兩者聯合更能提升機體的免疫功能，調節免疫機制，LC 的微環境得到改善，使機體可長期有效抑制HPV 的病毒的復制，從而降低了CA 復發的發生。此外，本研究中干光組和單光組均無惡心、嘔吐、嗜睡、皮膚紅腫、水泡等不良反應，表明干擾素聯合PDT 治療CA具有良好的安全性。

綜上所述，干擾素聯合PDT 可有效改善CA 患者LC 水平，有利于提高患者的治療療效和減少復發，且具有良好的安全性，值得臨床作進一步推廣。