血清VEGF、NO水平變化與喉癌患者頸淋巴結轉移的關聯性分析

陳英杰

(鄭煤集團總醫院檢驗科，河南 新密 450371)

喉癌為頭頸部多發惡性腫瘤疾病，其發病率約占惡性腫瘤總發病率的1%～5%，對患者身心健康及生活質量均造成了極大影響[1，2]。臨床經驗得知，喉癌病灶侵襲及轉移是對患者臨床療效及預后造成不利影響的重要原因，因此臨床將研究重點轉向腫瘤發生及轉移分子機制方面。同時，林少雄等[3]研究顯示，若喉癌發生頸淋巴結轉移，則5年生存率會降低約50%，而準確評估頸淋巴結轉移發生、及早確定有效干預方案，則可延長患者生存期限，改善生存質量。目前，臨床用于喉癌頸淋巴結轉移評估的措施主要包括MRI及CT檢查，但準確度及敏感度較低。多種惡性腫瘤疾病血清NO含量均異常增高，且在機體抗腫瘤免疫、腫瘤發生及進展等中具有重要作用；而VEGF被稱為特異性新生淋巴管刺激因子，包括PDGF、PIGF等多個成員，可對腫瘤淋巴結轉移產生刺激作用[4，5]。為此，選取我院61例喉癌患者，通過設置對照組，探討血清VEGF、NO水平變化與喉癌患者頸淋巴結轉移的關聯性。如下報告。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2015年10月-2017年8月喉癌患者61例設為觀察組、喉部良性病變者61例設為對照組，另選取同期于我院健康體檢者61例設為健康組。觀察組男39例，女22例；年齡39～71 歲，平均（54.82±12.60）歲；TNM 分期：Ⅱ期 21例，Ⅲ期24例，Ⅳ期16例；頸淋巴結轉移情況：轉移者25例，未轉移者36例。對照組男37例，女24例；年齡 39～71 歲，平均（55.27±11.90）歲。 健康組男41 例，女 20 例；年齡 40～73 歲，平均（54.33±12.24）歲。3組年齡、性別等臨床資料比較無明顯差異（P＞0.05），且本研究經我院倫理委員會審批通過。

1.2 選取標準

1.2.1 納入標準 ⑴觀察組經病理檢查確診；⑵既往未接受放化療治療；⑶觀察組與對照組均接受手術治療；⑷知曉本研究，簽署同意書。

1.2.2 排除標準 ⑴并發其他惡性腫瘤疾病者；⑵并發血液系統、內分泌系統嚴重病變者；⑶并發全身性嚴重感染性疾病者。

1.3 方法 入院后第2d晨起時抽取各組受檢者空腹靜脈血4ml，常溫下放置約40～55min，離心處理（400g，5min），取上清液，置于-70℃環境中儲存待檢；以酶聯免疫吸附法測定血清血管內皮生長因子（VEGF）水平，以硝酸還原酶法檢測血清一氧化氮（NO）水平，試劑盒均購于南京生物工程研究所。

1.4 觀察指標 ⑴統計對比3組血清VEGF及NO水平。⑵統計對比不同頸淋巴結轉移情況喉癌患者血清VEGF及NO水平。⑶統計分析血清VEGF及NO水平與喉癌頸淋巴結轉移的關聯性。

1.5 統計學分析 通過SPSS 20.0對數據進行分析，以（±s）表示計量資料，t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，多重比較采用LSD-t檢驗，血清VEGF及NO水平與喉癌頸淋巴結轉移相關性以Person予以分析，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組血清VEGF及NO水平比較 單因素方差分析可知，3組血清VEGF及NO水平比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。觀察組血清VEGF及NO水平較對照組、健康組高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表 1。

表1 3組血清VEGF及NO水平比較（±s）

表1 3組血清VEGF及NO水平比較（±s）

組別觀察組對照組健康組n 6 1 6 1 6 1 F P V E G F（u g/L） N O（u m o l/L）4.7 2±0.5 5 2.6 7±0.4 6 0.8 7±0.3 3 1 0 9 0.0 2 0 0.0 0 0 1 1 8.3 2±2 0.1 1 8 8.6 3±1 8.6 3 6 4.5 3±1 4.7 9 1 3 6.9 2 4 0.0 0 0

2.2 不同頸淋巴結轉移情況患者血清VEGF及NO水平比較 淋巴結轉移患者血清VEGF及NO水平較未結轉移患者高，差異有統計學意義 （P＜0.05）。 見表 2。

表2 不同頸淋巴結轉移情況患者血清VEGF及NO水平比較（±s）

表2 不同頸淋巴結轉移情況患者血清VEGF及NO水平比較（±s）

組別淋巴結轉移患者淋巴結未轉移患者n 25 36 t P VEGF（ug/L） NO（umol/L）5.10±0.61 4.33±0.49 5.457 0.000 128.41±22.14 112.34±19.76 2.973 0.004

2.3 血清VEGF及NO水平與喉癌頸淋巴結轉移關聯性分析 Person檢驗可知，血清VEGF及NO水平與喉癌頸淋巴結轉移存在明顯正相關關系（P＜0.05）。 見表 3。

表3 血清VEGF及NO水平與喉癌頸淋巴結轉移關聯性分析（n=61）

3 討論

早期對喉癌進行確診，并及時制定有針對性干預措施，是確保患者可取得良好臨床療效及預后效果的重要前提[6，7]。喉癌預后效果影響因素較多，其中頸淋巴結轉移是造成喉癌病死率居高不下的重要原因，因此如何早期檢出頸淋巴結轉移病灶，并對其進行規范處理成為當前研究重點，同時是臨床公認的喉癌治療關鍵所在。Gandouredwards R等[8]研究顯示，MRI及CT均為臨床診斷喉癌的常用檢查措施，但準確度及敏感度均不佳，其中MRI檢查在直徑不足10mm的淋巴結中準確度僅約50%，而CT檢查更低。

結果顯示，觀察組血清VEGF水平較對照組及健康組高，且疾病出現頸淋巴結轉移后增高幅度更明顯，表明喉癌患者血清VEGF含量異常增高，且發生頸淋巴結轉移后可進一步。相關學者認為，腫瘤血管生成在腫瘤發生及進展過程中具有重要作用，若無新生血管出現，則單個腫瘤克隆灶體積通常≤2mm3，而VEGF為當前臨床所發現的最重要血管生成因子，多將其作為腫瘤轉移、代謝等標志物[9]。此外，微血管生成和腫瘤持續生長及轉移、侵襲關系密切，受部分基質水解酶影響，腫瘤細胞自身不僅能對基底膜MMPs產生分泌降解作用，還可活化VEGF等，間接促使血管內皮細胞生成MMPs，并將細胞外基質、基底膜等予以降解，以此促進腫瘤新生血管形成。VEGF可結合于受體后特異性作用于血管內皮，提高血管通透性，刺激血管內皮細胞增殖，加速新生血管形成，臨床多項研究指出，VEGF為功能較為強大，同時可造成多種生物學效應的一種細胞因子，為PDGF（血小板衍生生長因子）家族重要成員，在人與動物骨骼、胰腺、脾臟、肝臟、腎臟、大腦及其他組織內均有廣泛分布，是特異性高、作用最強的血管形成調控因子類型，在腫瘤發生及轉移等中均具有重要作用[10，11]。另有相關研究證實，前列腺癌、結直腸癌、肺癌、乳腺癌及其他腫瘤組織內VEGF均呈高表達狀態，且可促進腫瘤新生血管形成，誘導腫瘤細胞失控增殖[12-14]。

另由研究結果可知，觀察組血清NO含量較高，且其表達水平隨著頸淋巴結轉移而增高，表明喉癌發病后NO含量也可導致血清NO含量異常增多，且兩者間存在正相關關系，提示臨床可通過測定血清NO水平診斷喉癌，并對頸淋巴結轉移情況予以評估。NO為臨床新發現的生物活性因子及信使分子，在機體多種病理及生理過程中均有所參與，特別是在腫瘤病理過程中。機體中NO主要經一氧化氮合成酶（NOS）催化生成，NOS可分為結構型NOS（cNOS）及誘導型 NOS（iNOS），其中 iNOS 為NOS最活躍亞型，其于正常組織內幾乎無表達，而機體發生病變后則會生成大量NO。同時，Bayramoglu I等[15]研究顯示，NO可作為信使分子于淋巴管內皮細胞中發揮重要的信息傳遞功能，是淋巴管內皮細胞增生最直接的信號，而內皮細胞具備該信號傳遞，可確保淋巴管內皮細胞增生，進而促進淋巴管形成，促使淋巴結轉移。李文媛等[16]表明，iNOS所誘導產生的NO能經多種機制對腫瘤發生與進展產生促進作用，主要包括：⑴擴大腫瘤血管，進而改善腫瘤內部微循環狀態；⑵促使腫瘤轉移；⑶抑制腫瘤細胞凋亡；⑷抑制腫瘤抑制基因及DNA修復酶；⑸激活癌基因；⑹加劇DNA損傷。

綜上所述，喉癌患者血清VEGF、NO水平異常增高，且發生頸淋巴結轉移的患者增高更為明顯，其增高水平與頸淋巴結轉移存在明顯正相關關系，但為單中心研究，且樣本量選取較少，因此研究結果是否具有廣泛效力仍需多中心擴大樣本量進一步探究證實。