不同高血壓分級的2型糖尿病患者血清LGR4水平變化及意義

張燦，李寶新，郭淑芹，常文龍，王翯，姚琪，張云良

(1承德醫學院，河北承德067000；2保定市第一中心醫院)

流行病學研究表明，我國糖尿病的患病率為11.6%[1]。糖尿病患者往往合并高血壓，高血壓可使血糖水平控制欠佳，兩者相互影響、相互加重，可能存在著一定的聯系。富含亮氨酸的G蛋白偶聯受體-4(LGR4)也稱CPR48，是LCR家族成員，目前仍是一個孤兒受體，在下丘腦中高度表達，在體內分布廣泛，在腎臟、腎上腺、骨骼等處均有表達，參與機體能量代謝平衡的調節，影響血壓、血糖的調節[2]。我們檢測了不同高血壓分級的糖尿病患者血清LGR4水平變化，探討血清LGR4水平與糖尿病患者高血壓程度的關系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2015年9月～2017年4月在保定市第一中心醫院內分泌科住院的2型糖尿病患者240例，年齡40～70歲，其中男120例、女120例，BMI(25.99±3.40)kg/m2，糖尿病病程(5.59±3.84)年，高血壓病程(6.12±3.41)年。均符合1999年世界衛生組織2型糖尿病診斷標準[4]。空腹靜脈血糖(FBG)為(9.16±3.20)mmol/L，TC(5.17±0.80)mmol/L，TG(1.67±0.28)mmol/L，ALT(23.55±6.45)U/L，血肌酐(Scr)(75.04±14.74)μmol/L，糖化血紅蛋白(HbA1c)8.82%±2.01%。連續3 d在清晨安靜狀態下，測量雙上肢的收縮壓(SBP)與舒張壓(DBP)，依據2010年中國高血壓防治指南[3]推薦的測量要求及高血壓診斷和分級標準，將受試者分為單純2型糖尿病組[DS組，SBP ≤139 mmHg和(或)DBP≤89 mmHg]、2型糖尿病合并高血壓1級組[DH1組，SBP 140～159 mmHg和(或)DBP 90～99 mmHg]、2型糖尿病合并高血壓2級組[DH2組，SBP 160～179 mmHg和(或)DBP 100～109 mmHg]、2型糖尿病合并高血壓3級組[DH3組，SBP≥180 mmHg和(或)DBP≥110 mmHg]各60例。排除標準：1型糖尿病、妊娠期糖尿病及特殊類型糖尿病；糖尿病病程15年以上；合并嚴重心、腦、血液等系統疾病；伴有嚴重急慢性糖尿病并發癥(糖尿病酮癥酸中毒、高血糖高滲狀態等)；肝腎功能嚴重異常者。選取同期60例健康體檢者作為健康對照組(NS組)，其中男30例、女30例。本研究獲保定市第一中心醫院倫理委員會批準，所有受試者均簽署知情同意書。

1.2 血清LGR4水平檢測 各組均禁食8～10 h后，于次日清晨采集空腹靜脈血5 mL，以4 000 r/min離心5 min，采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定血清LGR4水平，上海酶聯免疫生物科技有限公司提供試劑盒，操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。

2 結果

2.1 各組血清LGR4水平比較 NS組、DS組、DH1組、DH2組、DH3組血清LGR4水平分別為(40.16±14.31)、(48.22±16.08)、(53.74±16.09)、(58.98±13.63)、(66.65±14.02)pg/mL，DS組、DH1組、DH2組、DH3組血清LGR4水平均高于NS組，DH2組、DH3組血清LGR4水平均高于DS組，DH3血清LGR4水平均高于DH1組、DH2組(P均<0.05)。

2.2 血清LGR4與血壓、血糖的相關性 LGR4與SBP(r=0.29)、DBP(r=0.20)、高血壓病程(r=0.17)、HbA1c(r=0.13)呈正相關(P均<0.01)。

2.3 血清LGR4水平與各影響因素相關性分析 血清LGR4水平與SBP(β=0.27)、DSP(β=0.22)均呈正相關(P均<0.05)。以LGR4為因變量的逐步多元線性回歸中，SBP、DSP是影響LGR4的主要因素。見表1。

表1 糖尿病患者血清LGR4水平的影響因素

3 討論

隨著生活水平的提高，2型糖尿病和高血壓已經成為威脅人類健康的兩大常見疾病。糖尿病人群中高血壓發生早，其患病率高峰較非糖尿病人群提前，約50%的糖尿病患者合并有血壓的升高[4,5]。長期的血糖控制不佳會引起腎臟損害，而腎臟的損害可導致血壓升高；高血糖狀態易引起體內血管壁的損害，使得血管阻力增大，進而血壓增高[6]。同時，高血壓也會反過來影響加重腎臟負擔，促進血管硬化，增加血糖的控制難度，兩者互為影響，相互促進，共同影響著患者的健康[7]。LGR4在體內廣泛分布，有動物實驗研究顯示當LGR4基因敲除以后，大鼠的血糖、血壓均會有明顯的好轉[2]。但是，目前對LGR4的研究多集中在腫瘤和骨代謝方面，在內分泌代謝方面研究較少。本文旨在以不同高血壓等級的2型糖尿病患者為研究對象，檢測體內LGR4的水平變化并進行分析。

LGR由于其獨特的長鏈富含亮氨酸重復細胞外結構域的自然特性而被定義。LGR4是富含亮氨酸G蛋白偶聯受體家族的成員[8]。區別于通過G蛋白發揮作用的經典G蛋白偶聯受體，LGR4主要通過Wnt/β-連環蛋白調節細胞增殖、分化以及維持成熟細胞穩態，LGR4廣泛在組織中表達，包括生殖系統、泌尿系統、感覺系統、消化系統、內分泌系統以及中樞神經系統，在細胞發展過程中，發揮著多重的功能[2]。有研究認為，LGR4是Wnt信號轉導的目標基因，LGR4作為RSPO的協同受體介導Wnt/β-連環蛋白(Wnt/β-catenin)的信號通路，激活的Wnt信號通路可以降低血管壁的彈性，使血管硬化，進而增加血管阻力，血壓升高；當LGR4基因突變或者被敲除后，Wnt靶基因的表達就會受到抑制，從而阻止Wnt/β-catenin聯蛋白信號通路，使得高血壓狀態得到一定的緩解[9,10]。反過來，Wnt信號通路異常激活也會引起LGR4的表達增加[11]。本研究發現，DS組、DH1組、DH2組、DH3組血清LGR4水平均高于NS組，提示LGR4的表達與血壓有關；DH3血清LGR4水平高低于DH1組、DH2組，LGR4與SBP、DBP、高血壓病程呈正相關，提示LGR4可能隨著血壓等級升高呈升高趨勢，可能與LGR4影響Wnt通路、進而影響患者的血壓變化有關。

除此之外，R蛋白是Wnt /β-catenin信號通路的受體激動劑，富含亮氨酸的G蛋白偶聯受體也是R蛋白的受體[12]。研究表明，LGR4蛋白與其家族成員LGR5、LGR6共同構成R．spondins(RSPOs)受體，受體與RSPOs結合后，不僅可以增強Wnt/β-catenin信號通路的活性，還有助于能量代謝的調節[13]。RSPOs家族蛋白被認為是配體的LGR4亞科。胰島素可以正向調節RSPO1和RSPO3 mRNA表達[14]。LGR4通過與RSPOs蛋白結合都可以放大Wnt信號轉導通路，非經典的Wnt信號通路可以影響葡萄糖外周體的表達，從而影響外周組織對胰島素的利用，此外Wnt信號通路可以調節胰高血糖素-1的生成，與血糖的關系密切[9]；LGR4在胰島細胞中高度表達，胰島細胞可以分泌胰島素和胰高血糖素參與機體血糖的調節[2]。本研究發現，DS組、DH1組、DH2組、DH3組血清LGR4水平均高于NS組，提示糖尿病患者血清LGR4水平增高，表明LGR4可能參與血糖的調節；DH2組、DH3組血清LGR4水平均高于DS組，DH3血清LGR4水平均高于DH1組、DH2組，提示相比較于單純的糖尿病患者，糖尿病合并高血壓患者中血清LGR4水平也顯著上升，LGR4可能也參與糖尿病患者血壓的調控，并且血糖與血壓兩者水平的升高可能有一定的疊加作用；多元線性回歸分析結果顯示，血清LGR4水平與SBP、DSP均呈正相關，提示LGR4可能通過正向調節糖尿病患者血壓水平影響患者血壓情況。

綜上所述，糖尿病合并高血壓患者體內血清LGR4水平顯著升高，LGR4與血壓水平呈正相關，LGR4可能與糖尿病患者高血壓的發生、發展存在著密切的關系。