紫杉醇對乳腺癌腫瘤免疫逃逸干預作用的臨床研究

赤慶華 薛江楠

摘要 目的：探討紫杉醇對乳腺癌腫瘤免疫逃逸的干預作用。方法：收治行吡柔比星+環磷酰胺+紫杉醇化療方案治療的乳腺癌患者60例作為觀察組，門診體檢者40例作為對照組。檢測觀察組治療前、中、后及對照組外周血CD4+CD25+Tr細胞水平、血清Thl細胞因子（IL-12、IFN-γ）、Th2細胞因子（IL-4、IL-10）水平及IFN-γ/IL-4。結果：觀察組治療前、治療中外周血CD4+CD25+Tr細胞水平明顯高于對照組（P<0.05），觀察組治療后外周血CD4+CD25+Tr細胞水平較治療前、治療中明顯降低（P<0.05）；觀察組治療前、治療中Thl細胞因子（IL-12、IFN-¨表達水平及IFN-γ/IL-4明顯低于對照組（P<0.05），而Th2細胞因子（IL-4、IL-10）表達水平明顯高于對照組（P<0.05），觀察組治療后Thl細胞因子表達水平及IFN-γ/IL-4較治療前、治療中明顯升高（P<0.05），而Th2細胞因子表達水平明顯降低（P<0.05）。結論：紫杉醇可能具有抑制乳腺癌腫瘤免疫逃逸的作用機制。

關鍵詞 紫杉醇；乳腺癌；腫瘤免疫逃逸；抑制調節性T細胞

乳腺癌是常見于女性的惡性腫瘤，目前多采用乳腺癌根治術予以治療，術后多需實施化療方案進行治療，但化療藥物可對患者免疫系統造成一定損傷和抑制作用，因此認為化療可明顯抑制患者免疫系統功能。但近些年有研究發現，某些化療藥物可明顯增強腫瘤細胞的免疫原性，顯著促進腫瘤細胞大量釋放內源性危險信號，同時還通過抑制調節性T細胞（Treg）等作用機制介導抗腫瘤免疫反應[1.2]。紫杉醇是抗癌藥理效應作用較強的藥物，可促進白細胞介素（IL）-12的分泌，從而糾正腫瘤組織誘導產生的免疫系統功能失常現象[3]。

本研究擬探討紫杉醇對乳腺癌腫瘤免疫逃逸的干預作用，為臨床應用提供依據。

資料與方法

2016年2月-2017年10月收治術后行化療方案治療的乳腺癌患者60例，手術治療前行病理組織實驗室檢查均已確診。年齡37～62歲，平均（48.7±9.5）歲。選擇同期門診體檢者40例作為對照組，年齡35～60歲，平均（46.6±9.2）歲。均除外合并有自身免疫系統疾病、感染反應等。兩組年齡比較，差異無統計學意義（P>0.05）。所有患者和體檢者均簽署知情同意書。

治療方法：所有乳腺癌患者入院后均實施吡柔比星（ADM）+環磷酰胺（CTX）+紫杉醇化療方案進行治療，ADMf治療劑量40 mg/m2），靜脈滴注，第1天；CTX（治療劑量600 mg/m2），靜脈滴注，第1天，21d為1個周期，連續治療4個周期。然后序貫紫杉醇（治療劑量175mg/m2），靜脈滴注3h，第1天，21d為1個周期，連續治療4個周期。

兩組CD4+CD25+Tr細胞水平檢測：采用流式細胞儀檢測觀察組治療前、治療中、治療后及對照組外周血CD4+CD25+Tr細胞水平，外周血采用FACS緩沖液洗滌干凈后加入固定液，室溫條件下避光孵育作用20min，洗滌后將懸浮細胞置于FoxP3緩沖液中，室溫條件下避光作用15min，洗滌干凈后，分成5管，分別加入同型對照，FITC-CDllb、PE-CDllb、APC-B220、APC-B220+FITC-CD4+PE-FoxP3各20uL，室溫條件下避光作用30min，使用染色緩沖液洗滌2次，上機進行分析，確認FoxP3的細胞，即認定為CD4+CD25+Tr細胞比例。

兩組血清Thl、Th2細胞因子表達水平檢測：所有乳腺癌患者治療前、治療中和治療后及對照組均抽取外周靜脈血液5mL，離心處理和分離血清，采用ELISA法檢測血清Thl細胞因子（IL-12、IFN-γ）和Th2細胞因子（IL-4、IL-10）表達水平。

統計學分析：采用SPSS 18.0統計學軟件分析本研究數據，計數資料采用t檢驗，計量資料比較采用X2檢驗，以P<0.05表示差異有統計學意義。

結果

觀察組不同時間點及對照組外周血CD4+CD25+Tr細胞水平比較：觀察組治療前、治療中外周血CD4+CD25+Tr細胞水平明顯高于對照組（P<0.05），觀察組治療后外周血CD4+CD25+Tr細胞水平較治療前、治療中明顯降低（P<0.05），而與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表l。

兩組血清Thl、Th2細胞因子水平及Thl/Th2比較：觀察組治療前、治療中Thl細胞因子（IL-12、IFN-γ）表達水平及IFN-γ/IL-4明顯低于對照組（P<0.05），而Th2細胞因子（IL-4、IL-10）表達水平明顯高于對照組（P<0.05）；觀察組治療后Thl細胞因子表達水平及IFN-γ/IL-4較治療前、治療中明顯升高（P<0.05），而Th2細胞因子表達水平明顯降低（P<0.05），與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表2。

討論

近些年臨床對腫瘤發病機制的深入研究發現腫瘤疾病的發生、發展過程是腫瘤細胞和宿主細胞之間相互對抗的過程，兩者相互作用對于腫瘤組織發展、遠處臟器組織轉移和轉歸均發揮著十分重要的作用，而宿主免疫系統及其微環境也在疾病發生、發展過程中占有重要地位[4]。

CD4+CD25+Tr細胞的發現是近些年免疫學領域的重大突破，相關研究證實，CD4+ CD25 +Tr細胞可通過分泌TGF-B l、IL-10等免疫系統功能抑制細胞因子，從而在免疫系統抑制中發揮重要的作用。機體免疫系統功能狀態與腫瘤疾病發生、發展之間存在密切聯系，根據CD4+Th細胞分泌的細胞因子的差異性，分為Th0、Thl、Th2等T細胞亞型。正常狀態下，Thl與Th2淋巴細胞亞群水平處于平衡狀態，維持正常免疫系統功能[5.6]；惡性腫瘤患者Thl細胞受到明顯抑制，而Th2細胞占有優勢地位，Thl/Th2向Th2方向發生漂移現象，使得機體抗腫瘤免疫監視的生理功能明顯降低。IL-12細胞因子可促進Th0分化為Thl，而Thl可大量分泌IFN-γ[7]。IL-12、IFN-γ均為Thl型細胞因子，可通過各種途徑起到抗腫瘤的生理學作用，最終加強免疫系統識別機體內腫瘤細胞的作用，殺滅腫瘤細胞等。IL-4是介導Th2細胞發育的重要因子，Th2細胞可分泌IL-4、IL-10等細胞因子，進而抑制機體抗腫瘤免疫系統功能。

紫杉醇是從紫杉類或紅豆杉植物中分離產生的化療藥物，其主要通過促進微管的形成過程，起到抑制腫瘤細胞有絲分裂和阻礙紡錘體的形成，最終使得腫瘤細胞大量死亡。此外，紫杉醇還具有免疫修飾的生理學作用，可明顯促進白細胞介素及干擾素的大量釋放，起到殺傷或抑制腫瘤細胞生長的藥理作用，目前紫杉醇已廣泛用于腫瘤疾病的治療[8]。既往研究中關于紫杉醇參與乳腺癌免疫逃逸的臨床文獻報道較為少見，有相關研究認為，紫杉醇可有效抑制腫瘤細胞誘導產生的巨噬細胞免疫抑制作用，從而使得巨噬細胞恢復免疫細胞因子能力。

本研究結果顯示，觀察組治療前、治療中外周血CD4+CD25+Tr細胞水平、Th2細胞因子（IL-4、IL-10）表達水平明顯高于對照組fP<0.05），觀察組治療后外周血CD4+CD25+Tr細胞水平較治療前、治療中明顯降低（P<0.05），而與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）；觀察組治療前、治療中Thl細胞因子（IL-12、IFN-¨表達水平及IFN-γ/IL-4明顯低于對照組（P<0.05），觀察組治療后Thl細胞因子表達水平及IFN-γ/IL-4較治療前、治療后明顯升高（P<0.05），與對照組比較，差異無統計學意義（P>0.05）。由此可知，紫杉醇可能具有抑制乳腺癌腫瘤免疫逃逸的作用機制。

參考文獻

[1] Lake RA，Robinson BW.lmmunotherapy andchemotherapy-a practical partnership[J].JNat Rev Cancer，2005，5（5）：397-405.

[2]Cattinoni L，Powell DJ， Rosenberg SA， etal. Adoptive immunotherapy for cancer：building on success[J].J Nat Rev Immunol，2006，6（5）：383-393.

[3]戚麟，高天慧，劉明月，等.紫杉醇酯質體與普通紫杉醇治療胃癌療效比較[J].山東醫藥，201 1，51（16）：66-67.

[4] 閻永貞，那可，魏曉東，等.腫瘤免疫逃逸機制的研究進展[J].復旦學報（醫學版），2013，40（5）：619-624.

[5]吳春健，王佃云.初晶學.乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Treg細胞及Thl/Th2類細胞因子水平測定及意義[J].山東醫藥，2010，50（35）：20-22.

[6]丘嫦，陳前軍，戴燕，等.扶正益氣法對乳腺癌輔助化療患者Thl/Th2細胞漂移的影響研究[J].新中醫，2014，46（8）：139-142.

[7]王翠，張學敏，王勝林，等.107例乳腺癌患者靜滴紫杉醇的用藥觀察及護理[J].河北醫學，2010，16（5）：612-614.

[8]商紅云.乳腺癌根治術后應用紫杉醇化療的護理[J].中國實用醫藥，2012，7（16）：226-227.