不同分型幽門螺桿菌感染對消化性潰瘍患者血清IL-10、IL-17及TNF-α水平的影響

鞏會杰，張逸強，李東方

消化性潰瘍是指發(fā)生于胃、十二指腸的慢性潰瘍，為臨床常見病、多發(fā)病，患者以中上腹疼痛及反胃、噯氣、唾液分泌增多等其他胃腸道反應(yīng)為主要臨床表現(xiàn)。其致病菌中，幽門螺桿菌（Helicobacter pylori, HP）占80%以上，是主要致病菌[1]。HP感染可損害胃黏膜屏障，進而致使消化性潰瘍產(chǎn)生。近年來，有關(guān)研究表明，不同分型HP感染與消化性潰瘍類別及病情程度可能存在相關(guān)性[2]。另有研究發(fā)現(xiàn)， IL-10、IL-17等血清炎性因子在不同分型HP感染中水平差異顯著，而TNF-α可能參與消化性潰瘍的發(fā)生[3]?；诖?，本研究以158例消化性潰瘍患者為研究對象，旨在進一步探討不同分型HP感染的消化性潰瘍患者血清IL-10、IL-17及TNF-α的水平表達(dá)及臨床意義?，F(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1　對象與方法

1.1 對象 選取2016年1月—2017年6月駐馬店市中心醫(yī)院消化內(nèi)科收治的158例消化性潰瘍患者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合消化性潰瘍臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；②經(jīng)血常規(guī)、生化等檢查排除其他炎癥性疾?。虎奂韧鶡oHP根除治療史；④就診前2個月未經(jīng)任何治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①嚴(yán)重肝腎功能不全者；②惡性腫瘤患者；③免疫系統(tǒng)疾病者；④胃食管反流患者；⑤復(fù)合性潰瘍患者；⑥妊娠、哺乳期婦女。158例患者中，男97例，女61例；年齡31～73歲，平均（47.28±7.62）歲。胃潰瘍69例，潰瘍灶72個，潰瘍直徑0.50～1.90 cm，平均（1.22±0.64）cm；十二指腸潰瘍患者89例，潰瘍灶91個，潰瘍直徑0.40～2.00 cm，平均（1.16±0.59）cm。經(jīng)14C尿素呼氣試驗測定為HP陽性109例，HP陰性49例（HP陰性組）；后經(jīng)HP分型檢測實驗測定HP陽性者中HP I型58例（HP I組），HP II型51例（HP II組）。3組間患者臨床一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05），詳見表1。本研究經(jīng)患者知情同意，獲醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

表1 3組間患者一般資料比較Table 1 Comparison of general data among 3 groups

1.2 方法

1.2.1 HP感染檢測及判定方法 患者均行14C尿素呼氣試驗：患者空腹3 h后，口服14C尿素膠囊1粒（1 uci37kBq，上海欣科醫(yī)藥有限公司），靜坐30 min；受試者往YH04 HP檢測儀呼氣卡（安徽養(yǎng)和醫(yī)療器械設(shè)備有限公司）內(nèi)呼氣，時長2～5 min；當(dāng)呼氣卡上提示窗表明卡片顏色從藍(lán)色變成白色時，完成采樣。儀器自動檢測并打印試驗結(jié)果。結(jié)果采用放射性計數(shù)dpm/mmol表示，以試驗結(jié)果≥100 dpm/mmol為HP陽性，＜100 dpm/mmol為 HP陰性[5]。

1.2.2 HP分型檢測實驗 HP可以分泌毒素?fù)p壞人體細(xì)胞，產(chǎn)細(xì)胞毒素的HP是I型，不能產(chǎn)生毒素的是II型。采用HP抗體分型檢測試劑盒（深圳伯勞特生物制品有限公司），取患者靜脈血1.5～2.0 ml，按說明書操作。免疫印跡技術(shù)結(jié)果若顯示，尿素酶抗體，caga和/或vaca抗體均陽性則為HP I型；若僅顯示尿素酶抗體陽性，caga和vaca抗體陰性，則為HP II型；若caga、vaca和尿素酶抗體均陰性，則為HP陰性。

1.2.3 血清IL-10、IL-17、TNF-α水平檢測方法 抽取所有患者5 ml清晨空腹靜脈血，分離血清后存留備測。通過ELISA測定血清IL-10、IL-17及TNF-α水平，試劑均源自廣州賽哲生物科技股份有限公司，操作遵循試劑說明嚴(yán)格執(zhí)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采取SPSS 22.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，計數(shù)資料用百分比（%）表示，行χ2檢驗；計量資料用±s表示，血清IL-10、IL-17、TNF-α水平在各組中的比較行成組t檢驗或單因素方差分析，兩兩比較行LSD-t檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)　果

2.1 3組血清IL-10、IL-17及TNF-α水平 HP I型組、HP II型組血清IL-10、IL-17及TNF-α水平高于HP陰性組（P均＜0.05）；HP I型組血清IL-10、IL-17及TNF-α水平高于HP II型組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）。詳見表2。

表2 3組患者血清IL-10、IL-17及TNF-α水平比較（pg/ml）Table 2 Comparison of IL-10, IL-17 and TNF-α levels among 3 groups(pg /ml)

2.2 各組中胃潰瘍與十二指腸潰瘍患者血清IL-10表達(dá) HP I型組中，十二指腸潰瘍患者血清IL-10水平高于胃潰瘍患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。HP II型組、HP陰性組中胃潰瘍與十二指腸潰瘍患者血清IL-10水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。詳見表3。

表3 各組中胃潰瘍與十二指腸潰瘍患者血清IL-10的表達(dá)水平（pg/ml）Table 3 Expression level of serum IL-10 in gastric ulcer patients and duodenal ulcer patients in each group(pg/ml)

2.3 各組中胃潰瘍與十二指腸潰瘍患者血清IL-17表達(dá) HP I型組、HP II型組中，十二指腸潰瘍患者血清IL-17水平高于胃潰瘍患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）。HP陰性組中十二指腸潰瘍與胃潰瘍患者血清IL-17水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。詳見表4。

表4 各組中胃潰瘍與十二指腸潰瘍患者血清IL-17的表達(dá)水平比較（pg/ml）Table 4 Expression level of serum IL-17 in gastric ulcer patients and duodenal ulcer patients in each group(pg/ml)

2.4 各組中胃潰瘍與十二指腸潰瘍患者血清TNF-α表達(dá) HP I型組中，十二指腸潰瘍患者血清TNF-α水平高于胃潰瘍患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。HP II型組、HP陰性組中胃潰瘍與十二指腸潰瘍患者血清TNF-α水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。詳見表5。

表5 各組中胃潰瘍與十二指腸潰瘍患者血清TNF-α的表達(dá)水平（pg/ml）Table 5 Expression level of serum TNF-α in gastric ulcer patients and duodenal ulcer patients in each group(pg/ml)

3　討　論

HP感染作為消化性潰瘍的主要致病因素，其定植、粘附及其毒力因子均可損害胃腸黏膜，使得生長抑素、胃泌素分泌增加，進而導(dǎo)致黏膜上皮炎性改變和壞死，最終誘發(fā)消化性潰瘍[6]。當(dāng)前，通過何種指標(biāo)對HP感染分型進行診斷并對消化性潰瘍進行有效防治成為臨床診治及研究的重點。

相關(guān)研究表明，抗炎因子及促炎因子釋放失衡時可造成胃黏膜受損，其參與消化性潰瘍的發(fā)生及進展[7]。IL-10是一種多功能細(xì)胞因子，可抑制免疫細(xì)胞活性，發(fā)揮抗炎作用，并可通過對T細(xì)胞的抑制維持機體免疫反應(yīng)狀態(tài)?；颊咄庵苎o助性T細(xì)胞（T helper cell, TH）亞群TH1和TH2分泌因子負(fù)反饋通常情況下能夠制約TH1和TH2細(xì)胞平衡，而HP感染將促使免疫應(yīng)答在TH1中抑制、TH2中增強，故而導(dǎo)致患者血清IL-10表達(dá)增加[8-10]。IL-17是由活化T細(xì)胞產(chǎn)生的致炎因子，可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞分泌IL-6、IL-8等多種細(xì)胞因子，進而致使炎癥發(fā)生。已有研究發(fā)現(xiàn)，IL-17、TNF-α在不同分型HP感染消化性潰瘍患者中變化顯著[11]。而TNF-α是重要促炎因子，能夠誘導(dǎo)分泌IL-8等炎性因子，并可促使中性粒細(xì)胞移動，造成中性粒細(xì)胞粘附，白細(xì)胞于血管壁內(nèi)穿出，進而導(dǎo)致胃黏膜內(nèi)皮細(xì)胞受損，引起胃黏膜損傷[12-14]。相關(guān)研究顯示，血清TNF-α水平在感染HP I型消化性潰瘍患者中達(dá)（42.66±11.41）pg/ml，高于感染HP II型消化性潰瘍患者的（28.67±8.27）pg/ml、HP陰性消化性潰瘍患者的（11.24±4.31）pg/ml[15]。HP感染可通過增強TNF-α分泌，作用于胃竇細(xì)胞，進而促使胃酸分泌增加，誘發(fā)十二指腸炎癥[16]。程曉娜等[17]研究發(fā)現(xiàn)，TNF-α、IL-10在HP I型、HP II型消化性潰瘍患者中的表達(dá)高于HP陰性患者，其中TNF-α在感染HP I型的十二指腸潰瘍患者中的表達(dá)高于胃潰瘍患者。提示TNF-α表達(dá)與潰瘍部位相關(guān)，TNF-α、IL-10聯(lián)合檢測利于消化性潰瘍患者的HP分型診斷。另有研究表明，各型組潰瘍患者血清IL-10、IL-17及TNF-α的表達(dá)差異顯著，尤以HP I型組表達(dá)增高顯著[18]。本研究數(shù)據(jù)顯示，HP I型組、HP II型組IL-10、IL-17及TNF-α水平高于HP陰性組，HP I型組IL-10、IL-17及TNF-α水平又高于HP II型組，這表明HP I型菌株毒性更強，更容易造成胃黏膜損傷； HP I型組十二指腸潰瘍患者血清IL-10、IL-17及TNF-α水平高于胃潰瘍患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義； HP II型組十二指腸潰瘍患者血清IL-17水平高于胃潰瘍患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，而IL-10、TNF-α水平差異則無統(tǒng)計學(xué)意義。提示血清IL-10、IL-17及TNF-α水平相結(jié)合可反映HP感染分型及潰瘍部位。

綜上所述，不同分型HP感染消化性潰瘍患者血清IL-10、IL-17及TNF-α水平存在較大差異，可對臨床鑒別診斷提供參考，進而為臨床預(yù)防和治療提供依據(jù)。但本研究樣本量較小，影響結(jié)果的普遍性，故還有待行進一步大樣本實驗的檢驗。